甲基汞对仔鼠脑发育影响及蛋白质组学研究

甲基汞对仔鼠脑发育影响及蛋白质组学研究

论文摘要

甲基汞是重要的全球性污染物和持续性有机污染物(POP),具有强神经毒性,胎幼儿脑组织对其神经毒性作用尤为敏感。为了解长期低剂量接触甲基汞对中枢神经系统发育的影响,本研究建立了长期接触氯化甲基汞致大鼠脑发育损伤实验动物模型,采用毒理学,分子生物学和蛋白质组学技术研究了甲基汞暴露对大鼠仔鼠脑发育的影响及发育过程中蛋白质差异表达。研究发现:孕期及哺乳期甲基汞暴露可影响大鼠仔鼠的脑发育,仔鼠脑汞含量明显升高,神经元凋亡率增加。甲基汞暴露可造成仔鼠脑发育过程中蛋白的差异表达,出现差异表达蛋白中有9种蛋白参与体内能量代谢、线粒体功能和信号传导过程,与甲基汞神经毒性作用密切相关。本研究为甲基汞神经毒作用分子机制的研究和预防提供理论依据,具有重要的理论和现实意义。

论文目录

  • 内容提要
  • 前言
  • 第一章 文献综述
  • 一、甲基汞神经毒作用研究进展
  • 1、甲基汞污染概况
  • 2、甲基汞的神经毒性效应
  • 3、甲基汞可能的神经毒作用机制
  • 二、蛋白质组技术进展
  • 1、蛋白质组(proteome)的概念
  • 2、蛋白质组的研究技术
  • 3、汞中毒蛋白质组研究的重要意义
  • 第二章 甲基汞对大鼠子代脑发育的影响
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 三、实验结果
  • 四、讨论
  • 第三章 甲基汞致大鼠脑发育损伤蛋白质组研究
  • 一、实验材料和仪器设备
  • (一) 主要试剂和材料
  • (二) 主要仪器设备
  • (三) 主要试剂配制
  • 二、实验设计
  • 三、实验方法
  • 四、实验结果
  • (一) Bradford 方法检测蛋白质含量
  • (二) 甲基汞染毒蛋白质组一维电泳和液质联用分析
  • (三) 光镜下形态学改变
  • (四) 模型组和正常组鼠海马蛋白质组双向电泳(2DE)图谱
  • (五) 染毒I组与对照组I组差别表达蛋白的质谱鉴定
  • (六) 染毒II组与对照II组差别表达蛋白的质谱鉴定
  • 五、讨论
  • (一) Bradford 法测定蛋白含量影响因素
  • (二) 样品处理
  • (三) 蛋白质的定量准确与否直接影响到实验结果的可信度
  • (四) 电解质配比与电聚焦
  • (五)图像调整扫描
  • (六) 检测出染毒脑中蛋白质异常可能的原因
  • (七)样品的准备
  • (八) 差别表达蛋白的功能分析
  • (九) 鉴定蛋白质的质量评价
  • 结论
  • 参考文献
  • 博士期间发表学术论文
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 致谢
  • 相关论文文献

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