全反式维甲酸对TGF-β诱导的肾小球系膜细胞COX-2表达及Smad3、Smad7信号通路的影响

论文摘要

目的:研究全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,ATRA）对转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β）刺激系膜细胞COX-2及Smad3、7蛋白表达的影响,探讨TGF-β/Smad信号通路在大鼠系膜细胞表达COX-2中的作用,以及ATRA在TGF-β/Smad信号通路中对系膜细胞表达COX-2的影响作用,为ATRA应用于肾脏病领域提供理论依据。方法:取培养第4代的大鼠肾小球系膜细胞分组:（1）对照组;（2）TGF-β刺激组（5、10ng/mL）;（3）TGF-β+NS398（COX-2抑制剂）组（10μmol/L NS398 +10ng/mLTGF-β）;（4）TGF-β+Staurosporin（eSmad抑制剂）组（5nmol/mLStaurosporine+10ng/mLTGF-β）;（5）药物组:ATRA（10-3、10-6、10-9 mol/L）预处理24h后,再加TGF-β（10ng/ml）共培养,在不同的作用时间（4h,12h,24h）,Western Blot印迹法测定各组COX-2、Smad3、Smad7蛋白的表达变化。结果:1.在外源性TGF-β刺激下,COX-2、Smad3、Smad7蛋白的表达明显增加。TGF-β刺激后1h COX-2水平开始增加,24h左右达高峰。Smad3、7蛋白水平在刺激后1h明显增加,12-24h左右达高峰。各组与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。2.分别用5ng/mL和10ng/mL的TGF-β作用不同时间后,系膜细胞COX-2表达增加,呈时间和浓度依赖性,加入COX-2抑制剂NS-398和Smad抑制剂Staurosporine后COX-2表达均减少,与不同浓度TGF-β组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。3.用不同浓度的TGF-β作用不同时间后,系膜细胞Smad3、7蛋白表达增加,呈时间和浓度依赖性,加入COX-2抑制剂NS-398和Smad抑制剂Staurosporine后Smad3、7表达均减少,与不同浓度TGF-β组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。4. ATRA（10-3、10-6、10-9 mol/L）预处理24h后,再加TGF-β刺激（4h,12h,24h）,药物组和TGF-β组比较COX-2、Smad3、7蛋白的表达明显减少（P<0.05）,呈浓度依赖性。5. COX-2蛋白的表达与Smad3蛋白的表达呈显著正相关（P<0.05）, COX-2蛋白的表达与Smad7蛋白的表达呈显著正相关（P<0.05）。结论:1. TGF-β可刺激系膜细胞COX-2蛋白的表达,且呈时间和浓度依赖性。2. TGF-β可刺激系膜细胞Smad3蛋白的表达,呈时间和浓度依赖性。3. TGF-β可刺激系膜细胞Smad7蛋白的表达,呈时间和浓度依赖性。4. TGF-β可刺激系膜细胞COX-2、Smad3、7蛋白的表达,可被NS-398和Staurosporine所抑制,呈时间依赖性。5. ATRA能抑制TGF-β对系膜细胞COX-2蛋白的表达,呈浓度依赖性。6. ATRA能抑制TGF-β对系膜细胞Smad3蛋白的表达,呈浓度依赖性。7. ATRA能抑制TGF-β对系膜细胞Smad7蛋白的表达,呈浓度依赖性。8. ATRA可能通过TGF-β/Smad信号通路抑制系膜细胞COX-2的表达,显示其具有良好的抗纤维化和抗细胞增殖作用。

论文目录

• 英文缩略词表（Abbreviation）
• 中文摘要（Abstract in Chinese）
• 英文摘要（Abstract in English）
• 前言（Introduction）
• 材料和方法（Material and Method）
• 结果（Results）
• 讨论（Discussion）
• 结论（Conclusion）
• 参考文献（References）
• 综述（Review）
• 综述参考文献（References）
• 致谢（Acknowledgements）