骨髓增生异常综合征和再生障碍性贫血患者骨髓原始细胞免疫表型分析

论文摘要

目的检测骨髓增生异常综合征（MDS）和再生障碍性贫血（AA）患者骨髓原始细胞免疫表型特征,探讨免疫表型对二者发病机制、诊断、分型及鉴别诊断的临床意义。方法采用常规骨髓穿刺术,分别抽取23例MDS、14例AA、9例正常对照者的骨髓各2ml;选用多种单克隆抗体（抗体组合分别为CD25/CD34/CD45、HLA-DWCD3/CD45、CD14/CD13/CD45、CD22/CD33/CD45、CD15/CD7/CD45、CD5/C1l9/CD45、CD10/CD20/CD45及IgG1同型对照）,应用直接免疫荧光法采用流式细胞术CD45/SSC设门法,对骨髓单个核细胞各免疫标志的表达率进行检测,并计算髓系细胞分化指数[DI值,DI=（CD13+CD33）/CD151,分析CD34和HLA-DR之间的相关关系。结果1、MDS组与正常对照组比较MDS组骨髓造血干/祖细胞抗原CD34、HLA-DR、髓系早期抗原CD13、CD33、单核系抗原CD14、T淋巴细胞抗原CD7的表达率均显著高于对照组（P＜0.05）,髓系成熟抗原CD15、B淋巴系抗原CD19、CD20的表达率均显著低于对照组（P＜0.05）,CD3、CD5、CD25、CD10、CD22的表达率差异无显著性意义（P＞0.05）;髓系细胞分化指数（DI值）显著高于对照组（P＜0.05）。2、RA组与RAEB组比较RAEB组CD34、HLA-DR、CD13、CD33、CD14、CD7的表达率均显著高于RA组（P＜0.05）,CD15、CD3、CD19、CD20的表达率均显著低于RA组（P＜0.05）,CD5、CD25、CD10、CD22的表达率差异无显著性意义（P＞0.05）;RAEB组的DI值显著高于RA组（P＜0.05）。3、AA组与正常对照组比较AA组CD34、CD13、CD33、CD15的表达率均显著低于对照组（P＜0.05）,CD3、CD7、CD25、CD22的表达率均显著高于对照组（P＜0.05）,HLA-DR、CD14、CD5、CD10、CD19、CD20的表达率与对照组相比无显著性差异（P＞0.05）。4、MDS组与AA组比较MDS组CD34、HLA-DR、CD13、CD33、CD14的表达率均显著高于AA组（P＜0.05）,CD3、CD5、CD7、CD15、CD19、CD20、CD22、CD25的表达率均显著低于AA组（P＜0.05）,CD10的表达率无显著性差异（P＞0.05）。5、对每一组内CD34和HLA-DR行相关分析,RA组、RAEB组、AA组和正常对照组的相关系数分别为0.909、0.834、0.777和0.755,均为P＜0.01,CD34和HLA-DR之间存在显著正相关。结论1、MDS组骨髓造血干/祖细胞标志CD34、HLA-DR、髓系早期标志CD13、CD33的表达率高于正常对照组,提示MDS异常克隆发生于造血干/祖细胞,且以髓系干细胞异常为主。随疾病进展,MDS的恶性克隆逐渐呈现优势性增长而对正常造血产生抑制,使骨髓中以异常的恶性克隆造血细胞为主;或者随疾病进展,恶性克隆造血细胞的分化潜力进一步下降,表现为RAEB较RA骨髓干/祖细胞及早期髓系标志表达率增高,而成熟髓系标志表达降低。2、AA患者骨髓单个核细胞的CD34表达率低于正常对照组,CD13、CD33、CD15的表达率亦降低,而髓系分化指数无显著性变化,提示AA的发病机制主要是造血干/祖细胞减少,而不存在分化障碍;而MDS髓系分化指数升高,提示其造血干/祖细胞存在分化障碍,为恶性克隆性干/祖细胞疾病。3、本研究引入了髓系分化指数同时研究MDS和AA,证实二者差异具有极显著性意义,这不仅有助于揭示二者发病机制的不同,亦为临床提供了简便、快捷、可靠的诊断及鉴别诊断方法。4、单核细胞表面相关抗原CD14的表达率较正常对照增高,提示MDS骨髓单核系存在异常,CD14表达紊乱。5、T淋巴系抗原CD3、CD5、CD25在AA组表达比正常对照组增高,提示AA患者存在T淋巴细胞功能亢进。6、B淋巴系抗原CD19、CD20在MDS组的表达率低于AA组和正常对照组,提示MDS患者B淋巴系早期抗原减少。可能与MDS骨髓内恶性克隆的扩增抑制了B淋巴系的增殖,或B淋巴系过度凋亡,或B系本身造血的异常有关。

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