论文题目: 茶多糖的分离纯化、结构及构效关系研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 食品科学
作者: 王元凤
导师: 金征宇
关键词: 茶多糖,分离,结构,降血糖活性,清除自由基活性,化学修饰
文献来源: 江南大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本文系统研究了茶多糖的提取、分离、纯化、理化性质、结构,并对其进行了化学修饰,同时对不同结构茶多糖降血糖活性和清除自由基活性进行了比较,这对于揭示茶多糖的结构与活性的关系、充分利用粗老茶叶资源、促进人类健康具有重大的学术意义和很大的应用价值。主要研究内容与结论如下: 1.采用去离子水、草酸铵溶液、氢氧化钠溶液分级提取茶叶多糖,对其单糖组成和降血糖活性进行比较,发现草酸铵提取的多糖糖醛酸质量分数最高,水提茶多糖降血糖活性最好,但水提茶多糖得率最低。采用第一次热水提取后的茶渣复合纤维素酶第二次提取,相对于原料的多糖提取率是热水提取的2.7倍,而且酶提茶多糖与水提茶多糖降血糖活性没有显著差异。 2.首先采用七种离子交换树脂和吸附树脂对茶多糖进行脱色,发现弱碱性阴离子交换树脂D315具有最好的脱色效果,同时还能很好地脱除蛋白质。然后对D315树脂分离茶多糖的工艺进行优化。经D315分离可得到糖醛酸含量低的茶多糖NTPS和糖醛酸含量高的茶多糖ATPS。单糖组成分析表明:NTPS以中性糖为主,主要由半乳糖组成;ATPS以酸性糖为主,主要由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成。DEAE52分离显示NTPS中的中性多糖是其主要的多糖级分,ATPS中的酸性多糖是其主要的多糖级分。 3.茶多糖NTPS和ATPS经DEAE Sepharose FF分离出四个级分NTPS1、ATPS2、ATPS3、ATPS4,经高效凝胶渗透色谱、SephadexG-150分子筛层析、琼脂糖凝胶电泳分析表明:NTPS1、ATPS2、ATPS4都是单一多糖,ATPS3由两种多糖组成。单糖组成分析表明:NTPS1不含半乳糖醛酸,主要由半乳糖组成;ATPS2、ATPS3、ATPS4均由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成。红外光谱表明:NTPS1是不含糖醛酸的中性糖,以β型差向异构为主,组成单糖以吡喃糖形式存在;ATPS2、ATPS3、ATPS4都是含糖醛酸的酸性糖,以α型差向异构为主,组成单糖既有吡喃糖,又有呋喃糖。高效凝胶色谱分析表明:NTPS1分子量为21247,ATPS2分子量为4430,ATPS3分子量为13387和7011,ATPS4分子量为19562。 4.对茶多糖NTPS1、ATPS2和ATPS4采用高碘酸氧化-Smith降解、1DNMR和2DNMR分析表明:NTPS1是一个β-1,4连接的半乳聚糖,重复单元为→4)-β-D-Galp-(1→4)-β-D-Galp-(1→。ATPS2、ATPS4都是果胶类多糖。ATPS2主链骨架包括1,4-连接的α-D-GalpA构成的无分支的光滑区和由1,2-连接的α-L-Rha和1,4-连接的α-D-GalpA交替连接构成的带分支的毛发区,骨架可表示为[→4)-α-D-GalpA-(1→4)-α-D-GalpA-(1→]_n-[→4)-α-D-GalpA-(1→2)-α-L-Rhap-(1→]_m,在鼠李糖的4位有分支,分支由α-L-Araf和β-D-Galp构成,该多糖中的GalpA形成了甲酯,而且含有较高含量的乙酰取代基;ATPS4的主链骨架是由重复单元→2)-α-L-Phap-(1→4)-α-D-GalpA-(1→构成,该多糖中
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第一章 绪论
1.1 茶多糖的研究概述
1.2 茶多糖的提取、分离和纯化
1.2.1 茶多糖的提取
1.2.2 茶多糖的分离
1.2.3 茶多糖的纯化
1.3 茶多糖的结构研究
1.3.1 多糖的结构研究方法
1.3.2 茶多糖的结构研究进展
1.4 茶多糖的生物活性
1.4.1 降血糖作用
1.4.2 清除自由基作用
1.4.3 降血脂作用
1.4.4 抗凝血及抗血栓作用
1.4.5 增强机体免疫功能
1.4.6 对心血管系统的若干药理作用
1.5 茶多糖结构与生物活性的关系
1.5.1 多糖结构与生物活性的关系
1.5.2 多糖的结构与降血糖活性的关系
1.5.3 多糖结构与清除自由基活性的关系
1.5.4 多糖的化学修饰与生物活性
1.6 立题依据和意义
1.7 主要研究内容
参考文献
第二章 不同溶剂提取茶多糖和降血糖活性表征
2.1 前言
2.2 材料和方法
2.2.1 材料、试剂及仪器
2.2.2 不同溶剂提取粗茶多糖工艺
2.2.3 酶提茶多糖工艺
2.2.4 茶多糖单糖组成分析
2.2.5 茶多糖糖醛酸的鉴定及质量分数测定
2.2.6 茶多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠降血糖作用实验方法
2.2.7 血糖测定和统计学分析
2.2.8 指标的测定
2.3 结果与讨论
2.3.1 茶叶原料的基本成分分析
2.3.2 不同溶剂提取的茶多糖级分的得率及其基本成分、单糖组成
2.3.3 不同溶剂提取的茶多糖的降血糖作用
2.3.4 正交法确定酶法水提的工艺条件
2.3.5 酶提茶多糖与水提茶多糖的成分比较
2.3.6 酶提茶多糖与水提茶多糖降血糖活性比较
2.4 本章小结
参考文献
第三章 茶多糖的分离研究
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 实验材料、试剂和仪器
3.2.2 脱色实验
3.2.3 D315树脂分离茶多糖工艺流程
3.2.4 D315树脂静态吸附实验
3.2.5 D315树脂动态吸附和洗脱实验
3.2.6 D315树脂再生
3.2.7 检测分析方法及相关指标的计算
3.2.8 NTPS、ATPS的DEAE52分离
3.2.9 茶多糖单糖组成分析
3.2.10 茶多糖光谱分析
3.2.11 茶多糖分子量测定
3.3 结果与讨论
3.3.1 茶多糖脱色条件的研究
3.3.2 D315树脂分离茶多糖工艺条件的优化
3.3.3 D315树脂分离得到的茶多糖的基本理化性质
3.4 本章小结
参考文献
第四章 茶多糖的纯化和基本理化性质的研究
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 材料、试剂和仪器
4.2.2 柱层析分离纯化流程
4.2.3 茶多糖单糖组成分析
4.2.4 茶多糖分子量测定及纯度鉴定
4.2.5 琼脂糖凝胶电泳法鉴定酸性茶多糖纯度
4.2.6 糖醛酸含量测定
4.2.7 中性糖NTPS1的多糖含量的测定
4.2.8 酸性糖ATPS2、ATPS3、ATPS4的多糖含量的测定
4.2.9 茶多糖的光谱分析
4.2.10 其它分析方法
4.3.结果与讨论
4.3.1 NTPS、ATPS经DEAE Sepharose FF分离
4.3.2 NTPS1、ATPS2、ATPS3、ATPS4的糖质量分数、糖醛酸质量分数
4.3.3 NTPS1、ATPS2、ATPS3、ATPS4经SephadexG-150分离
4.3.4 NTPS1、ATPS2、ATPS3、ATPS4的分子量
4.3.5 NTPS1、ATPS2、ATPS3、ATPS4的单糖组成
4.3.6 NTPS1、ATPS2、ATPS3、ATPS4的光谱分析
4.3.7 ATPS2、ATPS4的琼脂糖凝胶电泳
4.4 本章小结
参考文献
第五章 茶多糖的结构研究
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.2.1 材料、试剂和仪器
5.2.2 高碘酸钠氧化—Smith降解
5.2.3 NMR光谱测定
5.2.4 原子力显微镜对茶多糖形貌的观察
5.3 结果与讨论
5.3.1 NTPS1的结构研究
5.3.2 ATPS2的结构研究
5.3.3 ATPS4的结构研究
5.4 本章小结
参考文献
第六章 茶多糖的化学修饰
6.1 前言
6.2 材料与方法
6.2.1 试剂、材料和仪器
6.2.2 硫酸酯化茶多糖的制备
6.2.3 茶多糖铁的制备
6.2.4 茶多糖钙的制备
6.2.5 茶多糖的红外光谱分析
6.2.6 硫酸酯基含量的测定
6.2.7 茶多糖络合物的铁、钙质量分数的测定
6.2.8 原子力显微镜对茶多糖形貌的观察
6.2.9 茶多糖DSC热分析
6.3 结果与讨论
6.3.1 硫酸酯化茶多糖的制备和表征
6.3.2 茶多糖钙、茶多糖铁络合物的制备和表征
6.4 本章小结
参考文献
第七章 茶多糖的结构与生物活性关系研究
7.1 前言
7.2 材料与方法
7.2.1 材料、试剂与仪器
7.2.2 茶多糖及其化学修饰产物对四氧嘧啶糖尿病小鼠降血糖作用实验方法
7.2.3 自由基的测定
7.3 结果与讨论
7.3.1 茶多糖及其化学修饰产物的结构与降血糖活性的关系
7.3.2 茶多糖及其化学修饰产物的结构与清除自由基活性的关系
7.4 本章小结
参考文献
本论文主要结论
创新点
致谢
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附图
发布时间: 2006-07-20
参考文献
- [1].不同方法提制的绿茶多糖理化特性及生物学活性研究[D]. 陈小强.浙江工商大学2015
- [2].具有降血糖活性的茶多糖组分分离纯化与结构鉴定[D]. 王黎明.江南大学2006