菊三七化学成分及抗肿瘤活性研究

论文摘要

菊三七来源于菊科菊三七属植物Gynura segetum （Lour.） Merr.的根茎和根,始载于《滇南本草》,具有止痛消肿、活血化瘀、止血消炎、抗癌防癌、抗疟疗痹、清热解毒等功效,为我国传统的民间习用品。该属植物具有多种生物活性,根据文献报道,菊三七属提取物具有明显的抗肿瘤活性,对于皮肤癌等多种肿瘤细胞具有良好的抑制作用,但其抗肿瘤的物质基础及作用机制并不十分明确,有待进一步深入研究。菊三七适当粉碎,以70%乙醇渗漏提取,提取物回收乙醇,残留物采用系统溶剂法依次萃取,得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水溶液提取物。以SMMC-7721（人肝癌细胞）和ECA-109（人食道癌细胞）为受试对象,采用MTT法,对上述五个部位进行了抗肿瘤活性筛选,结果显示二氯甲烷部位、正丁醇部位为主要活性部位,SMMC-7721细胞为敏感细胞株。采用硅胶柱色谱、凝胶渗透色谱和MCI-GEL CHP20P柱色谱等方法对活性部位进行系统的分离纯化,从中共分离得到6个单体化合物。通过NMR波谱技术分别鉴定为槲皮素（Quercetin）、β-谷甾醇（β-sitosterol）、菊三七碱乙（E-seneciphylline）.千里光宁（senecionine）、千里光菲灵（Seneciphylline）、β-胡萝卜苷（β-daucosterol）。以SMMC-7721细胞为受试对象,采用MTT法对上述单体化合物进行了抗肿瘤活性筛选,从中筛选出2个具有抗肿瘤活性的化合物菊三七碱乙和千里光宁,其IC50值分别为：116.64μg·mL-1、95.95μg·mL-1,千里光宁对SMMC-7721细胞的杀伤作用与阳性对照药物卡铂相当。菊三七碱乙和千里光宁抗肿瘤活性为首次报道。采用AO染色的方法进行形态学观察,结果表明千里光宁对SMMC-7721肿瘤细胞具有良好的抑制作用,并呈现剂量依赖性。研究结果为阐明菊三七抗肿瘤作用的物质基础提供了科学依据,也为菊三七的深入研究奠定了基础。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语释义
• 前言
• 第一章 菊三七的研究概况
• 1 生药学研究
• 2 化学成分研究
• 3 药理作用研究
• 4 临床应用
• 5 毒理研究
• 6 小结
• 第二章 菊三七抗肿瘤活性部位筛选研究
• 1 试药与仪器
• 2 实验方法
• 3 结果与讨论
• 4 小结
• 第三章 菊三七抗肿瘤活性部位化学成分研究
• 1 仪器与试药
• 2 提取与分离
• 3 化合物结构鉴定
• 4 小结
• 第四章 菊三七抗肿瘤活性成分的筛选研究
• 1 实验试剂及仪器
• 2 细胞培养
• 3 MTT实验方法
• 4 MTT实验结果
• 5 荧光染色细胞形态学观察
• 6 小结
• 第五章 结语与创新
• 参考文献
• 已发表和待发表文章
• 致谢
• 附图