氨基甲酸乙酯在葡萄酒中的含量的变化及研究

论文摘要

本研究对氨基甲酸乙酯（EC）的HPLC-FLD和GC/MS测定方法进行了优化。应用优化后的方法对葡萄酒酿造过程中的EC含量的变化进行了测定,并且考察了不同品种和产地的赤霞珠（Cabernet Sauvignon,CS）.蛇龙珠（Cabernet Gernischt,CG）和梅鹿辄（Merlot）中EC的含量,主要获得了以下结果：1、HPLC-FLD方法的最优测定条件利用高效液相色谱结合荧光检测器,确定的测定条件为：将白兰地样品稀释至酒精含量为25%（v/v）,葡萄酒不经稀释；取200μL样品加入50μL HCl溶液及100μL的二苯吡喃醇溶液,暗反应5min后,取20μL进样；色谱条件为色谱柱（ODS-2HYPERSIL C18 4.6mm×250mm,5μm）,流动相A：醋酸钠溶液（20mM,pH=7.2）,流动相B：乙腈,流速为0.8mL/min;流动相梯度初始条件为流动相A：55%,流动相B：45%,10min时流动相A：50%,至35min时流动相A：0%,然后维持5min;检测器激发光波长为234nm,发射光波长为600nm。2、GC/MS方法的最优测定条件本实验确定的气质联用测定条件如下.,色谱条件：色谱柱为TR-WaxMs30m×0.25mm（内径）×0.25μm（膜厚）；手动进样1μL；不分流进样；程序升温起始温度80℃,再以5℃/min的速度升至180℃,后又以20℃/min升温至250℃,并在该温度下停留2min；进样口温度为250℃；载气为高纯氦气；恒流速为1mL/min。质谱条件为：EI电离方式（能量为70eV）；离子检测模式（SIM Mode）中选取m/z为44、62和74的离子碎片进行扫描,离子源及色谱和质谱连接处温度分别为200℃和220℃。3、葡萄酒酿造和储存过程中EC的变化在葡萄酒酿造过程中,EC的含量略微上升,但不同产地间的含量差异很大；不同产地的葡萄酒中沙城葡萄酒EC含量较其它产区低；不同品种的干红葡萄酒EC的含量依次为梅鹿辄>赤霞珠>蛇龙珠；我国大部分产区的葡萄所酿造的葡萄酒中EC的含量都在限量范围内；不同年份的白兰地随着储存时间的增加,其EC含量也在增加,但没有超过国际上对于白兰地中EC含量的限量标准；白兰地的粗馏期间EC含量维持在一个较高的水平,其变化存在一个维持不变到增大再逐渐变小的过程；精馏期间EC含量维持在一个较低的水平,其含量逐渐增大后又减小的过程。添加酸性脲酶对比实验的结果显示：在葡萄酒酿造过程中添加酸性脲酶其EC含量在增长一段时间后,维持在一个相对稳定的低水平上,可见添加一定量的酸性脲酶对于降低葡萄酒中的EC有一定作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 葡萄酒的保健功能
• 1.2 葡萄酒对某些疾病的辅助治疗作用
• 1.3 氨基甲酸乙酯概述
• 1.4 EC的危害
• 1.5 EC的限量标准及普遍含量
• 1.6 EC的形成机理
• 1.7 降低EC含量的方法
• 1.7.1 降低葡萄酒中EC含量的方法
• 1.7.2 降低黄酒中EC含量的方法
• 1.8 EC的检测方法
• 1.9 GC/MS的工作原理
• 1.10 本论文的研究背景与研究内容
• 1.10.1 研究背景
• 1.10.2 研究内容
• 2 材料和方法
• 2.1 材料和仪器
• 2.1.1 试剂与仪器
• 2.1.2 材料
• 2.2 分析方法
• 2.2.1 还原糖、总糖:斐林试剂法
• 2.2.2 快速氧化法测酒精度
• 2.2.3 尿素的测定方法
• 2.2.4 实验方法
• 3 结果与讨论
• 3.1 高效液相色谱条件的确定
• 3.1.1 最大发射波长和最大激发波长
• 3.1.2 流速对测定EC的影响
• 3.1.3 高效液相色谱中流动相梯度的确定
• 3.1.4 氨基甲酸乙酯的定性
• 3.1.5 二苯吡喃醇和氨基甲酸乙酯的暗反应时间的确定
• 3.1.6 二苯吡喃醇和氨基甲酸乙酯反应温度的确定
• 3.1.7 酒样稀释度的确定
• 3.1.8 小结
• 3.2 测定方法的评估
• 3.2.1 添加回收试验
• 3.2.2 方法的可靠性
• 3.2.3 小结
• 3.3 HPLC-FLD在不同年份白兰地测定中的应用
• 3.3.1 用HPLC方法对白兰地样品测定结果线性关系的确定
• 3.3.2 小结
• 3.4 气质联用方法的优化
• 3.4.1 EC定性定量分析方法探索和优化
• 3.4.2 葡萄酒、白兰地样品前处理方法的探索和优化
• 3.4.3 小结
• 3.5 GC/MS方法可行性和可靠性研究
• 3.5.1 方法的线性范围和检测限研究
• 3.5.2 方法的精密度研究
• 3.5.3 小结
• 3.6 葡萄酒发酵过程中EC含量的变化
• 3.6.1 赤霞珠发酵过程中EC含量的变化
• 3.6.2 梅鹿辄发酵过程中EC含量的变化
• 3.6.3 蛇龙珠发酵过程中EC含量的变化
• 3.6.4 小结
• 3.7 不同产地和不同年份赤霞珠、梅鹿辄和蛇龙珠干红葡萄酒中氨基甲酸乙酯含量
• 3.7.1 不同产地赤霞珠干红葡萄酒中的氨基甲酸乙酯含量
• 3.7.2 不同产地梅鹿辄、蛇龙珠干红葡萄酒中的氨基甲酸乙酯含量
• 3.7.3 不同年份的干红葡萄酒中EC含量的研究
• 3.7.4 小结
• 3.8 白兰地中EC的含量的研究
• 3.8.1 不同年份的白兰地中EC含量的研究
• 3.8.2 白兰地粗馏、精馏过程蒸馏液中EC的研究
• 3.8.3 小结
• 3.9 发酵过程中添加酸性脲酶对葡萄酒中EC含量的消除效果
• 4 结论
• 5 展望
• 6 参考文献
• 7 攻读硕士学位期间发表的论文
• 8 致谢