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可视化动缘探测系统同步检测人重组促红细胞生成素对缺血/再灌注心肌细胞收缩功能和钙瞬变的影响

2020-12-03阅读(739)

可视化动缘探测系统同步检测人重组促红细胞生成素对缺血/再灌注心肌细胞收缩功能和钙瞬变的影响

论文摘要

目的探讨人重组促红细胞生成素（rHuEPO）预处理及后处理对大鼠缺血/再灌注（I/R）心肌细胞的保护作用。方法1、预处理实验:Wistar成年雄性大鼠60只分为3组,分别为对照组,缺氧复氧损伤组（I/R组）、缺氧复氧损伤+ rHuEPO预处理组（I/R + rHuEPO组）,每组20只。rHuEPO预处理组大鼠经腹腔注射5000 u/kg的rHuEPO,对照组和I/R组则注射同体积的生理盐水。给药24h后,利用Langendoff离体心灌注模型平衡30 min,给予停搏液使心脏停跳90 min,再灌注60 min。常规酶解法获得成年大鼠心室肌细胞,用可视化动缘探测系统同步检测rHuEPO预处理组大鼠心肌细胞收缩力和钙瞬变的变化,并与I/R组大鼠心肌细胞进行比较。2、后处理实验:Wistar成年雄性大鼠60只分为3组,分别为对照组,缺氧复氧损伤组（I/R组）、缺氧复氧损伤+rHuEPO后处理组（I/R+rHuEPO组）,每组20只。常规酶解法获得成年大鼠心室肌细胞,用氰化钠/乳酸钠灌注造成细胞化学缺氧以模拟缺血。缺血15 min后以台氏液或台氏液加rHuEPO复氧模拟再灌注30 min,常规酶解法获得成年大鼠心室肌细胞,用可视化动缘探测系统同步检测rHuEPO后处理组大鼠心肌细胞收缩力和钙瞬变的变化,并与I/R组大鼠心肌细胞进行比较。结果1、发现rHuEPO预处理使再灌注后心室肌细胞肌小节最大收缩幅度、最大缩短速率、最大复长速率以及Ca2+荧光比率明显增大,使Ca2+达峰值时程、舒张期Ca2+减少50%时程明显减少（P <0.05, n =20）。2、发现rHuEPO后处理使再灌注后心室肌细胞肌小节最大收缩幅度、最大缩短速率、最大复长速率以及fura-2荧光强度变化明显增大,使Ca2+达峰值时程、舒张期Ca2+减少50%时程明显减少（P <0.05, n =20）。结论1.首次通过可视化动缘探测系统,对经rHuEPO预处理的离体I/R大鼠心肌细胞和未经rHuEPO预处理的离体I/R大鼠心肌细胞收缩力进行比较,发现经rHuEPO预处理的离体I/R大鼠心肌细胞比未经rHuEPO预处理的I/R大鼠心肌细胞收缩速度和舒张速度明显加快,收缩幅度增加。结果表明,rHuEPO预处理能使离体I/R大鼠心肌细胞收缩力增强,提示rHuEPO对离体I/R大鼠心肌细胞具有明显保护作用。2.首次通过可视化动缘探测系统,对经rHuEPO后处理的离体I/R大鼠心肌细胞和未经rHuEPO后处理的离体I/R大鼠心肌细胞收缩力进行比较,发现经rHuEPO后处理的离体I/R大鼠心肌细胞比未经rHuEPO后处理的I/R大鼠心肌细胞收缩速度和舒张速度明显加快,收缩幅度增加。结果表明,rHuEPO后处理能使离体I/R大鼠心肌细胞收缩力增强,提示rHuEPO对离体I/R大鼠心肌细胞具有明显保护作用。3.为了探讨心肌收缩力与心肌细胞内Ca2+的关系,在检测经rHuEPO预处理和后处理的离体I/R大鼠心肌细胞收缩力的同时,同步检测了离体I/R大鼠心肌细胞内钙的变化。要检测指标中fura-2荧光强度变化明显提高,舒张期Ca2+水平没有显著差异,Ca2+达峰值时程、舒张期Ca2+减少50%时程减少。结果表明,rHuEPO增强心肌细胞收缩的同时,心肌细胞钙瞬变也明显增强,提示rHuEPO处理可促进离体I/R大鼠心肌细胞钙瞬变的恢复而达到心肌保护的效果,更直接客观地反映了两者的相关性。

论文目录

  • 缩略语表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 文献回顾
  • 正文
  • 实验一可视化动缘探测系统同步检测人重组促红细胞生成素预处理对缺血/再灌注心肌细胞舒、缩功能和钙瞬变的影响
  • 1 材料
  • 1.1 动物来源
  • 1.2 主要试剂及配置
  • 1.3 主要仪器设备
  • 2 方法
  • 2.1 实验动物分组
  • 2.2 心肌细胞分离
  • 2.3 心肌细胞收缩检测
  • 2.4 心肌细胞钙瞬变检测
  • 2.5 统计学处理
  • 3 结果
  • 3.1 人重组促红细胞生成素预处理对离体缺血/再灌注大鼠心肌细胞收缩的影响
  • 3.2 人重组促红细胞生成素预处理对离体缺血/再灌注大鼠心肌细胞钙瞬变的影响
  • 4 讨论
  • 实验二 可视化动缘探测系统同步检测人重组促红细胞生成素后处理对缺血/再灌注心肌细胞舒、缩功能和钙瞬变的影响
  • 1 材料
  • 1.1 动物来源
  • 1.2 主要试剂及配置
  • 1.3 主要仪器设备
  • 2 方法
  • 2.1 实验动物分组
  • 2.2 心肌细胞分离
  • 2.3 实验方案
  • 2.4 心肌细胞收缩检测
  • 2.5 心肌细胞钙瞬变检测
  • 2.6 统计学处理
  • 3 结果
  • 3.1 大鼠心肌细胞模拟缺血/再灌注模型
  • 3.2 人重组促红细胞生成素后处理对模拟缺血/再灌注大鼠心肌细胞收缩的影响
  • 3.3 人重组促红细胞生成素后处理对模拟缺血/再灌注大鼠心肌细胞钙瞬变的影响
  • 4 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 个人简历和研究成果
  • 致谢

    • 相关论文文献

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