RT-PCR检测胸/腹水脱落细胞GA733 mRNA及其临床意义

RT-PCR检测胸/腹水脱落细胞GA733 mRNA及其临床意义

论文摘要

目的胸/腹水是常见临床病症,近年来随着肿瘤发病率的上升,恶性胸/腹水的比率也不断升高。正确判断胸/腹水的良恶性质,对于患者的诊断、治疗和预后判断都具有重要的临床价值。目前恶性胸/腹水的诊断主要依靠脱落细胞学检查,但其阳性率低,在转移癌细胞与反应性增生的间皮细胞之间的鉴别也常有困难,寻找理想的鉴别诊断新方法一直是人们关心的研究课题。GA733 是编码癌相关性抗原的基因家族,它广泛表达于上皮细胞及上皮性肿瘤。人类80%肿瘤为上皮源性,90%以上的恶性胸/腹水系上皮性恶性肿瘤胸/腹膜转移所致。因良性胸/腹水中不存在上皮细胞,所以检测胸/腹水的上皮性标志物成为人们寻找恶性胸/腹水诊断方法的基本出发点。为此,本研究采用RT-PCR 方法检测胸/腹水中上皮性标志物GA733 mRNA 的表达状况,探讨它们对恶性胸/腹水的诊断价值,以期建立有价值的诊断新方法。方法收集60 例新鲜的胸/腹水标本,常规离心后收集脱落细胞,制备细胞涂片,巴氏染色进行常规细胞学诊断,并查阅病案详细收集资料,确定标本的临床诊断。根据临床诊断将标本分为恶性肿瘤组、良性疾病组和病因不明组,按细胞学检查结果分为良性组、恶性组及可疑恶性组。以部分脱落细胞沉淀为材料,采用RT-PCR 技术检测GA733-1 及GA733-2 mRNA,具体过程包括提取总RNA,逆转录为cDNA,并以此为模板分别进行PCR 扩增,8%聚丙烯凝胶电泳,银染显示结果。计算不同组别GA733-1 及GA733-2 mRNA的阳性检出率,以及它们对诊断恶性胸/腹水的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及诊断符合率。结果60 例胸/腹水标本,36 例临床确诊为恶性肿瘤,13 例临床确诊为良性疾病,11 例病因不明。细胞学检查诊断为恶性积液者26 例,良性积液28 例,可疑恶性积液6 例。在36 例恶性肿瘤患者的胸/腹水标本中,GA733-2 mRNA 阳性检出率为

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