粘细菌So ce9882子实体毒理学研究及生物学功能的初步评价

论文摘要

纤维堆囊菌是粘细菌中唯一能降解纤维素的属,粘细菌是革蓝氏阴性、单细胞、滑动细菌,它主要存在于土壤、粪便、腐烂的植物材料以及活的或死的树干上。作为一种土壤中广泛存在的细菌,它可以在营养贫瘠的条件下形成子实体,大量细胞共同协作生活,这一特点在原核生物中独一无二。而且,粘细菌子实体在形态和结构方面有不同程度的复杂性,这一特点与药用真菌的子实体有相似之处。 到目前为止,关于纤维堆囊菌的研究工作主要集中在它能产生丰富的次级代谢产物这一方面,而对其子实体的应用开发国内外未见文献报道。本文的主要目的就是探索粘细菌中纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)子实体作为药用菌材料的可行性和药用前景。下面是论文工作的简要介绍: 首先,对纤维堆囊菌So ce9882子实体提取物进行毒理学分析,包括经口急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验。通过实验可以得出结论:在本次实验条件下,受试物为实际无毒物质,未显示有遗传毒性作用,可以初步认为纤维堆囊菌So ce9882子实体提取物是安全可靠的。 其次,本文对纤维堆囊菌so ce9882子实体提取物的药理学活性进行了初步探索。主要做了一个方面的尝试,即按照活性多糖的研究方法对粘细菌子实体热水粗提物进一步的分离,同时对乙醇回流萃取的脂类物质按照极性的不同进行了初步分离。对分离到的部分组分进行细胞毒型抗癌药物和癌化学预防药物的筛选,结果表明:组分6、7具有选择性杀伤肿瘤细胞的活性,组分3、6具有肯定的抗突变效应而组分7抗突变作用显著。 最后,运用红外技术对筛选出来的组分进行测定,建立红外光谱指纹图谱,为探索纤维堆囊菌子实体提取物的生物活性作用机理提供依据。 练上所述,本论文工作为粘细菌子实体进一步的药物研发打下了较为坚实的基础。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 多糖的分离、纯化
• 1.1.1 多糖的分离
• 1.1.2 多糖的纯化
• 1.2 多糖的生物活性
• 1.2.1 调节免疫功能，具有抗肿瘤、抗病毒、抗衰老作用
• 1.2.2 降血糖作用
• 1.2.3 降血脂作用
• 1.2.4 抗凝血作用
• 1.2.5 抗溃疡作用
• 1.2.6 抗突变
• 1.2.7 抗辐射
• 1.2.8 其它
• 1.3 多糖的结构
• 1.4 多糖生物活性的构效关系
• 1.5 选择粘细菌子实体作为试验材料的依据
• 1.5.1 粘细菌子实体的构成及特性
• 1.5.1 粘细菌多糖的生物活性
• 1.5.3 粘细菌的分类鉴定及特征
• 1.6 本课题研究的基础及思路
• 第二章 纤维堆囊菌子实体提取物的毒理学分析
• 2.1 子实体提取物制备
• 2.2 急性毒性试验（GB）
• 2.2.1 材料与方法
• 2.2.2 结果及讨论
• 2.3 AMES试验（GB）
• 2.3.1 设备
• 2.3.2 试剂
• 2.3.3 菌株及其鉴定
• 2.3.4 剂量设计
• 2.3.5 试验方法
• 2.3.6 结果的判定
• 2.3.7 结果与讨论
• 2.4 小鼠骨髓细胞微核试验（GB）
• 2.4.1 实验动物
• 2.4.2 仪器与试剂
• 2.4.3 试验方法
• 2.4.4 结果判定
• 2.4.5 结果与讨论
• 2.5 小鼠精子畸形试验（GB）
• 2.5.1 仪器与试剂
• 2.5.2 实验动物
• 2.5.3 试验方法
• 2.5.4 结果判定
• 2.5.5 结果与讨论
• 2.6 本章小结
• 第三章 纤维堆囊菌子实体提取物的生物学功能评价
• 3.1 粗提物中重要组分的分离
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验流程图
• 3.1.3 Sevag法除蛋白
• 3.2 四唑盐（MTT）比色试验
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 实验方法：
• 3.2.3 结果与讨论
• 3.3 抗AMES试验
• 3.3.1 实验材料：
• 3.3.2 实验方法：
• 3.3.3 结果判定：
• 3.3.4 结果与讨论：
• 3.4 本章小结
• 第四章 纤维堆囊菌子实体提取物各组分的红外光谱分析
• 4.1 仪器和材料
• 4.1.1 仪器
• 4.1.2 受试物
• 4.2 方法
• 4.3 结果与讨论
• 第五章 总结
• 5.1 课题全文总结
• 5.2 本课题研究内容在应用上的前景分析
• 5.3 本课题进一步研究尚需解决的问题
• 参考文献
• 攻读学位期间已发表的学术论文
• 附件