论文摘要
体温敏感凝胶（in situ thermosensitive gel）是指以溶液状态给药后立即在用药部位发生相转变,形成非化学交联的半固体制剂。该传递系统完美的融合了溶液与凝胶制剂的优点,特别适合用作眼部给药的载体。本文选择他克莫司（Tacrolimus,FK506）作为模型药物,对其眼用体温敏感凝胶的制备进行了研究。建立了高效液相色谱法测定他克莫司体温敏感眼用凝胶的释放度和含量的方法。色谱条件为:Agilent Zorbax SB-C8色谱柱（150mm×4.6mm,5μm）;流动相:乙腈-水（55:45,v/v）;流速1.0ml·min-1;检测波长215nm;柱温50℃。回收率均在99%～101%之间。该方法准确、灵敏、辅料不干扰测定,适用于本制剂的体外质量控制。对他克莫司原料药进行了处方前研究。测定了他克莫司的溶解度和油/水分配系数,结果表明他克莫司在水中、pH7.4磷酸盐缓冲液和模拟人工泪液中的溶解度分别为2.04μg·ml-1,3.16μg·ml-1和4.84μg·ml-1。在水、pH7.4磷酸盐缓冲液和模拟人工泪液中的log Papp为1.33,1.18和1.17。对他克莫司羟丙基-β-环糊精包合物的制备进行了研究,优化了制备工艺,采用差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行了鉴定,并对包合物的稳定性进行了研究。制备方法为微波法。优化处方为:他克莫司与羟丙基-β-环糊精的质量比为1:15,羟丙基-β-环糊精的质量浓度30%,微波强度50W,微波时间10min。制得的三批产品平均包合率为91.47%。影响因素试验结果表明,他克莫司包合物与原料药相比稳定性有所提高。以胶凝能力为指标对他克莫司体温敏感眼用凝胶处方进行筛选,得出泊洛沙姆407溶液的可逆胶凝行为呈现强烈的浓度依赖性,泊洛沙姆188可调节相变温度。当浓度低于15%时不发生胶凝行为;当浓度高于15%时,可逆胶凝行为表现为明显的粘度急剧增加,全部过程在温差3～5℃内完成。合并泊洛沙姆188未改变胶凝机制。建立了相变温度与泊洛沙姆浓度的拟合方程,即Tsol-gel=-3.006 C407+1.694C188-0.082 C1882+86.367。体温敏感眼用凝胶经泪液稀释后,相变温度升高约为3～8℃。优化处方26.1℃时为自由流动的液体,泪液稀释后在33.8℃能够发生胶凝行为。根据眼部用药的体内特征,采用无膜溶出模型,同时考察了凝胶溶蚀和药物释放的行为。体温敏感眼用凝胶中药物的释放主要受凝胶溶蚀控制,释放面积和振荡频率的增加能够加快凝胶溶蚀和药物释放速率。制剂稳定性研究结果表明,该制剂对热和光较敏感,在低温放置条件下稳定,提示应冷藏避光贮存。长期试验结果表明,他克莫司体温敏感眼用凝胶在温度6℃±2℃的条件下稳定性良好。对他克莫司体温敏感眼用凝胶进行了刺激性考察。结果表明眼用凝胶单次、多次给药后对家兔眼均无刺激性。建立家兔同种异体穿透性角膜移植动物模型,将环孢素滴眼剂、他克莫司蓖麻油滴眼剂和他克莫司体温敏感眼用凝胶应用于家兔角膜移植模型中。从总的抑制角膜移植排斥反应的效应来看,环孢素滴眼剂组、他克莫司蓖麻油滴眼剂组及眼用凝胶组均能有效减轻植片混浊、植片水肿,各用药组均能显著延缓角膜植片排斥反应发生的时间。