论文摘要
随着人民生活水平提高,甲型肝炎的发病率逐年下降,群体免疫力却随之减弱,极易造成大规模的爆发流行。国家因此通过人工主动免疫的方式提升甲型肝炎群体免疫力。但甲型肝炎疫苗的普种却引发了一些负面问题。现行的甲型肝炎诊断试剂,如被用于检测甲型肝炎病毒感染的Abbott HAV Ab诊断试剂盒只能检测病毒结构蛋白诱发的抗体,自然感染和疫苗接种时都可以诱发机体产生此类抗体,因此试剂盒无法区分上述两种情况。甲型肝炎病毒自然感染能诱发机体产生针对病毒结构蛋白和非结构蛋白的抗体,而灭活疫苗接种诱生的抗体只针对病毒结构蛋白,减毒活疫苗接种诱发的抗非结构蛋白的抗体水平低下。因此可以建立一种特异检测甲肝病毒非结构蛋白抗体的ELISA方法来表征病毒复制的发生。已有文献证实,在实验感染野生型病毒株的灵长类血清和自然感染的人血清中能够检测到anti-3Cpro抗体的存在（3Cpro为一种病毒非结构蛋白）,同时文献还指出迄今为止,3Cpro是甲肝病毒中唯一的能够通过原核表达系统产生功能蛋白的病毒非结构蛋白。重组3Cpro蛋白通过原核表达系统以包涵体的形式大量表达,可以通过标准的生物化学方法进行纯化,得到均质的蛋白。将3Cpro蛋白的基因插入到T7启动子控制外源蛋白表达的、含有硫氧还蛋白编码序列的表达质粒M48中,构建融合蛋白的基因工程表达质粒。目的蛋白在Escherichia coli工程菌中进行表达,以包涵体的形式存在,可占菌体总蛋白量的40%以上。融合蛋白通过亲和层析和阴离子交换后可达到高度均质。可利用SDS-PAGE来鉴定纯化结果。在这项研究中,我们检测了建立的ELISA方法是否能够鉴定出实验室水平和临床水平鉴定的急性期病人血清中的anti-3C IgM抗体,并与接种减毒活疫苗半年内的儿童血清结果进行对比。结果显示,利用HAV 3Cpro作为诊断抗原建立的ELISA方法能够有效地检测出针对非结构蛋白的抗体,可以将自然感染和疫苗接种的情况区分开来。另外,这种ELISA的方法可以用来检测体内病毒没有达到检测水平、症状没有出现时病毒的有限复制。这个检测方法也利于我们更好地了解非结构蛋白抗体在机体对HAV感染的免疫应答中所起的作用。
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相关论文文献
- [1].2008年崂山区40岁以上人群甲型肝炎病毒抗体的检测[J]. 中国医疗前沿 2010(12)
- [2].甲型肝炎病毒免疫控制研究进展[J]. 动物医学进展 2019(04)
- [3].甲型肝炎病毒单克隆抗体细胞株的建立及鉴定[J]. 海南医学 2011(21)
- [4].医学生物学研究所健康人群甲型肝炎病毒抗体水平调查及分析[J]. 医学动物防制 2018(01)
- [5].HIV患者合并甲型肝炎病毒抗体阳性概率研究[J]. 肝脏 2017(12)
- [6].微粒子酶联免疫分析法与电化学发光免疫分析法测定甲型肝炎病毒抗体一致性评价[J]. 标记免疫分析与临床 2010(01)
- [7].食品中甲型肝炎病毒RNA提取方法的比较及应用[J]. 食品科学 2019(06)
- [8].甲型肝炎病毒的提取及免疫学性质分析[J]. 微生物学免疫学进展 2019(04)
- [9].果蔬产品中甲型肝炎病毒风险评估和基因分型研究[J]. 病毒学报 2016(04)
- [10].电化学发光免疫分析和酶联免疫吸附试验检测甲型肝炎病毒IgM抗体的比较[J]. 现代医院 2016(03)
- [11].甲型肝炎病毒的微生物学检验分析[J]. 中国继续医学教育 2016(14)
- [12].生产场地变更后甲型肝炎灭活疫苗(人二倍体细胞)的抗原特性[J]. 中国生物制品学杂志 2016(04)
- [13].硫酸软骨素B佐剂对甲型肝炎病毒疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响[J]. 中国生物制品学杂志 2015(04)
- [14].美国免疫实施咨询委员会关于甲型肝炎病毒暴露后和国际旅行者预防甲型肝炎的最新建议[J]. 中国疫苗和免疫 2008(02)
- [15].甲/戊型肝炎病毒重组抗原基因的克隆及表达[J]. 云南大学学报(自然科学版) 2008(02)
- [16].甲型肝炎病毒与水痘病毒感染2BS细胞的超微结构变化[J]. 中国生物制品学杂志 2012(12)
- [17].壳寡糖佐剂对甲型肝炎病毒疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响[J]. 中国生物制品学杂志 2015(05)
- [18].甲型病毒性肝炎患者自身抗体的分析[J]. 检验医学 2009(03)
- [19].甲肝病毒及其疫苗研究现状[J]. 中国生物制品学杂志 2018(03)
- [20].甲型肝炎动物模型研究进展[J]. 中国人兽共患病学报 2018(05)
- [21].甲型肝炎病毒单克隆抗体的筛选与初步应用[J]. 中国生物制品学杂志 2011(09)
- [22].一起井水污染致学校甲肝暴发的现场流行病学调查[J]. 中国药物经济学 2013(05)
- [23].轮状病毒星状病毒和甲型肝炎病毒的单管多重荧光定量RT-PCR检测方法研究[J]. 浙江预防医学 2015(04)
- [24].武威市农村居民HAV及HBV感染状况分析[J]. 中国公共卫生 2009(05)
- [25].Walvax-2细胞基质培养甲型肝炎病毒YN5株的遗传稳定性分析[J]. 中国生物制品学杂志 2019(05)
- [26].化学发光微粒子免疫检测法和实时荧光RT-PCR法检测甲型肝炎病毒的比较分析[J]. 辽宁大学学报(自然科学版) 2018(01)
- [27].常州市天宁区公共卫生从业人员HAV和HEV的感染状况及防治策略[J]. 中国卫生检验杂志 2015(11)
- [28].北京男男性接触HIV感染者合并病毒性肝炎分析[J]. 中国公共卫生 2011(05)
- [29].乙型肝炎病毒与3种肝炎重叠感染的研究[J]. 检验医学与临床 2011(11)
- [30].从业人员健康体检中1例HAV-IgM阳性的检出报告[J]. 现代预防医学 2010(22)
标签：自然感染论文; 减毒活疫苗接种论文; 原核表达系统论文; 非结构蛋白论文; 融合蛋白论文; 复性论文; 急性期血清论文;