饱和脂肪酸导致骨骼肌胰岛素抵抗及收缩促进GLUT4转位的机制研究

论文摘要

目的：探讨饱和脂肪酸对骨骼肌细胞胰岛素作用的影响及收缩促进GLUT4转位的机制。方法：第一部分用棕榈酸孵育L6-GLUT4myc和C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immnosorbent assay, ELISA）测定棕榈酸对骨骼肌细胞GLUT4myc转位的影响。应用免疫印迹法（Western blot）检测棕榈酸对Akt磷酸化的影响。第二部分在上述工作基础上,Western blot检测棕榈酸对c-JunN-末端激酶（JNK）、IRS1的磷酸化的影响和BIM（cPKC和nPKC的抑制剂）对棕榈酸孵育后Akt的磷酸化影响并同时用ELISA法检测对GLUT4myc转位的影响。第三部分在上述基础上电刺激（Electric Pulse Stimulation,EPS） C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞,测定电刺激对GLUT4myc转位的影响、并检测Compound C （AMPK的抑制剂,CC）、STO-609（CaMKK的抑制剂）、KN93（CaMKⅡ的抑制剂）、CN21（CaMK Ⅱ的抑制肽）对电刺激调节GLUT4myc转位的影响。结果：第一部分结果显示：饱和脂肪酸降低了胰岛素刺激的L6-GLUT4myc和C2C12-GLUT4myc肌管的GLUT4myc转位和Akt的磷酸化。第二部分结果显示：饱和脂肪酸并不影响JNK、IRS1的磷酸化；PKC抑制剂BIM对饱和脂肪酸孵育后胰岛素刺激的GLUT4myc转位的降低没有影响,即抑制PKC没有缓解胰岛素抵抗作用。第三部分结果显示：电刺激增加了C2C12-GLUT4myc肌管的GLUT4myc转位；Compound C、STO-609、KN93、CN21均抑制了电刺激增加的GLUT4myc转位。结论：1.饱和脂肪酸造成L6-GLUT4myc和C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞胰岛素抵抗。2.饱和脂肪酸造成骨骼肌细胞胰岛素抵抗其机制可能不涉及PKC、JNK或参与作用很小。3.电刺激可以模拟运动促进GLUT4myc转位；参与的信号分子可能涉及AMPK、CaMKK、CaMKⅡ。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、棕榈酸对骨骼肌细胞胰岛素作用的影响
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 结果
• 1.4 小结
• 二、棕榈酸造成骨骼肌细胞胰岛素抵抗的机制
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果
• 2.4 小结
• 三、电刺激调节C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞GLUT4myc转位及其机制
• 3.1 材料
• 3.2 方法
• 3.3 结果
• 3.4 小结
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述 饱和脂肪酸与骨骼肌胰岛素抵抗
• 综述参考文献
• 致谢