中药地榆中抗氧化活性物质的提取及其分析

论文摘要

本课题主要对地榆提取物的抗氧化活性进行了研究,包括对三种自由基的清除作用,优化抗氧化活性物质的提取工艺,探讨了抗氧化活性物质的稳定性并进一步对抗氧化活性物质进行分离纯化和成分粗测。最后对地榆提取物作了一些应用研究。采用单因素实验确定每个因素的最佳提取条件分别为:乙醇浓度60%（V/V）、料液比1:12、提取温度70℃,提取时间2h。采用正交实验,得出最佳提取工艺条件为乙醇浓度60%,料液比1:12,提取温度73.1℃,提取时间2.09h。在此条件下,地榆提取物中总黄酮含量为0.2104mg/mg,总酚含量为0.1938mg/mg。对地榆提取物抗氧化活性做了稳定性测试,结果表明地榆提取物的抗氧化活性具有较好的热稳定性,对紫外光照射稳定。采用三种分光光度法,测定了地榆提取物对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用,结果表明:在三种体系中,提取物的自由基清除作用趋势相同。对活性物质进一步分析,首先用四种不同极性的溶剂对地榆提取物水悬液进行萃取,得到五个部分:石油醚部、氯仿部、乙酸乙酯部、正丁醇部和水部,经抗氧化活性比较,确定乙酸乙酯部的抗氧化活性最强,正丁醇部次之。乙酸乙酯部经薄层层析,展开后,有多个斑点,用1%的AlCl3显色,多个点显示黄色,紫外灯光下显黄绿色。推断抗氧化活性组分属于黄酮类化合物。乙酸乙酯部分上聚酰胺柱分离,得到抗氧化效果最好的部分,通过LC-MS分析,推断山柰素-3,7二鼠李糖甙是地榆抗氧化有效成分之一。把地榆提取物加入到化妆品中作测试,结果表明地榆提取物具有很好的自由基清除、防腐、美白效果,可以在化妆品中广泛应用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 综述
• 前言
• 1.1 引言
• 1.2 抗氧化剂的研究现状
• 1.2.1 抗氧化剂的抗氧化机理
• 1.2.1.1 初始型抗氧化剂
• 1.2.1.2 次级型抗氧化剂
• 1.2.2 表征抗氧化活性的方法与参数
• 1.2.2.1 方法
• 1.2.2.2 参数
• 1.2.3 对抗氧化活性测定方法的要求
• 1.2.4 测定抗氧化活性的方法
• 1.2.4.1 以抗氧化剂抑制脂质氧化为基础的方法
• 1.2.4.2 清除自由基的方法
• 1.2.4.3 以抑制自由基对底物的氧化降解为基础的方法
• 1.2.4.4 抗氧化剂的还原能力
• 1.2.5 抗氧化剂的种类
• 1.2.5.1 活性抗氧化剂
• 1.3 天然抗氧化剂的研究与利用
• 1.3.1 天然抗氧化剂的种类与性质
• 1.3.2 中草药抗氧化剂活性物质的提取方法
• 1.3.2.1 固液浸提
• 1.3.2.2 超临界流体萃取
• 1.3.2.3 超声提取
• 1.3.2.4 微波辅助萃取
• 1.3.2.5 半仿生提取法
• 1.3.2.6 强化溶剂提取法
• 1.4 地榆的资源及其生物活性作用
• 1.4.1 地榆的资源
• 1.4.2 地榆的化学成分
• 1.4.3 地榆的研究现状及应用
• 1.4.3.1 医药方面
• 1.4.3.2 食用方面
• 1.4.3.3 化妆品方面
• 1.5 结论和立题依据
• 第二章 地榆抗氧化成分的提取工艺研究
• 2.1 地榆提取物抗氧化成分的评定方法
• 2.1.1 试剂与仪器
• 2.1.2 实验方法
• 2.1.2.1 总黄酮含量的测定
• 2.1.2.2 总酚含量的测定
• 2+ 褪色法测定对·OH 自由基的清除作用'>2.1.2.3 亚硝基R 盐-Co²⁺ 褪色法测定对·OH 自由基的清除作用
• 2.1.3 结果与讨论
• 2.1.3.1 芦丁标准曲线
• 2.1.3.2 没食子酸标准曲线
• 2.1.4 小结
• 2.2 地榆中抗氧化活性成分的提取工艺研究
• 2.2.1 试剂与仪器
• 2.2.2 实验方法、结果与分析
• 2.2.2.1 地榆提取工艺的单因素试验
• 2.2.2.1.1 乙醇浓度对热回流提取的影响
• 2.2.2.1.2 温度对热回流提取的影响
• 2.2.2.1.3 料液比对热回流提取的影响
• 2.2.2.1.4 提取时间对热回流提取的影响
• 2.2.2.2 地榆提取工艺的正交试验
• 2.2.2.2.1 总黄酮最佳提取工艺的确定
• 2.2.2.2.2 总酚最佳提取工艺的确定
• 2.2.2.3 最佳提取工艺的验证
• 2.2.3 小结
• 第三章 地榆抗氧化活性物的稳定性及成分分析
• 3.1 活性物质的稳定性
• 3.1.1 试剂与仪器
• 3.1.2 实验方法
• 3.1.2.1 样品的制备
• 3.1.2.2 稳定性实验
• 3.1.3 结果与讨论
• 3.1.3.1 热处理对地榆提取物抗氧化活性的影响
• 3.1.3.2 紫外光对地榆提取物抗氧化活性的影响
• 3.1.4 小结
• 3.2 抗氧化性的测定——清除自由基作用
• 3.2.1 试剂与仪器
• 3.2.2 实验方法
• 2^-·自由基的清除作用'>3.2.2.1 连苯三酚自氧化法研究对O₂^-·自由基的清除作用
• 3.2.2.2 Fenton 体系研究对·OH 自由基的清除作用
• 2+ 褪色法研究对·OH 自由基的清除作用'>3.2.2.3 亚硝基R 盐（Nit-R）-Co²⁺ 褪色法研究对·OH 自由基的清除作用
• 3.2.3 小结
• 3.3 成分初步分离及抗氧化活性研究
• 3.3.1 试剂与仪器
• 3.3.2 实验方法
• 3.3.2.1 提取
• 3.3.2.2 萃取分离
• 3.3.2.3 溶剂萃取各部分的抗氧化性测定
• 3.3.2.4 抗氧化成分的薄层层析
• 3.3.3 结果与讨论
• 3.3.3.1 活性物质的极性分部
• 3.3.3.2 薄层层析结果
• 3.3.4 小结
• 3.4 活性物质的分离纯化
• 3.4.1 实验材料及仪器
• 3.4.2 实验方法
• 3.4.2.1 样品的制备
• 3.4.2.2 柱层析分离
• 3.4.2.3 抗氧化性测定
• 3.4.3 结果与讨论
• 3.4.3.1 聚酰胺薄板跟踪
• 3.4.3.2 各洗脱液的抗氧化活性
• 3.4.4 小结
• 3.5 抗氧化有效成分的LC-MS 分析
• 引言
• 3.5.1 试剂与仪器
• 3.5.2 实验方法
• 3.5.2.1 样品的制备
• 3.5.2.2 LC-MS 分析条件
• 3.5.3 结果与讨论
• 3.5.4 小结
• 第四章 地榆提取物在化妆品中的应用研究
• 4.1 抗衰老效果评价
• 4.1.1 仪器
• 4.1.2 实验方法
• 4.1.2.1 样品信息
• 4.1.2.2 测试环境条件
• 4.1.2.3 志愿者人数
• 4.1.2.4 测试部位
• 4.1.2.5 测试周期
• 4.1.2.6 观察分析过程
• 4.1.3 小结
• 4.2 美白效果评价
• 4.2.1 抑制酪氨酸酶的活性
• 4.2.1.1 试剂与仪器
• 4.2.1.2 实验方法
• 4.2.1.2.1 反应试剂的配制
• 4.2.1.2.2 样品的制备
• 4.2.1.2.3 酪氨酸酶抑制率的测定
• 4.2.1.3 结果和讨论
• 4.2.2 美白效果的人体实验
• 4.2.2.1 仪器
• 4.2.2.2 实验方法
• 4.2.2.2.1 样品信息
• 4.2.2.2.2 测试环境条件
• 4.2.2.2.3 志愿者人数
• 4.2.2.2.4 测试部位
• 4.2.2.2.5 测试周期
• 4.2.2.2.6 色差计L*a*b*色度分析测试过程
• 4.2.3 小结
• 4.3 抑菌效果评价
• 4.3.1 试剂与仪器
• 4.3.2 实验方法
• 4.3.3 结果和讨论
• 4.3.4 小结
• 第五章 总论
• 一、 地榆提取物的抗氧化活性及活性物质分离纯化
• 二、 地榆提取物在化妆品中的应用研究
• 三、 展望
• 致谢
• 参考文献
• 硕士阶段发表论文