论文摘要
目的:建立呼吸道合胞病毒（RSV）感染SD大鼠动物模型。研究RSV感染后SD大鼠肺内神经营养因子（NGF、BDNF、NT3及NT4）浓度的变化与气道神经可塑性改变间的关系,为婴幼儿哮喘的预防治疗提供新的思路。方法:1-2周龄SD大鼠共60只,随机分为2组,A组:正常对照组;B组RSV感染组。每组30只,采用每周1次呼吸道合胞病毒滴鼻法制作模型。在第8周进行气道阻力测定,留取左肺行HE染色观察气道炎症改变及免疫组化明确气道突触囊泡素和神经丝的表达变化,原位杂交法检测肺组织RSV RNA的表达,取右肺行组织匀浆后,以酶联免疫吸附（ELISA）法检测肺组织匀浆上清液神经营养因子（NGF、BDNF、NT3及NT4）浓度的变化。结果:（1）一般情况:实验组大鼠渐出现卡他性鼻炎、呼吸气促、毛乱、活动度降低的临床表现。（2）体温:滴鼻后24小时内实验组动物体温上升幅度较基础体温有统计学差异（P＜0.05）,而对照组滴鼻前后体温变化没有统计学差异。（3）体重:干预8周后,两组实验动物体重没有明显差别。（4）原位杂交检测肺组织RSV RNA的表达:对照组大鼠肺组织中未见RSV RNA阳性信号,而实验组大鼠肺间质细胞中可见明显的RSV RNA阳性信号。（5）气道反应性:干预8周后,各组间大鼠的气道阻力基础值差异无显著性,在RSV感染组随着盐酸组胺浓度的升高,气道阻力明显增高。（6）HE染色:光镜下实验组大鼠肺组织符合典型间质性肺炎的病理改变。（7）免疫组化:8周RSV组大鼠气道壁突触囊泡素及神经丝阳性分布部位及形态与对照组相似,但分布密度较对照组明显上调（P＜0.05）,阳性产物为棕红色颗粒,颗粒与对照组相比较粗大。（8）神经营养因子表达水平:RSV感染组NGF及BDNF表达水平较对照组明显增高（P＜0.05）;而NT3及NT4表达水平则较对照组没有明显差别。（9）相关性分析:NGF及BDNF浓度表达均与气道突触囊泡素表达呈正相关关系（r1=0.892,r2=0.995,P＜0.05）,与神经丝表达呈正相关关系（r1=0.949,r2=0.936,P＜0.05）,与气道高反应性也呈正相关关系（r1=0.929,r2=0.910,P＜0.05）。结论:（1）本实验发现RSV感染可引起大鼠的气道神经可塑性的改变,表现为气道神经内SYN、NF的表达增加,此二者的密度可反映气道神经的密度分布;（2）RSV感染组大鼠肺组织匀浆中NGF及BDNF浓度较对照组明显增高;（3）NGF及BDNF可能参与了RSV感染所致大鼠气道神经可塑性改变的调节过程,从而导致气道高反应性的发生。
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