HIV-1附属蛋白特异性细胞毒性T细胞（CTL）应答研究

论文摘要

获得性免疫缺陷综合征（AIDS）已经夺取了近四千万人的生命并严重威胁着人类健康。高效抗逆转录病毒疗法虽然在抑制HIV-1复制、免疫重建、降低AIDS相关疾病的发病率及延长HIV感染后发病时间上有良好的效果。然而由于这些抗病毒药物价格昂贵、毒副作用大、HIV-1耐药株的产生以及患者依从性不好影响了抗病毒治疗的疗效。因此安全有效的疫苗来控制HIV-1的流行和传播将成为人类战胜HIV的重要武器。特异性的细胞毒性T细胞（CTL）应答在控制HIV-1和SIV复制中发挥重要作用。诱导机体产生针对HIV-1强烈的CTL应答成为目前HIV-1疫苗研制的热点。Nef蛋白是HIV感染早期表达的蛋白质之一,同时也是HIV-1感染后CTL最早识别并产生应答的靶蛋白。现已证实其能够通过激活CD4淋巴细胞,提高病毒颗粒的感染性,增加CD4分子和MHC分子的内吞,以及防止受感染细胞凋亡等多种途径对HIV的复制起到重要的促进作用。Vpu通过影响新合成CD4分子向细胞膜转运和增加CD4分子从细胞膜向细胞内内吞来下调细胞表面的CD4。Vpr蛋白通过促进整合前复合物（PIC）从胞浆到胞核的转运对病毒感染静止期的细胞起到了重要作用。Vpr还可以使宿主细胞的细胞周期在G2/M期滞留,结果容易引起的细胞凋亡,甚至引起分裂细胞凋亡。Vif可以通过抑制抗病毒因子APOBEC3G的活性,增强病毒的感染性。Vif也可以使细胞周期滞留在G2/M期。本研究选取61例HIV-1感染者/AIDS患者和10例HIV抗体阴性的健康对照者作为研究对象。进行CD4细胞计数、病毒载量检测并收集一般的临床资料。应用覆盖HIV-1B、C亚型附属蛋白（Nef、Vpu、Vpr和Vif）的142个肽段作为抗原,刺激来自研究对象的CTL产生γ-干扰素,采用酶联免疫斑点吸附试验（ELISpot）检测,来定量测定HIV-1附属蛋白特异性CD8+T细胞应答,对中国人群HIV-1附属蛋白特异性CD8+T细胞应答反应进行了较全面的研究。本研究发现无论对HIV-1B亚型还是HIV-1C亚型附属蛋白都能产生特异性CTL应答,特别是Nef区蛋白的反应频率和累积应答强度都较高（P<0.001）,B、C亚型间的应答频率和累积应答强度都无显著差别（P>0.05）,其免疫优势区也大致相同,并筛选出了附属蛋白区的免疫优势区。附属蛋白特异性的累积CTL应答强度将近达到总应答的21%。这些结果表明尽管HIV-1附属蛋白的序列较短,但它们在诱导特异性的CTL应答中发挥了重要作用。总之,本课题初步研究了HIV-1附属蛋白特异性的CTL应答特征,评价了HIV-1附属蛋白特异性的CTL应答在HIV-1激发的CTL应答中的地位,确定了HIV-1附属蛋白区内CD8+T细胞应答的优势区域。为进一步筛选CTL表位和制备安全、有效的HIV-1疫苗奠定了基础。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 1. 艾滋病的流行现状
• 2. HIV-1 特异性细胞毒性T 淋巴细胞（CTL）应答在HIV-1 感染中的作用
• 3. HIV-1 附属蛋白与HIV 感染
• 正文
• 1. 材料和方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢