论文摘要
目的：观察人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞中环氧合酶—2（cyclooxygenase-2，COX-2）的表达情况，以及选择性COX-2抑制剂尼美舒利（nimesulide，NIM）对该细胞株生长增殖的影响。为选择性COX-2抑制剂应用于视网膜母细胞瘤的防治提供理论依据。方法：体外培养人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞；采用免疫细胞化学SP法检测HXO-RB44细胞中COX-2的表达情况；将不同浓度的NIM（0、200、300和400μmol／L）作用于HXO-RB44细胞分别达24h、48h和72h后，于倒置相差显微镜下观察各时间段各组细胞形态学变化，并用台盼蓝拒染法进行细胞计数、绘制生长曲线和噻唑蓝（MTT）比色法观察NIM对细胞增殖的影响。结果：免疫细胞化学结果显示COX-2在人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞中的表达率高达98.3％，阳性物质弥漫分布于整个胞浆或沿核膜周边呈线状分布。阴性对照组中阳性细胞表达率为0％。细胞培养24h后，倒置相差显微镜下观察各组细胞形态均无明显变化。200μmol／L浓度组于药物作用72h后细胞形态仍无显著变化，而300μmol／L浓度组72h后及400μmol／L浓度组48h小时后，可观察到部分细胞形态发生改变：细胞散在分布，形态变得不规则且折光性减弱，胞质中可见颗粒样物质。随着时间的延长和NIM浓度的增加细胞生长曲线逐渐变得平坦，48h至72h内400μmol／L组细胞甚至呈现负增长，曲线呈下降趋势。台盼蓝拒染实验显示低浓度、作用时间短时，活细胞率均较高，但随时间延长和药物浓度增加，活细胞率下降。MTT法显示NIM能降低HXO-RB44细胞的光吸收值（A值），细胞生长抑制率随作用时间和药物浓度的增加而增加。结论：1．COX-2在人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞中呈高度表达；2．NIM能显著抑制HXO-RB44细胞的生长和增殖，抑制作用呈剂量和时间依赖性。
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