乙肝转阴颗粒的制剂和质量标准研究及部分药效学研究

乙肝转阴颗粒的制剂和质量标准研究及部分药效学研究

论文摘要

目的:筛选和优化乙肝转阴颗粒的制备工艺。方法:采用正交实验设计方法,以水提取物中浸膏得率,有效成分齐墩果酸和槲皮素提取率为质控指标,确定提取参数。确定了制粒方法。结果:确定乙肝转阴颗粒的最佳水提取工艺为10倍量水,煎煮3次,每次1.5h。制粒方法以干膏粉末:淀粉:糊精:蔗糖=5:6:4:2为最佳。结论:乙肝转阴颗粒制备工艺稳定,可行。目的:建立乙肝转阴颗粒的质量标准。方法:采用TLC法定性鉴别了小田基黄、白花蛇舌草;分别以槲皮素、齐墩果酸为对照品,用HPLC法分别测定颗粒中槲皮素与齐墩果酸的含量。色谱柱:Hanbon Sci.&Tech. Dubhe C18色谱柱(4.6mm*250mm 5μm),流动相分别为:甲醇:0.4%磷酸=45:55,甲醇:水=87:13;检测波长分别为:360nm,212nm;流速:1.0ml·min-1,柱温:35℃。结果:在选定的薄层条件下,小田基黄、白花蛇舌草的薄层图谱清晰,分离度好。颗粒中槲皮素的线性范围:0.0544.320μg(R2=0.9994),平均回收率为99.94%,RSD=1.00%。齐墩果酸线性范围:0.1072.140μg (R2=0.9993),平均回收率为100.46%,RSD=0.99%。结论:本方法简便,灵敏度高,可有效地控制乙肝转阴颗粒的质量。目的:研究乙肝转阴颗粒(YGZYG)对小鼠对乙酰氨基酚所致急性肝损伤的保护作用及其机制。方法:采用对乙酰氨基酚(AP)皮下注射小鼠,建立AP肝损伤模型。实验中,把昆明种小鼠随机分为正常对照组(NC组),模型组(AP model组),YGZYG高(YGZYGH)、YGZYG中(YGZYGM)、YGZYG低(YGZYGL)剂量组,阳性对照组。观察肝脏重量指数,脾脏重量指数,胸腺重量指数;测定血清AST、ALT、碱性磷酸酶(ALP)活性,血清白蛋白(Alb)含量以及总抗氧化能力(T-AOC);肝组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:与模型组比较,YGZYG能减轻肝脏和胸腺重量,对脾脏重量无明显影响;降低血清AST、ALT、ALP活性,肝组织TP、MDA含量;增加血清Alb含量、T-AOC水平,肝组织SOD活性(P<0.01或P<0.05);能够减轻肝细胞损伤程度。结论:YGZYG对小鼠化学性肝损伤具有保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用有关。目的:研究乙肝转阴颗粒对刀豆蛋白A(Con A)所致小鼠急性肝损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:60只小鼠随机分为正常对照组(NC组),模型组(AP model组),YGZYG高(YGZYGH)、YGZYG中(YGZYGM)、YGZYG低(YGZYGL)剂量组实验首日上午,除正常对照组尾静脉注射无菌PBS(磷酸盐缓冲液)外,其余各组小鼠均尾静脉注射Con A 20mg/kg。连续给药5天,YGZYG各组的剂量分别为400、200和100 mg/kg,各剂量组均采用口服灌胃给药。末次给药后4h,正常对照组再次尾静脉注射无菌PBS,其余各组小鼠则尾静脉注射Con A 20mg/kg,禁食,不禁水。8h后,各组小鼠摘眼球取血,检测各组小鼠血清中ALT、AST、AKP活性,肝微粒体NO含量;肝组织MDA含量、SOD活性;免疫组织化学法观察肝组织Bax及Bcl-2的表达;HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:与模型组比较,YGZYG各剂量组能显著降低血清ALT、AST、AKP活性,降低肝微粒体NO含量以及肝组织MDA含量;增强肝组织SOD活性(P<0.05或P<0.01);病理切片结果表明YGZYG各组能够不同程度地减轻肝细胞的损伤。免疫组化结果表明YGZYG各剂量组可不同程度地下调Bax及Bcl-2的表达。结论:YGZYG对Con A致小鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与下调NO浓度,抗细胞凋亡,抑制脂质过氧化有关。

论文目录

  • 主要缩略语英汉对照表
  • 前言
  • 第一部分 乙肝转阴颗粒的制备工艺研究
  • 摘要
  • Abstract
  • 1 仪器与材料
  • 1.1 主要仪器
  • 1.2 试剂及药材
  • 2. 提取工艺的选择依据及确定
  • 2.1 处方中主要药物所含成分的性质
  • 2.2 生产条件的确定
  • 2.3 剂型的确定
  • 3 提取工艺条件的筛选
  • 3.1 考察影响因素及水平的确定
  • 3.2 水煎煮工艺试验方法以及结果
  • 3.3 水煎煮提取工艺的验证试验
  • 4 乙肝转阴颗粒的制剂工艺研究
  • 4.1 制剂工艺选择
  • 4.2 制剂工艺优选
  • 4.3 制剂工艺验证试验
  • 5 讨论
  • 参考文献
  • 第二部分 乙肝转阴颗粒的质量标准研究
  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 仪器与试药
  • 1.1 仪器
  • 1.2 试药
  • 2 定性鉴别
  • 2.1 性状
  • 2.2 小田基黄薄层定性鉴别[1-2]
  • 2.3 白花蛇舌草薄层定性鉴别[3-4]
  • 3 含量测定
  • 3.1 HPLC 法测定齐墩果酸的含量
  • 3.2 HPLC法测定槲皮素的含量
  • 4 乙肝转阴颗粒初步稳定性试验研究[8]
  • 5 讨论
  • 5.1 薄层定性鉴别的讨论
  • 5.2 含量测定的讨论
  • 参考文献
  • 第三部分 乙肝转阴颗粒对对乙酰氨基酚所致急性肝损伤的保护作用
  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1. 急性毒性实验
  • 1.1 实验材料
  • 1.2 实验方法
  • 1.3 实验结果
  • 1.4 实验讨论
  • 2. 乙肝转阴颗粒对对乙酰氨基酚所致急性肝损伤的保护作用
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验方法
  • 2.3 实验结果
  • 4 实验讨论
  • 参考文献
  • 第四部分 乙肝转阴颗粒对刀豆蛋白 A 所致免疫性肝损伤的保护作用
  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 实验材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 药物及试剂
  • 1.3 仪器与设备
  • 2 实验方法
  • 2.1 动物分组及模型制备[1-5]
  • 2.2 肝微粒体的制备及NO 的测定
  • 2.3 肝组织病理学检查
  • 2.4 肝脏组织Bcl-2,Bax 蛋白免疫组织化学染色
  • 2.5 统计学分析
  • 3 实验结果
  • 3.1 YGZYG 对免疫性肝损伤小鼠血清AST、ALT、LDH 的影响
  • 3.2 YGZYG 对免疫性肝损伤小鼠肝微粒体NO,肝匀浆SOD,MDA,GSH 和GSH-PX 水平的影响
  • 3.3 小鼠肝脏病理组织学检查结果
  • 3.4 肝脏组织 Bcl-2,Bax 蛋白免疫组织化学染色结果
  • 4 实验讨论
  • 参考文献
  • 全文总结
  • 综述
  • 参考文献
  • 攻读硕士学位期间(待)发表的论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

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