血红素氧化酶-1在冠心病患者外周血单个核细胞中的表达

血红素氧化酶-1在冠心病患者外周血单个核细胞中的表达

论文摘要

背景:血红素氧化酶作为内源性一氧化碳生成的限速酶及关键酶,可以将血红素分解成为一氧化碳,胆红素及铁。胆红素是机体内清除过氧化脂质和超氧自由基的重要生理抗氧化物质,能抗缺血/再灌注损伤,其含量与冠心病的发病率呈负相关[1,2]。既往认为一氧化碳是有毒气体,近年研究发现,生理浓度的一氧化碳是新型的血管舒张因子,具抑制血小板聚集和抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖作用,且能抑制血管内皮细胞凋亡,刺激血管生成,对心血管系统起保护作用。血红素氧化酶(HO)有HO-1,HO-2,HO-3三种同工酶,其中HO-1为可诱导型,分子量32Kd,在氧化应激状态下表达明显增加,而HO-2,HO-3在细胞内含量相对稳定。近几年国内外研究表明,HO-1对心血管系统起重要的保护作用[3]:通过抗氧化作用,保护血管内皮细胞及心肌细胞;通过调节细胞生长减少内皮细胞凋亡,保护内皮系统的稳定性,同时促进血管平滑肌凋亡,减轻血管损伤后的不良重构;直接抑制心肌细胞肥大,降低左室/体重比例。 研究目的:观察血红素氧化酶-1(HO-1)在冠心病患者中的表达情况;从临床角度观察HO-1表达水平与冠心病临床分型的关系;从冠脉造影结果角度观察HO-1表达水平与冠心病患者冠状动脉病变程度及其形态的关系。 研究方法:选择经冠脉造影确诊的冠心病患者110例作为研究对象试验组,并按如下不同方法进行分组:①按临床特点分为急性心肌梗死组(AMI组),40例;不稳定型心绞痛组(UAP组),40例;稳定型心绞痛组(AP组),30例。②按照病变冠脉数量将冠心病患者分为单支病变组(SV组,38例)、双支病变组(DV组,44例)和多支病变组(MV组,28例)。③按照冠脉病变处斑块的形态[4,5]分为Ⅰ型病变组(type Ⅰ,36例)、Ⅱ型病变组(type Ⅱ,48例)、Ⅲ型病变组(type Ⅲ,26例)。选择冠脉造影正常的30例患者作为研究对象对照组。 利用单个核细胞分离液分离单个核细胞(包括淋巴细胞和单核细胞)。通过细胞免疫组化和Western blot两种方法检测研究对象外周血单个核细胞HO-1蛋白表达水平。利用计算机图像分析系统对实验结果进行分析,对HO-1表达水平进行量化,免疫组化结果以平均每个细胞中阳性物质的面积(平均面积)和背底平均

论文目录

  • 目录
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 正文部分
  • 第1章 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.1.1 研究对象
  • 1.1.2 实验分组
  • 1.1.3 免疫组化
  • 1.1.4 Western blot
  • 1.1.5 冠状动脉造影
  • 1.2 方法
  • 1.2.1 外周血单个核细胞的分离
  • 1.2.2 HE染色过程
  • 1.2.3 免疫组织化学染色
  • 1.2.4 Western blot
  • 1.2.5 实验照料的统计学分析
  • 第2章 结果
  • 2.1 HO-1表达水平与冠心病临床类型的关系
  • 2.1.1 组间可比性分析
  • 2.1.2 组织病理学观察
  • 2.1.3 蛋白质印迹
  • 2.2 HO-1表达水平与冠心病患者冠脉病变程度的关系
  • 2.2.1 组间可比性分析
  • 2.2.2 组织病理学观察
  • 2.2.3 蛋白质印迹
  • 2.3 HO-1表达水平与冠脉病变形态的关系
  • 2.3.1 组间可比性分析
  • 2.3.2 免疫组织化学检测结果
  • 2.3.3 蛋白质印迹
  • 第3章 讨论
  • 3.1 血红素氧化酶的基本生物学特性
  • 3.2 HO-1的生理功能
  • 3.2.1 HO-1的组织细胞保护作用
  • 3.2.2 HO-1对血管的保护作用
  • 3.2.3 HO-1抑制心肌细胞肥大
  • 3.2.4 HO-1的冠状动脉保护作用
  • 3.2.5 一氧化碳的生理作用
  • 3.3 HO-1血管保护作用的基础研究
  • 3.4 HO-1心血管保护作用的临床研究
  • 第4章 结论
  • 参考文献
  • 附图
  • 附录1
  • 附录2
  • 综述
  • 致谢
  • 相关论文文献

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