地锦草质量控制及没食子酸药物动力学研究

论文摘要

地锦草为大戟科植物地锦Euphorbia humifusa Willd．或斑地锦Euphorbia maculata L。的干燥全草，具有清热解毒、凉血止血之功效。本文对地锦草的化学成分、质量控制方法和相关活性成分没食子酸的体内药物动力学过程进行了研究，主要内容如下：1．采用硅胶柱、聚酰胺柱、LH-20等柱色谱技术对地锦草的化学成分进行研究，分离并鉴定了8个化合物，分别为：槲皮素（quercetin，1）、短叶苏木酚酸乙酯（brevofolincarboxylic acid，2）、木犀草素（luteolin，3）、没食子酸（gallic acid，4）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（luteolin-7-O-β-D-glucoside，5）、紫云黄芪苷-6″-O-没食子酸酯（astragalin-6″-O-gallate，6）、槲皮素-3-O-半乳糖苷-6″-O-没食子酸酯（quercefin-3-O-galactosyl-6″-O-gallate，7）和槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（quercetin-3-O-β-D-glucoside，8）。其中，化合物2、3均为首次从该植物中分离得到。2．建立了测定地锦草药材中没食子酸的高效液相色谱法，色谱柱：Phenomenex C18柱（250×4．6 mm，4μm）；流动相：甲醇-0．5％冰醋酸（10：90，v／v）；检测波长：272 nm。线性范围为1．75～35．0μg·ml-1（r=0．9993），回收率为99．9％（RSD=1．8％）。建立了同时测定地锦草药材中槲皮素-3-O-半乳糖苷-6″-O-没食子酸酯、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷的高效液相色谱法，色谱柱：Phenomenex C18柱（250×4．6 mm，4μm）；流动相：甲醇-0．1％磷酸溶液（42．5：57．5，v／v）；流速：0．9 ml·min-1；检测波长：330 nm。线性范围分别为：7．60～304μg·ml-1（r=1），1．04～41．6μg·ml-1（r=0．9999），12．6～504μg·ml-1（r=0．9999），0．82～32．8μg·ml-1（r=0．9999）和2．40～96．0μg·ml-1（r=0．9999），回收率分别为97．4％（RSD=2．4％），98．0％（RSD=2．8％），100．7％（RSD=2．8％），98．1％（RSD=1．7％）和101．7％（RSD=2．8％）。3．建立了大鼠血浆中没食子酸的HPLC分析方法，以对乙酰氨基酚为内标，血浆经甲醇沉淀蛋白后进样分析。色谱柱：Phenomenex C18柱（250×4．6 mm，4μm）；流动相：甲醇-0．5％冰醋酸溶液（7：93，v／v）；流速：1．0 ml·min-1；检测波长：272 nm。线性范围为0．30～30．0μg·ml-1（r=0．9964），日内、日间RSD均不大于11．7％，平均提取回收率不低于80．0％，所建立的方法符合生物样品测定要求。应用所建方法分别研究了静脉注射和灌胃给予大鼠没食子酸后的药物动力学过程。大鼠静脉给药：给药剂量：75 mg／kg，给药后t1／2α为9．9 min，t1/2β为78．9 min，AUC0～t为461．9 mg·min·L-1；灌胃给药：给药剂量：150 mg／kg，给药后t1／2α为46．6 min，t1／2β为56．5 min，Tmax为66．0 min，Cmax为3．96 mg·L-1，AUG0～t为396．5 mg·min·L-1。没食子酸在大鼠体内过程均符合二室模型，绝对生物利用度为42．9％。4．采用平衡透析法对没食子酸大鼠血浆蛋白结合率进行测定。结果表明，没食子酸在低、中、高三个浓度下，蛋白结合率分别为81．4％、91．4％和83．2％。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 中药质量控制现状
• 1.2 中药药物动力学研究现状
• 1.3 药物血浆蛋白结合率的意义
• 1.4 地锦草的研究概况
• 1.5 立题依据与研究思路
• 第二章 地锦草化学成分的分离与结构鉴定
• 2.1 仪器与试药
• 2.2 方法与结果
• 2.2.1 提取与分离
• 2.2.2 化合物的结构鉴定
• 2.3 小结
• 第三章 地锦草药材质量控制方法研究
• 3.1 仪器与试药
• 3.2 方法与结果
• 3.2.1 没食子酸含量测定
• 3.2.2 五个黄酮苷同时含量测定
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 第四章 没食子酸在大鼠体内的药物动力学研究
• 4.1 仪器、试药及试验动物
• 4.2 方法与结果
• 4.2.1 大鼠血浆样品中没食子酸分析方法的建立
• 4.2.2 没食子酸的药物动力学研究
• 4.3 讨论
• 4.4 小结
• 第五章 没食子酸大鼠血浆蛋白结合率的测定
• 5.1 仪器与试药
• 5.2 方法与结果
• 5.2.1 透析内液和透析外液中没食子酸分析方法的建立
• 5.2.2 大鼠血浆蛋白结合率的测定
• 5.3 讨论
• 5.4 小结
• 第六章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介