白细胞介素-2对急性脊髓损伤细胞凋亡的影响相关性实验研究

论文摘要

目的:在建立大鼠脊髓损伤模型基础上,观察不同时间点IL—2对脊髓胶质细胞,神经元凋亡的影响,以期为临床急性脊髓损伤的治疗提供理论依据。 方法:健康成年大鼠72只,体重250～300g,随机分为两组,其中单纯损伤组（单纯打击损伤）36只,IL—2组（手术加IL—2）36只。脊髓损伤动物模型的制备:用自制Allen打击器25gcm致伤力撞击脊髓,制成脊髓损伤动物模型。IL—2组每日肌注IL—2（10u）直至处死,单纯损伤组仍每日肌注生理盐水0.5ml直至处死。组织切片的制备:脊髓损伤后1d,3d,5d,8d,14d,21d共6个时间段分批处死动物。4%多聚甲醛心肌灌注固定24h,切取每只大鼠T5～T13节段脊髓组织,常规制成切片,给于HE染色,Bcl-2检测,TUNEL原位末端标记以及伤后第14天检测Gale评分和斜板实验,检测大鼠脊髓损伤后细胞凋亡和脊髓神经功能恢复情况。 结果:TUNEL原位标记检测:单纯损伤组24小时已出现不少阳性细胞,以胶质细胞为主,3—8天达到高峰,此后逐渐回落,但21天时仍有阳性细胞,应用IL—2治疗后,凋亡细胞明显减少（P<0.05）。Bcl-2蛋白检测:在脊髓损伤后的第1天,脊髓组织即开始较高表达Bcl-2蛋白。单纯损伤组Bcl—2高峰发生在损伤后3天,而IL—2组伤后8天达到高峰,此时Bcl—2蛋白不仅表达在神经细胞中,更多的在胶质细胞中大量表达,且此状态一直维持到伤后14天才开始下降,伤后21天仅少量表达（P<0.05）。伤后第14天检测Gale评分和斜板实验,IL—2组同单纯损伤组相比,无明显区别（P>0.05）。 结论:本研究证明,IL—2在脊髓损伤中通过改善微循环,促进Bcl-2蛋白的表达,清除氧自由基,抗氧化作用能够抑制脊髓损伤早期神经细胞和胶质细胞的凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤,促进脊髓神经功能的恢复。所以SCI后早期应用IL—2配合其它药物阻止神经细胞和胶质细胞的凋亡可能有助于减轻SCI的损害程度,促进脊髓神经功能的恢复,为SCI的治疗提供一个新的途径。

论文目录

• 引言
• 论文正文
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验动物和分组
• 1.2 主要实验仪器
• 1.3 实验试剂
• 1.4 组织切片的制备
• 1.5 TUNEL原位末端标记标
• 1.6 图像分析及数据统计
• 1.7 Bcl-2的检测
• 1.8 后肢运动功能的评定
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 第五章 参考文献
• 第六章 附录
• 第七章 致谢
• 第八章 综述及参考文献
• 第九章 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明