流式细胞仪计数论文-杜建明

流式细胞仪计数论文-杜建明

导读:本文包含了流式细胞仪计数论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:FQ-PCR,UF-1000i,铜绿假单胞菌,粪肠球菌

流式细胞仪计数论文文献综述

杜建明[1](2018)在《实时荧光定量PCR法与尿液流式细胞仪UF-1000i尿液细菌计数的比较研究》一文中研究指出目的:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法与尿液流式细胞仪UF-1000i两种方法对尿液细菌计数的基础性能进行比较研究,为临床快速诊断和治疗尿路感染提供可靠依据。方法:1.用紫外-可见分光光度法和麦氏比浊法对标准菌株ATCC27853(铜绿假单胞菌)和ATCC29212(粪肠球菌)进行细菌计数,比较两种方法的相关性以及吸光度和细菌浓度的关系。2.采用煮沸法、碱液煮沸裂解法,氯仿提取法对标准菌株ATCC27853(铜绿假单胞菌)和ATCC29212(粪肠球菌)进行细菌DNA提取,并应用FQ-PCR法进行扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳比较分析。3.将标准菌株ATCC27853(铜绿假单胞菌)和ATCC29212(粪肠球菌)制成不同浓度菌悬液(活菌和死菌),应用FQ-PCR法和细菌培养两种方法对尿流式细胞仪UF-1000i尿液细菌计数进行性能评价。结果:1.在麦氏浊度0.4-0.8范围内,铜绿假单胞菌和粪肠球菌吸光度(625nm波长处)和麦氏浊度有良好的线性关系。铜绿假单胞菌、粪肠球菌浓度为108CFU时,在波长为625nm处的吸光度值分别为0.163和0.155,麦氏浊度二者都为0.5。2.叁种方法对铜绿假单胞菌DNA的提取效果相同;对粪肠球菌,煮沸法经PCR扩增未见对应的扩增产物,氯仿提取法和碱液煮沸裂解法提取DNA的效果相同。3.UF-1000i对两种菌检测的线性范围均在103-107CFU/ml,铜绿假单胞菌重复精密度CV在12.72%-19.46%之间,培养法为25.1%;粪肠球菌重复精密度CV在14.49%-15.57%之间,培养法为23.0%。UF-1000i和培养法对细菌计数测定无显着差异(p>0.05);FQ-PCR法对两种菌检测的线性范围均在106-1011CFU/ml之间,铜绿假单胞菌和粪肠球菌的重复精密度CV分别在11.38%-19.76%之间、12.86-23.28之间。FQ-PCR法和培养法对细菌计数测定无显着差异(p>0.05)。对死菌的检测,UF-1000i法检测铜绿假单胞菌和粪肠球菌的准确性分别为78.9%和94.7%;FQ-PCR法检测铜绿假单胞菌和粪肠球菌的准确性分别为81.5%和98.4%。培养法对两种菌检测的准确性为0%(不能培养出死菌)。结论:1.紫外-可见分光光度法可作为铜绿假单胞菌和粪肠球菌快速计数的方法。2.煮沸法、碱液煮沸裂解法,氯仿提取法叁种方法均可提取铜绿假单胞菌的DNA;碱液煮沸裂解法,氯仿提取法可提取粪肠球菌的DNA,且碱液煮沸裂解法可提取更低浓度菌的DNA,煮沸法不能提取粪肠球菌的DNA。3.UF-1000i对铜绿假单胞菌、粪肠球菌计数的性能稳定,精密度高于细菌培养法和FQ-PCR法;准确性和FQ-PCR法、细菌培养法无显着差异,且可以准确的对死菌计数。(本文来源于《山西医科大学》期刊2018-03-22)

熊忠亮,乔军晶[2](2018)在《流式细胞仪在活体微藻计数中的应用》一文中研究指出通过对不同染色剂的不同浓度的不同微藻运用流式细胞仪计数方法,将其结果与用常规血球计数板计数结果比较,目的是探讨流式细胞仪计数的正确性与可靠性。结果:发现流式细胞仪的计数范围是1×10~2~1×10~6,较之公认的计数范围1×10~4~5×10~5要宽,且流式细胞仪计数在1×10~3~1×10~6的相对标准偏差(RSD)基本在2%左右,最大不超过5%。在1×10~2误差在15%左右。同时,实验还探讨了流式细胞仪对异弯藻和塔胞藻的混合悬液(n(A)∶n(B)=3∶1或1∶3)的计数。不管塔胞藻与异弯藻以何种比例混合,混合液的理论浓度与实际由流式细胞仪计数的浓度都很相近。而且两种不同混合藻液的相对标准偏差小于3%。结论是流式细胞仪对活体微藻计数结果是可靠的。(本文来源于《山东化工》期刊2018年01期)

丁珵,李霞,顾雯,张晓,丁培[3](2017)在《利用流式细胞仪计数蓝氏贾第鞭毛虫和微小隐孢子虫方法的初探》一文中研究指出目的研究利用流式细胞仪对蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)孢囊和微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)卵囊的高浓度混合样本进行计数,为"两虫"标准品制备提供技术支撑,以期能降低"两虫"检测试剂成本。方法利用已知浓度的荧光微球对经免疫荧光染色的"两虫"混合样本进行计数,采用非参数检验中两个相关样本检验方法对流式细胞仪和荧光显微镜计数结果进行统计学分析比较。结果流式细胞仪方法计数蓝氏贾第鞭毛虫孢囊和微小隐孢子虫卵囊的相对标准偏差(RSD)分别为14.7%和15.2%,比荧光显微镜计数结果的RSD(14.1%和15.1%)稍高。利用Wilcoxon检验得出两种方法对孢囊和卵囊的计数结果差异均无统计学意义(Z=-0.918,P=0.359和Z=-0.102,P=0.919)。结论利用流式细胞仪计数高浓度"两虫"混合样本的方法能达到生物学实验要求的精确度,并与荧光显微镜计数方法具有等效性,可弥补荧光显微镜无法直接计数高浓度样本的不足,并为"两虫"标准品的筛选与分装奠定基础。(本文来源于《中国预防医学杂志》期刊2017年11期)

李育芬,顾涛,李艳君[4](2015)在《流式细胞仪测定HIV感染者CD4~+T淋巴细胞绝对计数的测量不确定度评定初探》一文中研究指出1 CD4+T淋巴细胞检测意义CD4+T淋巴细胞作为HIV感染的主要靶细胞首先被感染,并随着病情的发展不断减少。WHO和欧美等国家均推荐,HIV感染者每3个月~6个月监测一次CD4+T淋巴细胞[1],其是HIV感染者的疾病分期及治疗的依据,并作为机会性感染预防和抗病毒治疗的指标。同时是判断抗病毒药物疗效和患者免疫状态的重要指标[2]。CD4+T淋巴细胞检测实验室一(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2015年23期)

常正良,杨国锋[5](2015)在《怎样用流式细胞仪对细胞计数》一文中研究指出1试题(2015年高考理综北京卷第3题)流式细胞仪可根据细胞中DNA含量的不同对细胞分别计数。研究者用某抗癌物处理体外培养的癌细胞。24小时后用流式细胞仪检测,结果如图1所示。对检测结果的分析不正确的是(C)(本文来源于《中学生物教学》期刊2015年17期)

李胜男,王秀娟,周建,孔繁翔,史小丽[6](2015)在《利用流式细胞仪计数微型浮游生物的方法》一文中研究指出微型浮游生物(细胞粒径<20μm)在水生生态系统的物质循环和能量流动中起着重要的作用,对其丰度的准确测定是进一步研究微型浮游生物在不同水生生态系统中作用的重要基础.相对于传统的显微镜检测技术,流式细胞术不仅具有分析速度快、灵敏度和准确度高等优点,而且可以同时测量单个细胞的多个生理参数.不同类型微型浮游生物流式细胞术的应用原理是不同的.对于自养型浮游藻类,主要根据藻体内色素的自发荧光对其进行分辨和计数;而对于异养型细菌、原生动物及浮游病毒等,还需借助外源荧光染料对细胞核酸染色后再进行分析.目前流式细胞术已成为浮游藻类和异养细菌丰度检测的常规方法,但是,由于原生动物具有更大的细胞体积且在自然水体中丰度较低;而浮游病毒粒径又太小,甚至低于光源激发波长,因此流式细胞术应用一直受到限制,直到近10年来才有相关报道.本文对运用流式细胞术计数浮游藻类、浮游细菌、原生动物和浮游病毒的具体原理、方法和进展进行综述,并对流式细胞仪在未来水生微生物学领域的应用进行展望.(本文来源于《湖泊科学》期刊2015年05期)

周更生,叶黎,杨胜利,李霞芳,曾亚莉[7](2014)在《Alere T淋巴细胞计数仪与2种流式细胞仪检测CD4+T淋巴细胞绝对计数比较研究》一文中研究指出目的通过比较Alere T淋巴细胞计数仪与另外2种流式细胞仪(BD FACSCalibur与Partec Cyflow Counter)在CD4+T淋巴细胞检测结果的相关性,从而评估其应用价值。方法参照《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册》第3版要求,于2013-04在成都市收集100份HIV阳性静脉全血。使用Alere T淋巴细胞计数仪检测样品的CD4+细胞的绝对计数,与BD FACSCalibur和Partec Cyflow Counter流式细胞仪检测结果比对。结果 T淋巴细胞计数仪与Calibur检测(94份)CD4+细胞计数结果的Pearson相关系数为0.93,T淋巴细胞计数仪与Cyflow Counter检测(52份)CD4+细胞计数结果Pearson相关系数为0.96;T淋巴细胞计数仪与Calibur平均偏差为-57个/μl,在95%置信区间内上限与下限分别为94.7个/μl与-206.3个/μl;T淋巴细胞计数仪与Cyflow平均偏差为-14个/μl,在95%置信区间内上限与下限分别为72.1个/μl与-99.2个/μl。以CD4+细胞计数350个/μl为抗病毒治疗阈值时,T淋巴细胞计数仪检测的灵敏度及特异性对比Calibur分别为100%及81.13%,对比Cyflow为100%及82.14%。结论 Alere T淋巴细胞计数仪与2种实验室流式细胞仪结果对比具有高度相关性和一致性,且表现出良好的灵敏度以及特异性。(本文来源于《预防医学情报杂志》期刊2014年12期)

吴晓文[8](2014)在《应用流式细胞仪计数水体中的微藻》一文中研究指出为了探讨流式细胞仪对不同浓度条件下微藻个数进行计数的准确度和精密度,该文应用流式细胞仪和血球计数板计数两种方法,对水体中的赤潮异湾藻数目进行不同浓度梯度的检测对比分析,可以发现,流式细胞仪计数结果的RSD值均小于5%,体现了更好的精密度,是一种可以代替血球计数板计数的快速准确的方法。(本文来源于《科技创新导报》期刊2014年19期)

柏春玲,董馨忆[9](2014)在《应用流式细胞仪准确进行细胞计数的参数设定》一文中研究指出目的探索运用流式细胞仪准确进行细胞计数的参数设定.方法使用CyFlow R Space流式细胞仪对体外培养的宣威人肺腺癌细胞GLC进行细胞计数设定前向角散射(FSC)、侧向角散射(SSC)及进样速度,编制GLC细胞计数程序,流式细胞仪法计数结果与血球计数板法比较.结果适当进样速度的流式细胞仪法与血球计数板法计算的细胞浓度差异无统计学意义(P>0.05).结论 CyFlow R Space流式细胞仪能对培养细胞株准确快速计数,流式细胞仪法进行细胞计数可应用于大规模细胞实验中.(本文来源于《昆明医科大学学报》期刊2014年06期)

董馨忆,柏春玲[10](2013)在《流式细胞仪进样速度对细胞计数的影响》一文中研究指出流式细胞术(flow gytometry,FCM)是利用流式细胞仪,用高灵敏度检测器记录下散射光及各种荧光信号,对液流中的细胞或其他微粒进行快速测量的新型分析和分选技术[1].流式细胞术主要包括了样品的液流技术、细胞的分选和计数技术,以及数据的采集和分析技术等[2,3].其中,分析细胞的浓度或细胞亚群浓度统称为计数,对于临床诊断、细胞培养、生物工程学研究等都有很重要意义.目前,昆明医科大学科研实验中心新进一(本文来源于《昆明医科大学学报》期刊2013年12期)

流式细胞仪计数论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

通过对不同染色剂的不同浓度的不同微藻运用流式细胞仪计数方法,将其结果与用常规血球计数板计数结果比较,目的是探讨流式细胞仪计数的正确性与可靠性。结果:发现流式细胞仪的计数范围是1×10~2~1×10~6,较之公认的计数范围1×10~4~5×10~5要宽,且流式细胞仪计数在1×10~3~1×10~6的相对标准偏差(RSD)基本在2%左右,最大不超过5%。在1×10~2误差在15%左右。同时,实验还探讨了流式细胞仪对异弯藻和塔胞藻的混合悬液(n(A)∶n(B)=3∶1或1∶3)的计数。不管塔胞藻与异弯藻以何种比例混合,混合液的理论浓度与实际由流式细胞仪计数的浓度都很相近。而且两种不同混合藻液的相对标准偏差小于3%。结论是流式细胞仪对活体微藻计数结果是可靠的。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

流式细胞仪计数论文参考文献

[1].杜建明.实时荧光定量PCR法与尿液流式细胞仪UF-1000i尿液细菌计数的比较研究[D].山西医科大学.2018

[2].熊忠亮,乔军晶.流式细胞仪在活体微藻计数中的应用[J].山东化工.2018

[3].丁珵,李霞,顾雯,张晓,丁培.利用流式细胞仪计数蓝氏贾第鞭毛虫和微小隐孢子虫方法的初探[J].中国预防医学杂志.2017

[4].李育芬,顾涛,李艳君.流式细胞仪测定HIV感染者CD4~+T淋巴细胞绝对计数的测量不确定度评定初探[J].中国卫生检验杂志.2015

[5].常正良,杨国锋.怎样用流式细胞仪对细胞计数[J].中学生物教学.2015

[6].李胜男,王秀娟,周建,孔繁翔,史小丽.利用流式细胞仪计数微型浮游生物的方法[J].湖泊科学.2015

[7].周更生,叶黎,杨胜利,李霞芳,曾亚莉.AlereT淋巴细胞计数仪与2种流式细胞仪检测CD4+T淋巴细胞绝对计数比较研究[J].预防医学情报杂志.2014

[8].吴晓文.应用流式细胞仪计数水体中的微藻[J].科技创新导报.2014

[9].柏春玲,董馨忆.应用流式细胞仪准确进行细胞计数的参数设定[J].昆明医科大学学报.2014

[10].董馨忆,柏春玲.流式细胞仪进样速度对细胞计数的影响[J].昆明医科大学学报.2013

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