黑色素瘤相关抗原Restin和转录因子ATF3相互作用效应的研究

黑色素瘤相关抗原Restin和转录因子ATF3相互作用效应的研究

论文摘要

Restin是1999年本校生物化学与分子生物学教研室在研究全反式维甲酸诱导细胞分化时克隆得到的一个未知功能的人类新基因,2001年,Chomez等通过同源序列筛选Genebank数据库,也发现了该基因,并命名为MAGE-H1,该基因主要表达于终末分化细胞。稳定转染该基因的细胞出现G1期阻滞,抑制细胞的增殖,提示Restin与细细胞周期的调控有关。但有关该基因的具体生物学功能研究还未见报道。 实验前期研究利用细胞双杂交技术,对Restin在细胞周期中可能的作用的转录因子(ATF3、ATF4、E2F6、C-JUN、C-FOS、p53)进行了双杂交筛选,结果发现ATF3与Restin表现出很强的相互作用。为了进一步验证ATF3与Restin的相互作用,对ATF3进行截短并构建了一系列ATF3的截短片段的双杂交质粒,再次运用细胞双杂交进行相互作用的探索。结果发现Restin与ATF3的确存在相互作用,并作用于ATF3的DNA结合结构域(ATF3 binding domain,ATF3/BD),不完整的ATF3/BD降低了Restin与ATF3相互作用能

论文目录

  • 缩略语表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 文献回顾
  • 正文
  • 1 第一部分:ATF3荧光报告系统的构建及活性检测
  • 1.1 实验材料和主要仪器
  • 1.2 实验方法
  • 1.3 实验结果
  • 1.4 讨论
  • 2 第二部分:Restin具有增强ATF3活性的效应
  • 2.1 实验材料和主要仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2.3 实验结果
  • 2.4 讨论
  • 3 第三部分:放射性标记Cyclin D1cDNA探针研究Restin及ATF3对Cyclin D1 mRNA表达的影响
  • 3.1 实验材料和主要仪器
  • 3.2 实验方法
  • 3.3 实验结果
  • 3.4 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 个人简历和研究成果
  • 致谢
  • 相关论文文献

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