罗仁牟文玉（四川省遂宁市蓬溪县人民医院检验科629100）
【中图分类号】R44【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）13-0400-03
【摘要】目的采用新成生物赛盟自免产品抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)与A厂家已批准上市的同类产品针对临床样本进行对比试验研究，验证新成生物赛盟自免产品与已上市产品等效。方法选择B医院2011年9月至2012年2月确诊为系统性红斑狼疮(SLE)患者55例和同期健康体检者59例，用新成生物赛盟自免产品与A厂家产品平行测定，观察其相关性。结果新成生物赛盟自免测定抗双链DNA抗体结果与A厂家测定结果作线性回归分析，相关系数R2=0.9683，相关性良好,两者无显著性差异(P>0.05)；同时作Kappa系数检验，Kappa系数=0.921，与A厂家试剂有高度一致性。结论新成生物赛盟自免产品抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)与A厂家已批准上市的产品具有等效性，能为临床医生提供可靠准确有价值的诊断指导依据。
【关键词】赛盟自免抗双链DNA抗体系统性红斑狼疮线性回归Kappa系数
ComparisonexperimentofMethodologyverifythattheproductequivalencestudy
ChenHong,Chenwei.(SichuanSinewBio-technologyCo.,Ltd，Sichuan611731)
【Abstract】objective:ComparationtheDiagnosticKitforAnti-dsDNAIgG（ELISA）ofXinchengSIMandasimilarmarketedproductofAmanufacturersbytestingtheclinicalsamples,toverifytheproductofXinchengSIMandAmanufacturershavebeenequivalent.Methods:OurchoiceinSeptemper2011toFebruary2012,whichdiagnosedwithsystemiclupuserythematosus(SLE)patients,55casesand59casesofhealthyperson.ParalleldeterminationtheproductofXinchengSIMandAmanufacturerstoobservethecorrelation.Results:UsingthelinearregressiontoestimatethedeterminationofXinchengSIMandAmanufacturers.Thedeterminationsofanti-dsDNAaregoodcorrelation(R2=0.9683).Thereisnotstatisticallysignificant(P>0.05).Atthesametime,theKappacoefficienttestshowsahighconsistencybetweenXinchengSIMandAmanufacturers(Kappacoefficient=0.921).Conclusion:TheDiagnosticKitforAnti-dsDNAIgG（ELISA）ofXinchengSIMandasimilarmarketedproductofAmanufacturershavebeenequivalent.Ircanprovideclinicianswithreliableandaccuratediagnosisofavaluablebasisforguiding.
【Keywords】SIMAnti-dsDNAantibodySystemicLupusErythematosusLinearregressionKappacoefficient
抗双链DNA抗体是系统性红斑狼疮(SystemicLupusErythematosus简称SLE)的特异性抗体，其抗体效价与病情相关，因而，SLE患者需定期并定量测定抗双链DNA抗体，有助于判断病情。抗双链DNA抗体阳性通常预示着SLE患者将会病情加重或多器官受累，严重的常提示已有或将有肾脏和中枢神经系统的受累[1]。酶联免疫吸附法(EnzymelinkedImmunosorbentAssay简称ELISA)作为一个可定量的方法，特异性和敏感性均较高，重复性好，且操作简便易于自动化，是临床上检测自身抗体常用方法[2]。本研究通过新成生物赛盟自免的抗双链DNA抗体(酶联免疫吸附法)试剂盒与A厂家已批准上市的产品，测定不同病期的SLE患者的血清中抗双链DNA抗体浓度水平，探究两者产品是否具有等效性，以便临床应用，现报告如下。
1.材料与方法
1.1样本资料根据1997年美国风湿病协会修订的SLE诊断标准[3],选择B医院2011年9月至2012年2月确诊为SLE的患者55例作为SLE组，其中女42例、男13例,年龄(20～55)岁。同时选取同期健康体检者59例作为对照组,女30例、男29例,年龄(18～50)岁,均无高血压、糖尿病、肾脏基础及其他内分泌系统疾病。
1.2样本收集清晨空腹同时取SLE组患者和对照组体检者的静脉血5ml，经低速离心转速为3500转/min离心10min，收集血清置于2～8℃保存待测。
1.3检测方法严格按照厂家说明书操作规程进行实验。
1.4试剂与仪器新成生物赛盟自免产品抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)，A厂家生产的抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)，仪器均采用ThermoMultiskanMK3酶标仪。
1.5统计学处理各组数据均采用SPSS17.0统计软件进行独立样本t检验分析，以P<0.05差异有显著性；组间进行Kappa系数检验，Kappa系数>0.81时，表示组间数据具有高度一致性。
1.6操作人员要求对参与人员进行专业上岗培训并且取得相应上岗证的医学检验专业人员。
2.结果
两个厂家对SLE组与对照组血清抗双链DNA抗体检测的结果比较[n(概率%)]，如表1、表2、表3所示。
表1新成生物赛盟自免在两组中抗双链DNA抗体的检出率
注：与对照组比较☆P<0.05，
表2A厂家在两组中抗双链DNA抗体的检出率
注：与对照组比较☆P<0.05，
表3新成生物赛盟自免与A厂家
注：当0.81≤kappa系数≤1.00时，证明两个试剂测定结果具有高度一致性；当0.61≤kappa系数＜0.81时，证明两个试剂测定结果具有中度一致性；当0.41≤kappa系数＜0.61时，证明两个试剂测定结果间一致性较弱；当0.21≤kappa系数＜0.41时，证明两个试剂测定结果间一致性微弱；当0.00≤kappa系数＜0.21时，证明两个试剂测定结果间一致性极差。
3.讨论
系统性红斑狼疮(SLE)是自身免疫性疾病的原型，以青年妇女多见，发病高峰在15-40岁生育期，但婴儿与老年人也可发病。其具有复杂的免疫学异常，以产生多种自身抗体为其免疫学特点，临床表现多样化，病变可侵犯皮肤、关节、肾脏、浆膜等多系统、多脏器。其病因常不明，可能和遗传、激素、环境、感染、药物、免疫调节因素等多种因素有关[4]。抗双链DNA抗体在SLE的发病中起重要作用，被认为是SLE的特异性抗体，已被美国风湿学会(ACR)列为诊断标准之一。当体内抗体与dsDNA结合形成的免疫复合物存留在循环中或沉积在组织局部时，后者激活补体导致炎症性损伤，引起SLE。此外抗双链DNA抗体还可能与组织结构蛋白如肾小球基底膜中的硫酸乙酰肝素结合，引起基底膜损伤标准[5]。
抗双链DNA抗体效价与疾病的活动程度有相关性，抗体效价的动态测定为监控治疗提供了有效的实验室手段。在SLE伴肾脏症状中阳性率为95%，活动性SLE不伴肾脏症状中阳性率为50-70%，非活动性SLE阳性率小于40%[6]。
抗dsDNA抗体也可见于类风湿关节炎、干燥综合征、硬皮病和自身免疫性肝炎等，但通常阳性率较低，d滴度也较低。正常健康人中很少出现(<0.1%)[7]。
从试验研究结果中，可以得出，新成生物赛盟自免产品抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)与A厂家生产的抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)测定血清抗双链DNA抗体，其结果做线性回归，R2=0.9683，相关性良好；经Kappa系数检验，Kappa系数=0.921，其值大于0.81，说明两个试剂测定结果具有高度一致性。综上所述，新成生物赛盟自免的抗双链DNA抗体(酶联免疫吸附法)试剂盒与A厂家已批准上市的产品具有等效性，能为临床医生提供可靠准确有价值的诊断指导依据。
参考文献
[1]牟方祥，周小林.抗双链DNA抗体四种检测方法的比较及临床应用[J].局解手术学杂志,2012,21(1):22-23.
[2]王兰兰.自身抗体检测的应用于质量保障原则[J].中华检验医学杂志，2005，28(10):987-990.
[3]HochbergMC.UpdatingtheAmericanCollegeofRheumatologyrevisedcriteriafortheclassificationofsystemiclupuserythematosus[J].ArthritisRheum,1997,40（1）：1725.
[4]蒋明，张奉春.风湿病诊断与诊断评析[M].上海：科学技术出版社，2004：109.
[5]李玉刚，李兴达，李磊.四种自身抗体联检对SLE诊断的临床价值[J].放射免疫学杂志,2010,23(5):571-573.
[6]BrinkmanK，TermaatR-M,BerdenJH,etal.Anti-DNAantibodiesandlupusnephritis:thecomplexityofcross-reactivity.ImmunolToday,1990,11:232-234.
[7]仲人前，范列英.自身抗体基础与临床[M].北京：人民军医出版社，2006:12-16.