免疫性血小板减少症MIF和FKBP5的表达与激素抵抗相关性的研究

免疫性血小板减少症MIF和FKBP5的表达与激素抵抗相关性的研究

论文摘要

目的:探讨初治免疫性血小板减少症(ITP)患者巨噬细胞移动抑制因子(Macrophagemigration inhibitory factor,MIF)表达与糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)抵抗的关系。方法:收集2009年2月—2012年11月大连医科大学附属第一医院,大连210医院血液科住院初治ITP患者90例(女性56例,男性34例),所有患者均采用GC治疗,根据GC疗效分为敏感组60例(女性36例,男性24例),抵抗组30例(女性20例,男性10例),通过实时荧光定量RT-PCR SYBR Green染料法检测敏感组和抵抗组患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)MIF的mRNA表达,采用ELISA方法检测敏感组和抵抗组患者血浆中MIF的蛋白表达,比较组间差异。所有数据采用平均数±标准差表示,应用SPSS13.0统计软件分析试验结果。组间比较采用t检验,P<0.05认为具有统计学意义。结果:1.激素抵抗组ITP患者外周血单个核细胞MIF的mRNA表达(28.71±5.97)高于激素敏感组ITP患者(27.19±6.30),但两组无统计学意义(P>0.05)。激素抵抗组ITP患者血浆中MIF的蛋白表达(13.96±6.15)也高于激素敏感组ITP患者(12.82±5.54),两组相比无统计学意义(P>0.05)。2.根据性别,年龄,病情,病程分组比较,激素抵抗组ITP患者外周血单个核细胞MIF的mRNA表达与激素敏感组相比较有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。3.根据性别,年龄,病情,病程分组比较,激素抵抗组ITP患者外周血单个核细胞MIF的蛋白表达与激素敏感组相比较有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论:与激素敏感组ITP患者相比,激素抵抗组ITP患者MIF基因mRNA水平和蛋白水平均有升高趋势,但无显著性差异,推测MIF的表达可能与ITP患者GC抵抗无密切相关。背景及目的:糖皮质激素(GC)是治疗免疫性血小板减少症(ITP)的主要药物。然而,经过3个月的标准治疗后,临床上少数患者对GC治疗反应很差或者无反应,称为GC抵抗。GC抵抗是临床治疗上的难题,而GC抵抗的分子机制仍不明确。FKBP5蛋白,作为HSP90的分子伴侣,具有调节GC受体敏感性的作用。研究发现FKBP5的基因多态性(rs1360780)在与应激有关的精神病中能调节激素的敏感性。本研究目的调查FKBP5基因多态性与ITP患者GC疗效的关系,探讨ITP患者GC抵抗的可能机制。方法:搜集212个ITP患者和110个健康志愿者,其中激素抵抗患者55名,激素敏感ITP患者157名。测定FKBP5单核甘酸多态位点rs1360780,应用实时荧光定量PCR和cycling探针技术进行基因分型,分析FKBP5基因多态位点等位基因及单倍体在ITP患者和健康对照组中的表达,探讨该基因与ITP患者激素疗效的关系。数据分析使用SPSS13.0软件,组间比较使用卡方检验。结果:1. FKBP5rs1360780位点各基因型在ITP患者组和对照组中的分布符合遗传平衡规律。2.激素敏感ITP患者的CC,CT,和TT的基因型频率分别是:53%,43%,4%, C和T等位基因频率分别是:75%,25%。;正常对照组的CC, CT,和TT的基因型频率分别是:59%,36%,5%, C和T等位基因频率分别是:77%,23%;二组间各基因型(P=0.40)及等位基因(P=0.62,OR=1.13,95%CI=0.76-1.70)相比较无显著性差异。3.激素抵抗ITP患者的CC, CT,和TT的基因型频率分别是:59%,39%,2%, C和T等位基因频率分别是:78%,22%;正常对照组相比,二组间各基因型(P=0.51)及等位基因频率(P=0.89,OR=0.92,95%CI=0.53-1.60)无显著性差异。4.与激素敏感ITP患者相比较,激素抵抗ITP患者的基因型频率(P=0.67)和等位基因频率(P=0.52,OR=1.23,95%CI=0.73-2.06)无显著性差异。结论:1. FKBP5rs1360780位点基因各基因型在ITP组和正常对照组中的分布符合哈迪-温伯格遗传平衡定律;2. FKBP5rs1360780位点多态性可能与ITP患者GC疗效无关联。背景及目的:糖皮质激素(GC)是治疗免疫性血小板减少症(ITP)的主要药物。然而,经过标准治疗后,临床上大约10-30%的患者对激素治疗反应很差或者无反应,称为糖皮质激素抵抗。研究发现FKBP51的过度表达和FKBP52的低表达能影响GC的免疫抑制作用。本实验目的是探讨初治免疫性血小板减少症(ITP)患者FKBP51和FKBP52的mRNA表达与糖皮质激素抵抗的关系。方法:收集于2009年2月—2012年11月大连医科大学附属第一医院,大连210医院血液科住院初治ITP患者90例(女性56例,男性34例),所有患者均首选GC治疗,根据GC疗效分为敏感组60例(女性36例,男性24例),抵抗组30例(女性20例,男性10例),通过实时荧光定量RT-PCR SYBR Green染料法检测敏感组和抵抗组患者外周血单个核细胞FKBP51和FKBP52的mRNA表达,比较组间差异。结果:1.激素抵抗组ITP患者外周血单个核细胞FKBP51的mRNA表达(26.20±5.18)与激素敏感组ITP患者(27.80±5.99)相比,无统计学意义(P>0.05)。激素抵抗组ITP患者血浆中FKBP52的mRNA表达(17.35±4.96)与激素敏感组ITP患者(18.82±5.54)相比,无统计学意义(P>0.05)。2.根据性别,年龄,病情,病程分组比较,激素抵抗组ITP患者外周血单个核细胞FKBP51的mRNA表达与激素敏感组相比较有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。3.根据性别,年龄,病情,病程分组比较,激素抵抗组ITP患者外周血单个核细胞FKBP52的mRNA表达相与激素敏感组比较有降低趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论:1.与激素敏感组ITP患者相比,激素抵抗组ITP患者FKBP51的mRNA表达与激素敏感组相比较虽有升高趋势,但均无显著性差异,推测FKBP51的mRNA表达可能与ITP患者GC抵抗无关。2.与激素敏感组ITP患者相比,激素抵抗组ITP患者FKBP52的mRNA表达与激素敏感组相比较虽有降低趋势,但均无显著性差异,推测FKBP52的mRNA表达可能与ITP患者GC抵抗无关。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一部分 免疫性血小板减少症 MIF 的表达与激素抵抗相关性的研究
  • (一) 前言
  • (二) 材料和方法
  • 1. 实验对象与分组
  • 2. 外周血单个核细胞的分离
  • 3. 总 RNA 提取
  • 4. Real-time RT PCR 反应
  • 5. ELISA 检测血清 MIF 细胞因子
  • 6. 统计学分析
  • (三) 结果
  • 1. 所有 ITP 患者激素抵抗组与敏感组中 MIF 的 mRNA 和蛋白表达
  • 2. 各亚组患者 MIF 的 mRNA 表达差异
  • 3. 各亚组患者 MIF 的蛋白表达差异
  • (四) 讨论
  • (五) 结论
  • (六) 参考文献
  • 第二部分 FKBP5 的基因多态性与免疫性血小板减少性症(ITP) 患者激素疗效的相关性研究
  • (一) 前言
  • (二) 材料和方法
  • 1. 实验对象
  • 2. 外周血单个核细胞的分离
  • 3. 总 DNA 提取
  • 4. Real-time RT PCR 反应
  • 5. 统计学分析
  • (三) 结果
  • 1. 对 ITP 患者和正常健康组进行哈迪-温伯格定律平衡分析
  • 2. FKBP5 rs1360780 位点基因型在 ITP(GC-S) 组和正常对照组中分布特征
  • 3. FKBP5 rs1360780 位点基因型在 ITP(GC-R) 组和正常对照组中分布特征
  • 4. FKBP5 rs1360780 位点基因型在 ITP(GC-R) 组和 ITP(GC-S) 中分布特征
  • (四) 讨论
  • (五) 结论
  • (六) 参考文献
  • 第三部分 免疫性血小板减少症患者 FKBP51 和 FKBP52 的mRNA 表达与激素抵抗相关性的研究
  • (一) 前言
  • (二) 材料和方法
  • 1. 实验对象与分组
  • 2. 外周血单个核细胞的分离,总 RNA 提取和 cDNA 合成
  • 3. Real-time RT PCR 反应
  • 4. 统计学分析
  • (三) 结果
  • 1. 所有 ITP 患者激素抵抗组与敏感组中 FKBP51 和 FKBP52的mRNA表达
  • 2. 各亚组患者 FKBP51 的 mRNA 表达差异
  • 3. 各亚组患者 FKBP52 的 mRNA 表达差异
  • (四) 讨论
  • (五) 结论
  • (六) 参考文献
  • 综述
  • 参考文献
  • 英文缩写和代码
  • 作者简介
  • 攻读学位期间发表论文情况
  • 致谢
  • 相关论文文献

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