降钙素基因相关肽在创伤性脑损伤加速骨折愈合机制中的作用

论文摘要

背景:创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）后骨折愈合加速是临床上常见的现象。然而,这种现象发生的机制至今尚未阐明。有文献报道TBI发生后,血清中诸多生长因子和活性多肽类物质表达上调或下降。降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）是神经系统分泌的重要因子,在脑损伤后,分泌明显增加。同时,最近研究发现CGRP具有较强的促进成骨能力。因此,我们认为CGRP可能在TBI加速骨折愈合中具有重要作用。为验证创伤性脑损伤后血清中CGRP水平变化可加强骨折愈合的假设,我们通过建立标准的股骨中段闭合骨折模型及重复性好的脑损伤模型,观察骨折愈合速度及检测血清、脑组织和骨折周围肌肉组织的CGRP表达变化,分析CGRP在TBI加速骨折愈合机制中的作用。实验一新型大鼠闭合骨折模型的建立及评价目的:通过制作一种打击器,建立标准大鼠股骨闭合骨折模型。方法:对Sprague-Dawley大鼠左侧股骨逆行髓内克氏针内固定,然后使用自行设计的落体打击器制作股骨中段闭合骨折,分别于骨折后1、4、8周处死大鼠取股骨标本,通过X线、组织学检查评价骨折类型、移位程度以及骨折的愈合情况。结果:术后X线证实无明显移位的横行或短斜型骨折占总例数的86.1 %。组织学检查显示骨折呈典型的二期愈合过程。结论:通过自行设计的打击器制作的闭合骨折符合标准闭合骨折模型的要求。实验二创伤性脑损伤大鼠动物模型及其评价体系的建立目的:建立一种创伤性脑损伤动物模型及相关评价体系。方法:应用自行设计制造的自由落体撞击装置建立大鼠创伤性脑损伤模型,观察大鼠脑损伤后生命体征和病理学改变,并通过神经功能量表进行功能评分。结果:TBI后,Sprague-Dawley大鼠均出现明显的生命体征改变,包括立即短暂的呼吸暂停,随即逐渐恢复至正常呼吸频率等。TBI后6小时,出现明显的脑损伤病理改变。TBI后12小时,神经功能量表分析结果表明TBI后小脑、脑干和大脑皮质功能显著改变。结论:本体系可用于建立和评价TBI大鼠模型。实验三降钙素基因相关肽在脑损伤合并骨折愈合中的作用目的:通过建立标准的股骨闭合骨折模型及创伤性脑损伤模型,分析CGRP在TBI合并骨折愈合中的作用。方法:制作Sprague-Dawley大鼠标准股骨中段闭合骨折模型,其中部分大鼠接受TBI,该闭合脑损伤和弥漫性轴索损伤患者受到损伤相似。在术后4周和8周处死大鼠取材股骨,行显微CT比较骨折愈合速度。取材不通时间点血清、脑组织及骨折周围肌肉组织分别行ELISA、免疫组织化学、免疫蛋白印迹和RT-PCR检测CGRP水平变化。结果:显微CT结果表明TBI合并骨折组骨折愈合和矿化早于单纯骨折组。骨折后1周,ELISA检测表明TBI合并骨折组血清中CGRP明显升高（P<0.05）,免疫组织化学、免疫蛋白印迹和RT-PCR分别检测表明TBI合并骨折组表明脑组织和骨折周围肌肉组织中CGRP显著升高,而在其他实验组未发现此变化。结论:上述结果证明TBI后骨折愈合加强。我们的实验结果进一步表明这种愈合加强的机制和受损伤脑组织释放入血的高水平CGRP有关。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 实验一 新型大鼠闭合骨折模型的建立及评价
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验二 创伤性脑损伤大鼠动物模型及其评价体系的建立
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验三 降钙素基因相关肽在脑损伤合并骨折愈合中的作用
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢