论文摘要
引导骨再生（Guided bone regeneration，GBR）技术已广泛应用于口腔种植修复领域，选择良好的GBR膜是该技术成功的关键因素之一。本研究通过体外细胞实验，探索载银纳米羟基磷灰石-二氧化钛／聚酰胺66（Ag-nHA-nTiO2／PA66）抗菌复合膜对成骨样细胞增殖及黏附的影响，考察其生物安全性，为临床实验提供实验依据。本研究以新近研制成功的国产Ag-nHA-nTiO2／PA66生物膜为实验组，nHA／PA66膜及膨体聚四氟乙烯膜（Expanded Polytetrafluoroethylene，e-PTFE）为对照组，采用扫描电镜和光学显微镜分别观察三组膜的结构，且在膜上接种MG63成骨样细胞并设空白对照，MTT法检测MG63成骨样细胞的增殖曲线，CVA检测细胞增殖活力，酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP）的活力和细胞基质钙离子的含量。扫描电镜（Electron microscope，SEM）观察细胞在膜上接种后的第一天和第五天的粘附及增殖情况。结果显示，Ag-nHA-nTiO2／PA66膜分为正面和反面，正面为大孔结构，形态不规则，直径50～300um，孔穴内可见纳米羟基磷灰石晶体沉积其中；而其反面比较光滑，结构致密，有散在的小孔微结构，形态一般为圆形，直径约2-10um。nHA／PA66膜的结构与Ag-nHA-nTiO2／PA66膜的结构基本一致。e-PTFE膜正反面结构相同，由成行排列，大小不一的长椭圆形的裂隙组成，长约15um，宽约3-5um。在光学显微镜下，Ag-nHA-nTiO2／PA66复合生物膜的横截面结构正面的大孔隙相互联通，构成三维支架样结构，而反面则是较致密的结构：nHA／PA66膜结构与实验组大致相同；e-PTFE膜的横截面结构正反两面的孔隙大小相当，且相互交通。MTT检测结果显示，成骨样细胞在Ag-nHA-nTiO2／PA66膜、nHA／PA66膜和e-PTFE膜上的生长均有增殖趋势，两组间无统计学差异（P＞0.05）。CVA检测的结果显示，Ag-nHA-nTiO2／PA66复合膜的细胞活力度与对照组有统计学差异（P＜0.05），实验组的活力度小于对照组，三组间的ALP活性和钙离子含量无显著性差异（P＞0.05）。SEM观察结果表明，细胞在三种膜上粘附及增殖情况良好，MG63成骨样细胞在Ag-nHA-nTiO2／PA66膜和nHA／PA66膜上的粘附效果则更好，其伸展更充分。体外细胞实验的结果表明，Ag-nHA-nTiO2／PA66膜对MG63细胞生长没有抑制作用，e-PTFE膜其具有更优良的空间微结构和生物学性能。