水体Cd2+对中华绒螯蟹卵巢发育和生殖内分泌的影响

论文摘要

随着工农业生产的发展,大量的Cd2+进入水体环境,并可通过呼吸道、消化道、体表渗透等途径进入虾蟹体内并不断累积,对器官、系统产生毒性影响,造成畸变甚至死亡。目前有关Cd2+对生殖内分泌的研究主要集中在哺乳动物,对虾蟹生殖内分泌毒性效应的研究较少。本论文在研究了中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）卵黄发生过程中卵母细胞、滤泡细胞超微结构的变化和cd2+对中华绒螯蟹急性实验的基础上,进一步研究了Cd2+对中华绒螯蟹眼柄神经分泌细胞和卵巢发育的影响,并对影响卵巢发育的机制进行了初步探讨。结果如下：卵黄蛋白的合成从卵原细胞时期已经开始。卵黄发生初期,滤泡细胞向外伸出许多突起,卵母细胞表面可见微胞饮现象,胞质中形成卵黄蛋白的细胞器主要是内质网。卵黄大量合成时期滤泡细胞上的突起消失,卵母细胞表面出现大量微绒毛和微吞饮凹,胞内内质网、线粒体、高尔基体等都积极参与形成卵黄蛋白。卵黄蛋白合成晚期,滤泡细胞逐渐解体,卵黄膜形成,卵黄膜上有多条通道。Cd2+对中华绒螯蟹幼蟹的急性毒性实验显示,96h的半致死浓度LC50为5.348mg／L。在Cd2+浓度为6.310 mg／L的水体中暴露96h,导致其神经分泌细胞的质膜和核膜加厚或褶皱变形、断裂。0.5 mg／LCd2+暴露12 d,中华绒螯蟹的卵巢系数和卵母细胞直径显著小于对照组,卵巢中卵黄蛋白的含量也小于对照组,进一步观察发现,Cd2+导致卵母细胞核出现浓缩变形,细胞质内的内质网囊泡严重肿胀变形、相互融合,囊泡内部的电子密度降低或空泡化,并在细胞质内观察到溶酶体的出现。处于生殖上皮中卵原细胞的细胞核外膜褶皱变形,核内物质发生高度浓缩。而且Cd2+导致血淋巴中性腺抑制激素（GIH）和孕酮水平升高,雌二醇水平降低。因此,Cd2+抑制了中华绒螯蟹卵巢的发育,一方面可能是Cd2+对卵母细胞的细胞器造成损伤从而干扰了卵黄蛋白的合成。另一方面可能是Cd2+刺激GIH的释放,并干扰血淋巴中孕酮向雌二醇的转化,进而抑制卵巢的发育。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 研究目的和意义
• 1.2 十足目甲壳动物的卵巢发育及激素调控
• 1.2.1 十足目甲壳动物卵巢发育的组织学
• 1.2.2 十足目甲壳动物的卵子发生
• 1.2.2.1 卵子发生的过程
• 1.2.2.2 卵子发生中的物质积累
• 1.2.3 卵巢发育的激素调控
• 1.3 重金属对虾蟹毒性研究进展
• 1.3.1 重金属对虾蟹的急性毒性试验
• 1.3.2 重金属在虾蟹体内的积累与分布
• 1.3.3 重金属对抗氧化酶的损伤
• 1.3.4 重金属对虾蟹组织细胞结构的影响
• 1.3.5 重金属对虾蟹内分泌的影响
• 1.3.6 重金属对虾蟹卵巢发育的影响及及其机理
• 1.3.6.1 重金属对卵巢发育的影响
• 1.3.6.2 重金属对卵巢发育影响的机制
• 第2章 中华绒螯蟹卵子发生中卵母细胞和滤泡细胞超微结构的变化
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 仪器
• 2.2.3 方法
• 2.3 结果
• 2.3.1 卵原细胞期
• 2.3.2 卵黄发生初期
• 2.3.3 卵黄大量合成时期
• 2.3.4 卵黄蛋白合成晚期
• 2.4 讨论
• 2.4.1 卵黄发生的过程
• 2.4.2 滤泡细胞的迁移和功能
• 2.4.3 参与卵黄蛋白合成的细胞器
• 2.4.3.1 环状片层体参与卵黄蛋白的形成
• 2.4.3.2 内质网、线粒体和高尔基体参与卵黄蛋白的形成
• 2+对中华绒螯蟹的急性致毒研究'>第3章 Cd²⁺对中华绒螯蟹的急性致毒研究
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料
• 3.2.2 仪器
• 3.2.3 方法
• 3.2.3.1 试验溶液的配置
• 2+对中华绒螯蟹96h半致死浓度'>3.2.3.2 Cd²⁺对中华绒螯蟹96h半致死浓度
• 2+对视神经节神经分泌细胞超微结构的影响'>3.2.3.3 Cd²⁺对视神经节神经分泌细胞超微结构的影响
• 3.3 结果
• 3.3.1 96h半致死浓度
• 2+对神经分泌细胞超微结构的影响'>3.3.2 Cd²⁺对神经分泌细胞超微结构的影响
• 3.4 讨论
• 2+的半致死浓度'>3.4.1 Cd²⁺的半致死浓度
• 2+对中华绒螯蟹视神经分泌细胞的影响'>3.4.2 Cd²⁺对中华绒螯蟹视神经分泌细胞的影响
• 2+致毒机理'>3.4.3 Cd²⁺致毒机理
• 2+对中华绒螯蟹卵巢发育的影响'>第4章 Cd²⁺对中华绒螯蟹卵巢发育的影响
• 4.1 引言
• 4.2 材料和方法
• 4.2.1 材料
• 4.2.2 仪器
• 4.2.3 方法
• 4.2.3.1 卵巢指数的计算
• 4.2.3.2 卵母细胞直径的测定
• 4.2.3.3 卵黄蛋白的电泳分析
• 4.2.3.4 卵巢超微结构的观察
• 4.3 结果
• 2+对卵巢指数和卵母细胞生长的影响'>4.3.1 Cd²⁺对卵巢指数和卵母细胞生长的影响
• 2+对卵黄蛋白积累的影响'>4.3.2 Cd²⁺对卵黄蛋白积累的影响
• 2+对卵巢超微结构的影响'>4.3.3 Cd²⁺对卵巢超微结构的影响
• 4.4 讨论
• 4.4.1 实验用蟹的选择
• 2+对卵巢发育的影响'>4.4.2 Cd²⁺对卵巢发育的影响
• 2+对卵巢超微结构的影响'>4.4.3 Cd²⁺对卵巢超微结构的影响
• 2+对调控卵巢发育的部分激素水平的影响'>第5章 Cd²⁺对调控卵巢发育的部分激素水平的影响
• 5.1 引言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 材料
• 5.2.2 仪器
• 5.2.3 方法
• 5.2.3.1 中华绒螯蟹GIH的分离与注射
• 5.2.3.2 血淋巴中GIH水平的半定量分析
• 5.2.3.3 血淋巴中雌二醇和孕酮水平的测定
• 5.3 结果
• 2+对血淋巴中GIH水平的影响'>5.3.1 Cd²⁺对血淋巴中GIH水平的影响
• 2+对血淋巴孕酮水平的影响'>5.3.2 Cd²⁺对血淋巴孕酮水平的影响
• 2+对血淋巴中雌二醇水平的影响'>5.3.3 Cd²⁺对血淋巴中雌二醇水平的影响
• 5.4 讨论
• 2+对血淋巴中GIH水平的影响'>5.4.1 Cd²⁺对血淋巴中GIH水平的影响
• 2+对血淋巴中孕酮和雌二醇水平的影响'>5.4.2 Cd²⁺对血淋巴中孕酮和雌二醇水平的影响
• 第6章 结语
• 参考文献
• 图版及图版说明
• 致谢
• 在研期间发表的论文