六氯苯和镉（Ⅱ）作用下鱼肝线粒体酶和蛋白质差异表达研究

论文摘要

目前有关持久性生物累积性有毒污染物（PBT）对生物体的毒性作用及机理是人们关心的重要课题。由于线粒体具有其特殊的结构和功能,是污染物毒性作用的主要靶标之一,因而受到了越来越多的关注。为此,本论文采用体外染毒方式,探讨了六氯苯和镉（Ⅱ）两种化学污染物对鲫鱼肝脏线粒体的毒性作用机制。具体研究内容如下: （1）研究了六氯苯对鱼肝线粒体中两种主要抗氧化酶（SOD、GSH-Px）及丙二醛（MDA）含量的影响。结果表明,线粒体SOD和GSH-Px活性及同工酶表达量被低浓度六氯苯激活,但被高浓度六氯苯显著抑制,GSH-Px同工酶中的gsh3被高浓度六氯苯完全抑制。在较低浓度六氯苯作用下,线粒体中MDA含量变化不明显,但高浓度六氯苯导致线粒体中MDA含量显著增加。 （2）研究了六氯苯对鱼肝线粒体中两种主要能量代谢酶(COX、Ca2+-ATPase)同工酶的影响。结果表明,线粒体COX同工酶被低浓度六氯苯激活,但被高浓度六氯苯抑制,其中cox1被高浓度六氯苯完全抑制。Ca2+-ATPase同工酶的表达量随着六氯苯浓度的增加逐渐减弱直至受到显著抑制。其中Ca2+-ATPase2,Ca2+-ATPase3被高浓度六氯苯完全抑制。 （3）研究了六氯苯对鲫鱼肝线粒体蛋白质表达的影响。结果表明,随着六氯苯浓度的增加,线粒体蛋白质条带数先增加后减少。低浓度六氯苯作用下,线粒体表达出应激蛋白（多肽a）;多肽b的表达量随着六氯苯浓度的增加逐渐减少,直至消失。 （4）研究了Cd2+对鲫鱼肝线粒体中两种主要抗氧化酶（SOD、GSH-Px）及丙二醛（MDA）含量的影响。结果表明,线粒体SOD和GSH-Px活性及同工酶表达量随着Cd2+浓度的增加逐渐减弱,直至受到显著抑制。同时,GSH-Px同工酶中的gsh3被高浓度Cd2+完全抑制。线粒体中MDA含量随着Cd2+浓度的增加逐渐上升,高浓度Cd2+导致线粒体中MDA含量有极显著增加。 （5）研究了Cd2+对鲫鱼肝线粒体中两种主要能量代谢酶(COX、Ca2+-ATPase)同工酶的影响。结果表明,在低浓度Cd2+作用下,线粒体COX同工酶表达量变化不明显,但高浓度Cd2+六氯苯抑制COX同工酶的表达,其中出现特异性的同工酶cox3,cox5。Ca2+-ATPase同工酶的表达量随着Cd2+浓度的增加逐渐减弱。 （6）研究了Cd2+对鲫鱼肝线粒体蛋白质表达的影响。结果表明,随着Cd2+浓度的增加,分子量大于66.2kDa的蛋白质的表达量逐渐减少;而分子量低于66.2kDa的蛋白质其表达量先增加,后显著减少。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1 PBT研究进展
• 1.1 PBT的种类
• 1.2 PBT的污染特性
• 1.3 PBT的生物毒性
• 1.4 PBT生物毒性效应分子机制
• 1.5 六氯苯的生物毒性
• 1.6 镉的生物毒性
• 2 化学污染物对线粒体损伤机制研究进展
• 2.1 线粒体的结构、组成及功能
• 2.2 化学污染物对线粒体损伤的分子机制
• 3 本论文研究思路
• 第一部分 六氯苯作用下鱼肝线粒体酶及蛋白质差异表达研究
• 第二章 六氯苯对鱼肝线粒体抗氧化酶作用及脂质过氧化研究
• 1 实验部
• 1.1 实验药品与仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 六氯苯作用下鱼肝线粒体抗氧化酶活性及MDA含量变化
• 2.2 六氯苯作用下鱼肝线粒体SOD和GSH-Px同工酶谱
• 2.3 讨论
• 3 结论
• 第三章 六氯苯作用下鱼肝线粒体能量代谢酶的同工酶分析
• 1 实验部分
• 1.1 实验药品与仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2+-ATPase同工酶谱'>2.1 六氯苯作用下鱼肝线粒体COX和Ca²⁺-ATPase同工酶谱
• 2.2 讨论
• 3 结论
• 第四章 六氯苯作用下鱼肝线粒体蛋白质差异表达研究
• 1 实验部分
• 1.1 实验药品与仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 六氯苯作用下鱼肝线粒体蛋白质差异表达
• 2.2 讨论
• 3 结论
• 第二部分 镉（Ⅱ）作用下鱼肝线粒体酶及蛋白质差异表达研究
• 第五章 镉（Ⅱ）对鱼肝线粒体抗氧化酶作用及脂质过氧化研究
• 1 实验部分
• 1.1 实验药品与仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2+作用下鱼肝线粒体SOD和GSH-Px活性及MDA含量变化'>2.1 Cd²⁺作用下鱼肝线粒体SOD和GSH-Px活性及MDA含量变化
• 2+作用下鱼肝线粒体SOD和GSH-Px的同工酶谱'>2.2 Cd²⁺作用下鱼肝线粒体SOD和GSH-Px的同工酶谱
• 2.3 讨论
• 3 结论
• 第六章 镉（Ⅱ）作用下鱼肝线粒体能量代谢酶的同工酶分析
• 1 实验部分
• 1.1 实验药品与仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2+作用下鱼肝线粒体COX和Ca²⁺-ATPase同工酶谱'>2.1 Cd²⁺作用下鱼肝线粒体COX和Ca²⁺-ATPase同工酶谱
• 2.2 讨论
• 3 结论
• 第七章 镉（Ⅱ）作用下鱼肝线粒体蛋白质差异表达研究
• 1 实验部分
• 1.1 实验药品与仪器
• 1.2 实验方法
• 2 结果与讨论
• 2+作用下鱼肝线粒体蛋白质差异表达'>2.1 Cd²⁺作用下鱼肝线粒体蛋白质差异表达
• 2.2 讨论
• 3 结论
• 总结
• 参考文献
• 附录
• 致谢