大花蕙兰离体培养及其快繁技术的研究

论文摘要

本文主要研究了大花蕙兰‘福神’品种（Cymbidium hybridium‘Fuku NoKami’）组织培养过程中的几个关键性技术问题。以其茎尖、假鳞茎和幼嫩花梗段为外植体,着重研究了影响原球茎诱导、增殖、原球茎芽萌发、生根的几个主要因素以及控制褐变途径等问题,旨在提高诱导成苗率和繁殖速率,降低成本,建立了一套经济、高效的快繁技术体系,为大花蕙兰的工业化育苗提供了技术参考依据。主要的研究结果如下:1、采用无机盐、蔗糖和植物激素的不同浓度配比以及不同培养方式等对大花蕙兰原球茎的诱导、增殖、原球茎芽萌发、生根的影响进行试验。结果表明:①对原球茎诱导培养,最适基本培养基为MS,激素配比采用NAA 0.2 mgL-1+6-BA 1.0mg L-1诱导效果最好。②对原球茎增殖培养,最适基本培养基为2MS,蔗糖选用20g L-1,激素配比采用NAA0.2mg L-1和6-BA0.5mg L-1,以液体悬浮培养增殖效果好。③对原球茎芽萌发培养,最适基本培养基为1/2MS,蔗糖选用10g L-1,激素配比采用NAA0.4mg L-1和6-BA0.5mg L-1,以固体培养芽萌发率高。④对生根培养,最适基本培养基为1/4MS,蔗糖选用40g L-1,激素采用NAA0.2mg L-1,以固体培养生根率高。2、褐变的控制:①假鳞茎切块和花梗切段褐变严重,选用茎尖褐变较轻。②在MS、改良MS和1/2MS三种培养基中,以无机盐浓度较低的1/2 MS培养基、采用液体培养方式抑褐效果最好;但分化率差异不大,采用固体培养的材料,其分化率略高于液体培养。③在培养基中加入聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、硫代硫酸钠、活性炭和维生素C,均能减轻褐变程度,其中以500mg L-1PVP效果最好。④对褐变严重的外植体,进行接种前的抑褐剂预处理是有必要的,本试验中以PVP(2g L-1)和硫代硫酸钠(2g L-1)预处理20 min效果较好。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略语表
• 1 前言
• 1.1 植物组织培养的概念及应用价值
• 1.1.1 植物组织培养概念
• 1.1.2 植物组织培养的应用与意义
• 1.2 兰花组织培养的研究进展
• 1.2.1 国内外兰花组培研究概况
• 1.2.2 兰花组织培养的优点
• 1.2.3 培养基对组织培养的调控
• 1.2.3.1 糖含量
• 1.2.3.2 植物激素
• 1.2.4 褐变现象
• 1.3 大花蕙兰概况
• 1.3.1 大花蕙兰生物学特性
• 1.3.2 大花蕙兰的组培研究现状
• 1.4 研究的目的和意义
• 2 材料和方法
• 2.1 大花蕙兰微繁条件的研究
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.1.2.1 大花蕙兰原球茎诱导培养
• 2.1.2.2 大花蕙兰原球茎增殖培养
• 2.1.2.3 大花蕙兰原球茎芽萌发培养
• 2.1.2.4 大花蕙兰原球茎生根培养
• 2.1.2.5 原球茎诱导率、增殖率、芽萌发率、生根率的统计方法
• 2.1.2.6 数据处理
• 2.2 大花蕙兰外植体组培褐变的控制
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 方法
• 2.2.2.1 大花蕙兰外植体消毒
• 2.2.2.2 不同类型外植体褐变的差异
• 2.2.2.3 培养基成分及培养方式对褐变的影响
• 2.2.2.4 不同附加成分对抑制外植体褐化的影响
• 2.2.2.5 外植体的不同预处理方法
• 2.2.2.6 大花蕙兰外植体褐变指数、分化率统计方法
• 2.2.2.7 培养条件
• 3 结果与分析
• 3.1 大花蕙兰微繁条件的研究
• 3.1.1 大花蕙兰原球茎诱导培养
• 3.1.1.1 无机盐浓度对原球茎诱导的影响
• 3.1.1.2 植物激素配比对大花蕙兰原球茎诱导影响
• 3.1.2 大花蕙兰原球茎增殖培养
• 3.1.2.1 无机盐浓度对大花蕙兰增殖影响
• 3.1.2.2 蔗糖浓度对大花蕙兰增殖影响
• 3.1.2.3 植物激素配比对大花蕙兰原球茎增殖的影响
• 3.1.2.4 培养方式对原球茎增殖的影响
• 3.1.3 大花蕙兰原球茎芽萌发培养
• 3.1.3.1 无机盐浓度对大花蕙兰原球茎芽萌发影响
• 3.1.3.2 蔗糖浓度对大花蕙兰原球茎芽萌发的影响
• 3.1.3.3 植物激素配比对大花蕙兰原球茎芽萌发影响
• 3.1.3.4 培养方式对大花蕙兰原球茎芽萌发的影响
• 3.1.4 大花蕙兰生根培养
• 3.1.4.1 无机盐浓度对大花蕙兰生根的影响
• 3.1.4.2 蔗糖浓度对大花蕙兰生根的影响
• 3.1.4.3 植物激素配比对大花蕙兰生根的影响
• 3.1.4.4 培养方式对大花蕙兰生根的影响
• 3.2 大花蕙兰外植体组培褐变的控制
• 3.2.1 不同外植体对褐变的影响
• 3.2.2 不同培养基成分及培养方式对褐变的影响
• 3.2.3 抗氧化剂和酚类物质吸附剂对大花蕙兰褐变的影响
• 3.2.4 培养材料的不同预处理对大花蕙兰褐变的影响
• 4 结论和讨论
• 4.1 结论
• 4.1.1 大花蕙兰微繁条件的研究
• 4.1.2 大花蕙兰外植体组培褐变的控制
• 4.2 讨论
• 4.2.1 大花蕙兰微繁条件的研究
• 4.2.1.1 植物激素
• 4.2.1.2 无机盐浓度
• 4.2.1.3 糖含量
• 4.2.1.4 培养方式
• 4.2.2 大花蕙兰外植体组培褐变的控制
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 图版