论文摘要
第一部分:雌激素对原代培养新生大鼠海马神经元FKBPs表达的影响目的:研究原代培养的大鼠海马神经元FKBP12和FKBP52的表达以及雌激素和雌激素受体抑制剂对它们的影响。方法:出生24小时内的SD大鼠,无菌条件下断头,取出全脑,分离出双侧海马,制成细胞悬液在24孔培养板中培养,用MAP-2免疫细胞化学法证实所培养的为特异性结构完整的海马神经元,分为对照组（C）、雌激素组（E）、雌激素+雌激素抑制剂ICI182,780组（E+I）、雌激素抑制剂组（I）。于培养第10天加药,单孔雌激素、ICI182,780终浓度分别为10-8M。免疫荧光法检测两种蛋白质的表达。药物作用48小时后于培养第12天收获细胞进行下一步实验。用Western Blot方法检测蛋白,实时荧光定量PCR检测mRNA。结果:至培养第9天神经细胞已基本成熟。用MAP-2免疫荧光鉴定神经元纯度达到92%以上。在原代培养的大鼠海马神经元,FKBP12和FKBP52蛋白都有广泛表达,雌激素作用后FKBP12的表达明显升高,加入雌激素受体抑制剂ICI182,780后,相对于雌激素组FKBP12表达明显降低,回到对照组的水平;FKBP52经雌激素作用后表达有所上升,但是没有统计学意义,加入雌激素抑制剂后其表达没有明显改变;雌激素抑制剂组各成分的表达与对照组相比没有变化。mRNA的表达与蛋白表达的变化相平行。结论:在原代培养的大鼠海马神经元,雌激素可以上调其FKBP12的表达,这种作用是通过雌激素受体来实现的;雌激素作用后FKBP52的表达有升高的趋势但是未达到统计学明显水平。第二部分:液压冲击脑创伤大鼠雌激素治疗影响认知功能的研究目的:探讨雄性SD大鼠液压冲击颅脑创伤后认知功能的改变及雌激素治疗对认知功能的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组,液压冲击脑创伤模型组,脑创伤雌激素治疗组。对照组大鼠16只（正常对照6只,假手术10只）,模型组和雌激素治疗组大鼠各20只。运用大鼠液压损伤颅脑创伤装置致伤。伤后第7天开始应用Morris水迷宫检测参考记忆和工作记忆的能力,参考记忆组检测3天,工作记忆组检测5天。结果:定位航行实验中对照组游泳距离最短,雌激素治疗组最长,模型组居于两者之间;而空间搜索实验对照组大鼠在原来平台所在象限游泳的时间最长,模型组和雌激素治疗组明显短于对照组而且这两组间差别无显著性。工作记忆实验雌激素治疗组明显好于外伤模型组。结论:雄性SD大鼠液压冲击颅脑创伤后认知功能受到严重损害,参照记忆和工作记忆都受到影响,雌激素治疗可以改善大鼠工作记忆状态但同时对参照记忆功能没有影响。第三部分:液压冲击脑创伤大鼠雌激素治疗对海马FKBPs表达的影响目的:探讨液压冲击脑创伤后大鼠受伤侧海马FKBP12和FKBP52的表达变化以及雌激素治疗对此变化的影响。方法:第二部分进行过认知功能检测的各组大鼠,分组不变。麻醉后灌注取脑行组织染色、Western Blot及实时荧光定量PCR检测FKBP12、FKBP52的表达。结果:液压冲击脑创伤后大鼠伤侧海马FKBP12、FKBP52的蛋白和mRNA表达都出现下调。雌激素治疗组这两种亲免素的表达都上升至对照水平。结论:液压冲击颅脑创伤后雄性SD大鼠受伤同侧海马FKBP12和FKBP52的表达都下调,雌激素治疗可以逆转其变化。
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相关论文文献
- [1].一种1,4-噻嗪酰胺类FKBPs配体的波谱学数据解析[J]. 波谱学杂志 2018(02)
- [2].新型FKBPs配体HD5-6对SAMP8小鼠的抗老化研究[J]. 中风与神经疾病杂志 2014(01)