新加良附方诱导胃癌细胞凋亡研究

论文摘要

1目的本课题基于胃癌发生与进展过程中的“寒凝血瘀”关键病机理论,在既往研究新加良附方具有抑制肿瘤生长、诱导肿瘤细胞凋亡及抗肝癌新生血管生成等多种抗肿瘤效应机制的基础上,以国内外诱导肿瘤细胞凋亡初步研究成果及本实验前期研究结果为背景,观察新加良附方体内外抗胃癌的抑制效果,从肿瘤组织超微结构、细胞凋亡、癌症相关基因表达等不同层次探索新加良附方抗胃癌作用靶点,揭示新加良附方抗胃癌机制,为推广应用及新药研发提供基础研究依据。2方法体外部分:制备不同浓度的新加良附方含药血清,用MTT法观察作用48h、72h、96h后不同浓度含药血清对人胃癌细胞（BGC-823）增殖的抑制作用。用倒置显微镜和透射电子显微镜观察细胞形态学改变、流式细胞仪检测人胃癌（BGC-823）细胞凋亡。体内部分:建立人胃癌细胞（BGC-823）裸鼠移植瘤模型,以新加良附方高、中、低剂量进行干预,观察肿瘤抑制率,用免疫组化法测定细胞凋亡相关因子（Survivin、Bcl-2、Bax、Fas、FasL、Caspase-3）的表达水平,以探讨其抗肿瘤的分子机制。3结果实验结果证实,新加良附方有如下作用:①不同浓度含药血清均可抑制胃癌细胞的生长和增殖,并具有剂量依赖性;②胃癌细胞经不同浓度的新加良附方干预后,电镜可观察到典型的凋亡超微结构改变如核碎片;流式细胞仪检测结果证实了新加良附方可诱导胃癌人细胞凋亡;③新加良附方高剂量组能抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长（P<0.05）;④新加良附方诱导胃癌细胞凋亡的可能机制为:启动Fas/FasL介导的死亡受体依赖性途径,通过下调FasL、Bcl-2、Survivin蛋白表达,上调Fas、Bax、Caspase蛋白表达诱导胃癌细胞凋亡。4结论本项研究结果表明,新加良附方体内外均能够抑制肿瘤细胞生长、诱导肿瘤细胞凋亡。这一重要研究结论预示新加良附方在肿瘤治疗中具有广泛的应用前景。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 实验部分
• 实验一 新加良附方含药血清抑制胃癌细胞生长研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验二 新加良附方含药血清诱导胃癌细胞凋亡研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验三 新加良附方抗移植性人胃癌效应研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验四 新加良附方诱导移植性人胃癌细胞凋亡机制研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 参考文献
• 结语
• 1.结论
• 2.特色
• 3.创新点
• 4.思考及设想
• 综述部分
• 综述一 胃癌细胞凋亡相关基因研究进展
• 综述二 胃癌的中医研究现状
• 附图
• 致谢
• 个人简历