SARS-CoV N蛋白抗原表位的筛选及鉴定

论文摘要

严重急性呼吸系统综合症（severe acute respiratory syndrome,SARS）的病原体是一种新型冠状病毒（SARS coronavirus,SARS-CoV）。N蛋白作为比较敏感的SARS血清学检测抗原,目前已成为临床检测的方法之一。分析其抗原表位在SARS诊断试剂及疫苗的研究中具有重要的意义。 本论文通过噬菌体展示随机肽库技术分析SARS-CoV N蛋白的抗原表位。利用原核系统表达N蛋白,ELISA、Western blot结果证明SARS多抗中含有特异识别N蛋白的抗体。以SARS多抗为靶标,利用噬菌体展示随机肽库,筛选SARS多抗的结合肽。通过三轮生物淘洗过程,噬菌体克隆得到富集。经序列对比发现:获得的两个共有序列DXXDP、TXTLL与N蛋白C端341-345、392-396位序列高度同源。ELISA竞争抑制实验、生物信启、学分析以及免疫原性分析实验证明:它们是N蛋白C端的线性表位。表位肽与SARS康复病人血清ELISA检测表明:N蛋白抗体阳性的SARS康复病人血清中存在识别上述表位的抗体克隆。 研究结果表明:我们从SARS多抗中获得了两个N蛋白线性表位,它们可能是N蛋白C端的两个优势表位,其在鉴别诊断中的意义还需要更深入的研究。

论文目录

• 缩略语
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 SARS-CoV N蛋白的表达及抗原性鉴定
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 1.3 实验结果
• 1.4 讨论
• 第二部分 SARS-CoV N蛋白抗原表位的筛选及鉴定
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 实验结果
• 2.4 讨论
• 第三部分 抗原表位在SARS康复病人血清中抗原性的初步分析
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.3 实验结果
• 3.4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 致谢
• 附录：文献综述