猪苓和蜜环菌人工培养及影响几种有效成分产生因素的研究

论文摘要

本文系统地研究了猪苓、伴生菌和蜜环菌的固体培养特性和液体培养条件，以及影响猪苓菌核和蜜环菌子实体发生的因素，并对影响猪苓酮类成分、多糖和黑色素产生的因素进行了研究。 猪苓菌的营养需求比较简单，在只有碳源和氮源的简单培养基上就能够生长。麦芽汁培养基、GPY培养基和GPC培养基比较适合于猪苓菌固体培养。除了尿素，猪苓对碳源和有机氮源的适应性很强，但在不同的碳源条件下，其菌丝生长速度和气生菌丝形态会有较大差别。玉米浆、酵母膏、奶粉、硫胺素、伴生菌提取物、蜜环菌提取物、活性白土、硅藻土、高岭土都对猪苓固体培养的生长显示出不同程度的促进作用。猪苓的适宜生长温度是25℃。 麦芽汁培养基、GPC培养基和GPY培养基是适合于伴生菌生长的3种培养基。伴生菌对碳源和有机氮源的适应性都很强。伴生菌适宜的生长温度是25℃。伴生菌在胡萝卜培养基上则生长良好，而猪苓菌在胡萝卜培养基上不生长。 用单因子试验和正交试验进行液体培养条件优化，适合猪苓液体培养的培养基配方为：可溶性淀粉20g·L-1，豆饼粉提取液300ml·L-1，玉米浆20ml·L-1，硫胺素0.5g·L-1，pH6.5。适合伴生菌液体培养的培养基配方为：可溶性淀粉20g·L-1，豆饼粉提取液200ml·L-1，玉米浆20ml·L-1，硫酸铵1g·L-1，MgSO41g·L-1，CaCl22g·L-1，pH6.0。 进行了3m3发酵罐的猪苓菌丝体液体培养的中试生产实验。适合作为三角瓶种子制作的液体培养基为玉米面液体培养基（用于摇床培养）或麦芽汁液体培养基（静止培养）。在0.5m3的一级种子罐中投料0.3m3，接种量1％，温度25℃，通气量1：0.5，培养至190hr（菌丝干重达到0.23％）适合转接二级罐。二级3m3发酵罐投料体积为2m3，接种量15％，温度25℃，通气量1：0.5，间歇搅拌，搅拌转速120rpm，培养115h放罐，菌丝干重达到1％以上。适合作为判断放罐标准的指标是菌丝体的染色形态和发酵液中的氨基氮含量，菌丝干重、发酵液糖含量以及pH可以作为辅助判断指标。猪苓菌丝液体培养时菌丝结成致密的小球状。菌丝滤饼呈乳白色，新鲜的发酵液和菌丝体都有浓郁的苦杏仁味。和真空干燥相比，气流干燥方式更适合于猪苓菌丝体的干燥。 猪苓菌液体摇瓶培养的生长周期为：延迟期为第0～8天，对数生长期为第9～13天，稳定期为第14～18天，第18天之后开始衰亡期。三个生长期的菌丝体的甲醇提取物的HPLC-DAD图谱有差异，其中的检测到的猪苓酮类成分的种类和数量也有较大差异，对数期菌丝体的猪苓酮类成分种类最少，检测到3个成分，稳定期菌丝体和衰亡期菌丝体中都能检测到6个成分。稳定期菌丝体多糖含量最高，比对数期和衰亡期菌丝体高出55％以上。用纸层析法初步测定猪苓菌丝体和发酵液多糖的单糖组成是葡萄糖，与菌核提取的多糖单糖

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 文献综述
• 第一章 丝状真菌的次生代谢与形态发育之间相关性的研究进展
• 第二章 担子真菌多糖研究进展
• 第二部分 培养条件优化
• 第三章 猪苓和伴生菌固体培养特性的研究
• 第一节 猪苓固体培养特性的研究
• 第二节 伴生菌固体培养特性的研究
• 第四章 猪苓和伴生菌液体培养条件的优化
• 第一节 猪苓液体培养条件的优化
• 第二节 伴生菌液体培养条件的优化
• 第五章 猪苓菌丝体液体培养的中试生产实验
• 第一节 猪苓菌液体发酵的摇瓶种子生产技术
• 3发酵罐液体发酵生产试验'>第二节 猪苓菌丝体3m³发酵罐液体发酵生产试验
• 第三部分 猪苓酮和多箱成分的产生和调节
• 第六章 猪苓液体培养条件下的次生代谢调节
• 第一节 猪苓液体培养条件下猪苓酮类成分的变化规律
• 第二节 猪苓液体培养过程中多糖成分的变化规律
• 第三节 伴生菌液体培养过程中猪苓酮类成分和多糖成分的变化规律
• 第四节 伴生菌对猪苓菌生长和猪苓酮类成分产生的影响
• 第五节 特殊碳源对猪苓的黑色素和猪苓酮类成分代谢的影响
• 第七章 猪苓菌丝体多糖和猪苓菌核多糖的比较研究
• 第一节 猪苓菌丝体多糖和猪苓菌核多糖的提取和性质比较
• 第二节 猪苓菌丝体多糖和猪苓菌核多糖的免疫调节活性比较
• 第四部分 猪苓菌丝形成菌核的研究
• 第八章 影晌猪苓菌核发生的因素和菌核生长发育过程的观察
• 第一节 影响猪苓菌丝形成菌核的因素
• 第二节 猪苓固体培养母种培养基配方的筛选
• 第三节 碳源对固体培养的猪苓菌丝产生猪苓酮类成分的影响
• 第四节 人工培养的猪苓菌核生长发育过程的观察
• 第五部分 蜜环菌发育的研究
• 第九章 蜜环菌人工培养的研究
• 第一节 蜜环菌固体培养特性的研究
• 第二节 蜜环菌菌丝体液体培养条件优化
• 第十章 蜜环菌子实体和蜜环菌黑色素的人工诱导
• 第一节 蜜环菌子实体人工诱导和发生条件
• 第二节 蜜环菌不同特化菌体的HPLC-DAD图谱比较
• 第三节 蜜环菌菌索黑色素的诱导、提取和性质研究
• 主要结论
• 致谢
• 作者简历