通过糖基化反应改善花生分离蛋白和大豆分离蛋白乳化性

论文摘要

国内外的研究表明,通过糖基化反应能够有效地改善蛋白质的功能特性。本论文主要研究糖基化反应对于花生分离蛋白和大豆分离蛋白乳化性的影响,试图推动对于花生粕和大豆粕资源的进一步开发和利用,扩大花生蛋白和大豆蛋白的应用范围。论文具有良好的学术意义和实际应用价值。本论文首先对高温粕和低温粕中提取的分离蛋白的结构和性质进行了比较研究。采用碱溶酸沉法从高温粕和低温粕中制备分离蛋白,分别测定它们的疏水性、氮溶解性、乳化活性、乳化稳定性和分子量分布。结果发现,与低温粕中提取的分离蛋白相比,高温粕中提取的分离蛋白的疏水性高,氮溶解性低,乳化活性和乳化稳定性好。电泳（SDS-PAGE）和HPLC液相结果显示,高温分离蛋白的分子量分布发生明显改变。论文详细研究了糖基化反应对于花生分离蛋白和大豆分离蛋白乳化性的影响。将来自于高温粕和低温粕的花生分离蛋白和大豆分离蛋白分别与葡萄糖、麦芽糖在不同反应温度（60℃、80℃）,不同蛋白、糖比例的情况下进行糖基化反应,通过乳化活性、乳化稳定性等指标反应糖基化反应对于分离蛋白性质的影响。研究结果显示,糖基化反应可以显著提高分离蛋白的乳化活性,葡萄糖的反应性好于麦芽糖,反应在60℃,蛋白和糖比例为1:2时,能够得到更好的乳化效果。将各种变性蛋白质与常用大豆分离蛋白以及酪蛋白酸钠的乳化性进行比较,结果显示,糖基化反应产物的乳化性好于几种工业用的大豆蛋白,略低于酪蛋白酸纳的乳化性,这进一步证明改性后的花生蛋白和大豆蛋白具有良好的应用前景。在前面研究的基础之上,进一步讨论糖基化改性后蛋白结构变化与功能之间的关系,结果显示,在一定范围内接枝度的增加会提高蛋白乳化性,但并不是接枝度越高乳化性越好。蛋白的溶解性、疏水性和蛋白的乳化性之间存在相关性,在一定程度上,溶解性的提高会有利于乳化性的改善,但是蛋白的乳化性质还受到疏水性和蛋白结构等多种因素的影响。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 立题背景和意义
• 1.2 国内外研究进展
• 1.2.1 花生蛋白和大豆蛋白基本性质
• 1.2.2 通过糖基化反应对蛋白质进行改造的方法
• 1.2.3 制备糖基化蛋白的条件
• 1.2.4 通过糖基化反应改善蛋白质的溶解性
• 1.2.5 通过糖基化反应改善蛋白质的乳化性
• 1.3 课题的研究内容
• 1.3.1 课题的目的
• 1.3.2 课题的研究内容
• 第二章 从高温粕和低温粕中提取的花生分离蛋白和大豆分离蛋白的性质比较
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料与设备
• 2.2.1 主要材料与试剂
• 2.2.2 主要仪器
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 分离蛋白的提取
• 2.3.2 组成成分的测定
• 2.3.3 羰基含量的测定
• 2.3.4 SDS-PAGE 凝胶电泳
• 2.3.5 氮溶解度指数测定
• 2.3.6 乳化性的测定
• 2.3.7 疏水性的测定
• 2.3.8 起泡性和泡沫稳定性的测定
• 2.3.9 HPLC 液相试验
• 2.3.10 自由氨基含量的测定
• 2.3.11 数据统计分析
• 2.4 结果与分析
• 2.4.1 高温粕和低温粕中的基本成分比较
• 2.4.2 高温粕和低温粕中提取的分离蛋白的成分及性质
• 2.4.3 高温粕和低温粕中提取的分离蛋白的功能性质
• 2.5 本章小结
• 第三章 利用糖基化反应改善花生分离蛋白和大豆分离蛋白乳化性的研究
• 3.1 引言
• 3.1.1 主要材料和试剂
• 3.1.2 实验仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 糖基化蛋白的制备
• 3.2.2 接枝度的测定
• 3.2.3 原蛋白凝胶电泳
• 3.2.4 乳化性的测定
• 3.2.5 数据统计分析
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 糖基化反应对接枝度的影响
• 3.3.2 不同还原糖对糖基化反应改善乳化性的影响
• 3.3.3 不同反应温度对糖基化反应改善乳化性的影响
• 3.3.4 不同还原糖比例对糖基化反应改善乳化性的影响
• 3.3.5 糖基化反应后的紫外扫描图变化
• 3.3.6 糖基化反应后的原蛋白电泳图
• 3.3.7 改性后的蛋白和不同来源的蛋白原料的乳化性比较
• 3.4 本章小结
• 第四章 糖基化改性后蛋白结构变化及其与功能之间的关系初探
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与设备
• 4.2.1 主要材料与试剂
• 4.2.2 主要仪器
• 4.3 试验方法
• 4.3.1 疏水性的测定
• 4.3.2 分子量测定
• 4.3.3 氮溶解度指数测定
• 4.3.4 接枝度的测定
• 4.3.5 数据统计分析
• 4.4 结果与分析
• 4.4.1 糖基化反应后分子量分布的变化
• 4.4.2 糖基化反应后的接枝度变化及其与乳化性的关系
• 4.4.3 糖基化反应后的溶解度变化及其与乳化性的关系
• 4.4.4 糖基化反应后的疏水性变化及其与乳化性的关系
• 4.5 本章小结
• 主要结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表论文