庞玉娜（广西博白县人民医院药剂科广西博白537600）
【中图分类号】R944.6【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）6-0014-02
【摘要】目的综述柚苷皮苷含量测定的方法。方法对近年来的用于柚皮苷提取，分离纯化，含量测定的一些方法进行汇总，并分析。结果用于柚皮苷提取，分离及纯化，含量测定的方法有多种，各有优缺点。结论近年来用于柚皮苷提取最常用的为溶剂提取法，分离纯化常用的吸附剂为聚酰胺和硅胶，含量测定常用高效液相色谱法。
【关键词】柚皮苷含量测定研究进展
柚是芸香科柑桔属水果，不仅具有较高的营养价值，而且具有极高的药用价值。柚皮苷全称为柚皮素-7-0-新橙皮糖苷，是一种双氢黄酮类化合物，其结构是在黄酮基本结构的第七位置上以糖苷键的形式接一个葡萄糖和鼠李糖，由一分子的芸香糖与柚皮素(naringenin)成苷，由于A环和B环之间完全没有共轭，所以在282nm有强烈的紫外吸收峰。纯柚皮苷是一种白色粉末状固体，在水中的溶解度很小，常温下的溶解度约0.1％，溶于丙酮、甲醇、乙醇、正丁醇、热的醋酸和水，不溶于乙醚、己烷和氯仿等，熔点为83℃。
1柚皮苷的提取
柚皮苷大部分存在于柑橘加工的废弃物中，如果皮、果囊，其中成熟的果皮和组织中柚皮苷的含量最高。柚皮苷的提取方法根据柚皮苷的结构及性质有：
（1）碱提酸沉法：用饱和Ca(OH)2溶液浸提，用HCL溶液沉淀的方法提取柚皮苷。
（2）溶剂提取法:由于柚皮苷溶于甲醇，乙醇，丙酮，正丁醇及水等溶剂中，故可用甲醇、乙醇或者水浸泡一定时间提取柚皮苷。
2柚皮苷的分离及纯化方法
柚皮苷的分离及纯化基本上是将提取液过滤,浓缩或挥干加溶剂适量上柱，进行柱分离，有机溶剂洗脱；洗脱液挥干溶剂，得粗品；再经多次重结晶，得柚皮苷晶体；或直接收集洗脱液进行含量测定。所使用的分离物质有多种,如大孔树脂,聚酰胺,硅胶等,但因其吸附原理不同,同时相同的吸附剂不同型号及其吸附效能也有所不同,故选择吸附剂时要根据柚皮苷的性质及实验条件选择分离效果最佳的吸附剂。
3柚皮苷的含量测定
柚皮苷的含量测定也有多种方法，包括紫外分光光度法[1]，薄层扫描法，胶束电动毛细管电泳法，流动注射双安培法，反相高效液相色谱法，高效液相色谱法等，其中近年来柚皮苷含量测定中最常用的为高效液相色谱法。
(1)紫外分光光度法
此法测定时是用柚皮苷不同浓度的对照品溶液测其吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标得线性回归方程后,再对供试品溶液进行含量测定。
(2)胶束电动毛细管电泳法
一种测定芸香科柑橘属药材中柚皮苷及橙皮苷含量的新方法，是以苯甲酸钠为内标物，采用胶束电动毛细管电泳法，可将药材中柚皮苷、橙皮苷和内标物较好的分离后进行含量测定[2]。
(3)流动注射双安培法
应用于柚皮苷的直接检测，使用两支经阳极化预处理的铂电极,在外加电压为0V时,通过偶合柚皮苷在一支电极上的氧化和氧化铂在另一支电极上的还原两个不可逆电极过程,构成流动注射双安培检测体系。在pH9.62BR(BritonRobinson)缓冲溶液中,测得柚皮苷氧化电流与其浓度在某个范围内呈良好的现性关系,所拟方法具有简单,快速,灵敏度高等特点,已用于模拟样品中柚皮苷的测定[3]。
(4)薄层扫描法
采用薄层扫描法测定化橘红药材中柚皮苷的含量，方法简便，重现性好，平均回收率高。过程是将提取液过滤取定量定容后,定量点于薄层板，用展开剂进行展开，再有薄层扫描仪扫描测定其含量[4]。
(5)反相高效液相色谱法
因为提取柚皮苷的药材中往往有其它与柚皮苷含有相同共轭体系的黄酮苷类化合物；同时检测某些药材时，除了以柚皮苷为指标外还需其它的物质作为指标，但若每个物质采用一种方法测定不但费时费力还浪费溶剂，而反相高效液相色谱法可用于同时测定两个物质的含量，如测定枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的含量时，采用反相高效液相色谱法，可同时测定这两个物质的含量[5]；测定复方肝纤康合剂中芍药苷和柚皮苷的含量时也采用了RP-HPLC法[6]，使用该法简便易行，快速。
(6)高效液相色谱法
高效液相色谱法测定柚皮苷的含量可以有多种色谱条件，流动相可以为乙腈：磷酸水（PH3.5）(V/V)32:88[7，8]或乙腈-0.1%磷酸(21:79)[9]，甲醇-1%冰醋酸（35：65）[10],乙腈-0.4%醋酸水溶液(20:80)[11]，甲醇-水-乙酸(v:v:v=35:61:4)[12]等,检测波长为283nm。检测过程是首先用柚皮苷的不同浓度对照品溶液测其峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归，再测柚皮苷供试品的含量。
4结论
近年来用于柚皮苷提取，分离纯化及含量测定的方法已有很大的进展。含量测定中比较简便快速的方法为紫外分光光度法，但其在测定波长处往往会容易受到其它在此波长也具有吸收峰的杂质干扰而不常用；反相高效液相色谱法与高效液相色谱法由于可以对具有相同共轭体系的化合物在分析时可以达到较好的分离，而且分析速度快，灵敏度高，重现性好，近年来已备受关注，故含量测定常用高效液相色谱法。柚皮苷的提取最常用的为溶剂提取法，因为其简便，溶剂用量少，提取效率高；分离纯化中常用的吸附剂为聚酰胺和硅胶。
参考文献
[1]李俊松，徐德生，冯怡,等.甘草中黄酮的纯化方法和含量测定[J].中成药,2007(7):29-7.
[2]杨瑛，王实强，彭源贵．胶束电动毛细管电泳法测定柑橘属药材中柚皮苷和橙皮苷的含量[J]．中草药，1999：30-3．
[3]孙家娟，刘彬,尚永辉,等．流动注射双安培法测定柚皮苷[J]．分析实验室，2006（12）：25-12．
[4]李晓光，林励，陈志霞.薄层扫描法测定化橘红中柚皮苷含量[J].渤江中医学院学报,2O03(2):27-1.
[5]杨武亮，杨世林，张敏，等．RP-HPLC法测定枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的含量[J].中药新药与临床药理，2005(7):16-4.
[6]邬晓鸥,胡振雄,熊英.RP-HPLC法测定复方肝纤康合剂中芍药苷和柚皮苷的含量[J]，2000,15(5):373－374.
[7]杨爽,苏智先,边清泉,等．柚类果皮中柚皮苷含量的测定分析[J]．绵阳师范学院学报，2007（5）：26-5．
[8]崔宇宏，常海萍，史宪海.对枳壳中柚皮苷含量测定方法的改进[J].中国药品标准,2005：6-1.
[9]潘馨.绿衣枳壳中柚皮苷含量测定方法的研究[J].2005(4):3-2.
[10]罗杰，郑捷，曾亚伦，等．骨仙片中柚皮苷的含量测定[J]．中国中药杂志，2003（7）：28-7．
[11]李遇伯,孟繁浩,潘晓峰,等.HPLC同时测定骨碎补药材中新北美圣草苷和柚皮苷的含量[J].药物分析杂志,2006，26(6).
[12]庞瑞,杨中林.不同产地不同品种柚皮中总黄酮和柚皮苷的含量比较[J].药学与临床研究，2007:15-3．