低聚壳聚糖的制备及生物活性研究

论文摘要

本文对金属配位控制氧化降解壳聚糖的条件进行了优化,优化结果为:控制原料壳聚糖为0.5g,1% HAc溶液为30mL,降解时间1.5h,降解温度45℃,双氧水1mL（浓度30%）,乙酸铜80mg。在此条件下,以732阳离子交换柱层析分离了壳聚糖降解液,制备了高品质的低聚壳聚糖,产率可达到60﹪～70﹪。Sephadex G-25凝胶过滤层析、DNS端基显色法、质谱法分析和薄层层析检测的结果表明,732阳离子交换柱层析分离制备的低聚壳聚糖分子质量分布范围较窄,聚合度约为4。低聚壳聚糖能显著抑制致病疫霉和枯草芽孢杆菌,但对大肠杆菌的抑制效果不明显。0.625mg/mL低聚壳聚糖对超氧阴离子的清除率达63.3% ,1.25 mg/mL低聚壳聚糖对羟基自由基的清除率达91.8% ;在实验范围内2mg/mL低聚壳聚糖在体外对人Hela细胞的抑制率达到67%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 文献综述
• 1.1 甲壳素、壳聚糖、低聚壳聚糖简介
• 1.2 低聚壳聚糖的制备方法简介
• 1.2.1 物理降解法
• 1.2.2 化学降解法
• 1.2.3 生物酶降解法
• 1.3 低聚壳聚糖的分析及分离纯化方法简介
• 1.4 低聚壳聚糖的分子量分布和聚合度测定方法
• 1.4.1 粘度法
• 1.4.2 凝胶渗透色谱
• 1.4.3 端基分析法
• 1.5 壳聚糖的生物活性功能
• 1.5.1 抗菌活性
• 1.5.2 抗肿瘤活性
• 1.5.3 抗氧化活性
• 1.5.4 影响脂代谢
• 1.5.5 其它生理活性
• 1.6 本课题的研究内容及意义
• 第2章 水溶性低聚壳聚糖的制备
• 2.1 实验目的及意义
• 2.2 实验原理
• 2.3 实验材料和试剂
• 2.4 实验仪器
• 2.5 实验方法
• 2.5.1 双氧水用量对低聚壳聚糖产率的影响
• 2.5.2 降解温度对低聚壳聚糖收率的影响
• 2.5.3 降解时间对低聚壳聚糖产率的影响
• 2.5.4 乙酸铜的加入量对低聚壳聚糖产率的影响
• 2.6 结果与讨论
• 2.6.1 双氧水用量对低聚壳聚糖产率的影响
• 2.6.2 降解温度对低聚壳聚糖收率的影响
• 2.6.3 降解时间对低聚壳聚糖产率的影响
• 2.6.4 乙酸铜的加入量对低聚壳聚糖产率的影响
• 2.7 小结
• 第3章 阳离子交换树脂柱层析分离低聚壳聚糖
• 3.1 实验的目的和意义
• 3.2 实验原理
• 3.3 实验材料
• 3.4 实验仪器
• 3.5 实验方法
• 3.5.1 732 阳离子交换树脂的处理
• 3.5.2 732 阳离子交换树脂的装柱
• 3.5.3 样品制备
• 3.5.4 上样
• 3.5.5 洗脱
• 3.5.6 收集
• 3.5.7 阳离子树脂再生与铜离子去除
• 3.6 结果与讨论
• 3.6.1 层析柱交换剂用量的选择
• 3.6.2 洗脱液浓度的选择
• 3.6.3 流速的控制
• 3.6.4 收集液
• 3.6.5 检测方法
• 3.7 小结
• 第4章 低聚壳聚糖的分子量分布检测和分子量测定
• 4.1 实验的目的和意义
• 4.2 实验原理
• 4.3 实验材料
• 4.4 实验仪器
• 4.5 实验方法
• 4.5.1 Sephadex G-25 凝胶过滤柱层析
• 4.5.2 端基分析法测定低聚壳聚糖的分子量
• 4.5.3 低聚壳聚糖的薄板层析
• 4.5.4 质谱分析
• 4.6 结果与讨论
• 4.6.1 Sephadex G-25 凝胶过滤层析
• 4.6.2 端基分析法测定低聚壳聚糖的分子量
• 4.6.3 薄板层析结果
• 4.6.4 质谱结果
• 4.7 小结
• 第5章 低聚壳聚糖的生物活性检测
• 5.1 实验目的和意义
• 5.2 抑菌实验
• 5.2.1 实验仪器
• 5.2.2 实验材料
• 5.2.3 实验方法
• 5.2.4 结果与讨论
• 5.2.5 小结
• 5.3 抗氧化试验
• 5.3.1 实验材料
• 5.3.2 实验仪器
• 5.3.3 实验方法
• 5.3.4 结果与讨论
• 5.3.5 小结
• 5.4 低聚壳聚糖对Hela 细胞的抑制实验
• 5.4.1 实验原理
• 5.4.2 仪器
• 5.4.3 试剂和材料
• 5.4.4 实验方法
• 5.4.5 结果与讨论
• 第6章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的论文