清肺口服液对RSV感染Hep-2细胞后细胞因子IL-6、TNF-α表达水平的影响

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目的：以利巴韦林含药血清为对照,探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒（RSV）感染后人喉癌上皮细胞（Hep-2）细胞因子白细胞介素一6及肿瘤坏死因子一0[表达水平的影响,从实验角度佐证清肺口服液在治疗RSV肺炎方面的有效性。方法：RSV攻击Hep-2细胞后,分别于不同给药时段予清肺口服液含药血清、利巴韦林含药血清以及空白血清进行干预,干预后48小时和72小时后收集每组细胞上清液,以酶联免疫吸附法（ELISA法）为检测手段,对各组Hep-2细胞中IL-6及TNF-α含量进行测定,并对其水平变化及各组差异予分析比较。结果：清肺口服液含药血清对Hep-2细胞最大无毒浓度是20%。48小时和72小时后病毒模型组中IL-6及TNF-α的表达与空白血清组相比,无显著性差异（P>0.05）；病毒模型组表达水平明显高于清肺口服液各组与利巴韦林各组,有显著性差异（P<0.01）。清肺口服液各组与利巴韦林各组比较,无显著性差异（P>0.05）。清肺口服液各组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）之间比较,无显著性差异（P>0.05）。利巴韦林各组（Ⅱ、Ⅲ）之间比较,无显著性差异（P>0.05）。结论：1.RSV作用于Hep-2细胞后炎症因子IL-6及TNF-α表达水平显著升高。2.清肺口服液含药血清可降低RSV感染后的Hep-2细胞中IL-6及TNF-α的过度表达,减缓炎症反应,推测此机制为本药抗RSV作用机制之一,进一步说明清肿口服液能有效治疗RSV肺炎。

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摘要

ABSTRACT

前言

第一部分理论研究

1.祖国医学对小儿肺炎的认识

1.1 中医病名探讨

1.2 中医病因病机古今差异分析

1.3 中医对本病辨证分型的研究

1.4 中医学对本病治则治法的总结

1.5 特殊治疗方法与途径

2.中医药治疗小儿肺炎临床疗效研究

2.1 中药治疗小儿肺炎临床疗效研究

2.2 中西医结合治疗小儿肺炎临床疗效研究

3.中医药抗RSV实验研究

3.1 体外实验研究

3.2 体内实验研究

4.西医学对RSV肺炎的认识

4.1 呼吸道合胞病毒

4.2 抗RSV治疗药物研究进展

4.3 相关细胞因子简介

第二部分实验研究

1.研究材料

1.1 实验药物分析

1.2 材料

2.实验方法

2.1 人喉癌上皮细胞的培养

2.2 病毒的扩增

2.3 含药血清对细胞最大无毒浓度测定

2.4 呼吸道合胞病毒A亚型组织培养半数感染量的测定

2.5 分组实验

2.6 统计学方法

3.实验结果

3.1 清肺口服液及利巴韦林含药血清对Hep-2细胞最大无毒浓度的测定结果

3.2 RSV组织培养半数感染量

3.3 RSV感染后各组IL-6含量结果

3.4 RSV感染后各组TNF-α含量结果

第三部分讨论

1.实验相关技术探讨

1.1 Hep-2细胞的使用依据

1.2 细胞培养技术

1.3 酶联免疫吸附实验法

1.4 血清药理学的研究

2.实验结论

3.不足与展望

参考文献

附录

攻读硕士学位期间取得的学术成果

1 完成课题

2 发表论文

致谢

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