论文题目: 小白菊内酯抗肿瘤作用的实验研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 应用化学
作者: 张雯
导师: 宋晓凯
关键词: 小白菊内酯,人肝癌细胞株,细胞凋亡,免疫组织化学
文献来源: 天津理工大学
发表年度: 2005
论文摘要: 小白菊内酯（parthenolide）是一种倍半萜烯内酯，分子式为C15H20O3，分子量（Mr）为248.3，西方国家曾主要用于治疗皮肤感染、风湿病和偏头疼。研究发现，许多天然植物成分能诱导肿瘤细胞凋亡，并能使肿瘤细胞发生细胞周期阻滞，抑制肿瘤细胞增殖。近年来，发现小白菊内酯具有多种生物活性，并且对多种瘤株有抑制作用。据一些文献报道，它的抗癌作用可能也是通过诱导细胞凋亡，影响细胞生长来实现的。目的研究小白菊内酯抗人肝肿瘤作用，并从分子水平初步探讨其作用机制，为临床应用提供实验依据。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞，用小白菊内酯处理细胞；采用MTT比色法观察小白菊内酯对人肝癌细胞生长的影响；倒置显微镜观察形态学改变；Giemsa染色观察凋亡小体；琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解；应用免疫组织化学方法检测相关基因P53、PCNA和NF-κB表达的情况。结果结果显示，MTT比色法表明小白菊内酯能明显抑制人肝癌BEL-7402细胞生长，呈剂量依赖性关系；倒置显微镜观察经小白菊内酯处理的BEL-7402细胞，出现皱缩、核质浓缩、核碎裂等现象；Giemsa染色观察到凋亡小体；DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征，即“梯形”条带的出现；免疫组织化学法显示，小白菊内酯处理细胞48小时后，可抑制NF-κB活性；P53表达增强；PCNA表达减弱。结论小白菊内酯能够抑制人肝癌BEL-7402细胞增殖，亦能诱导其凋亡。诱导肿瘤细胞凋亡可能是小白菊内酯抑制人肝癌细胞生长的机制之一；NF-κB可能参与小白菊内酯诱导BEL-7402细胞凋亡中的信号转导；其机制还可能与增强P53蛋白表达和抑制PCNA蛋白表达有关。
论文目录:
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英文摘要
引言
第一章 文献综述
1.1 中药抗肿瘤作用研究进展
1.1.1 肿瘤发生机制
1.1.2 抗肿瘤中药的特点
1.1.3 中药抗肿瘤的主要机制
1.1.4 新的研究热点
1.1.5 问题与展望
1.2 小白菊内酯抗肿瘤及其它药理活性研究概况
1.2.1 体外抑瘤作用
1.2.2 抗炎作用及细胞毒作用
1.2.3 诱导细胞凋亡作用
1.2.4 作为NF-kappaB抑制剂
1.2.5 作为iNOS/NO合成的抑制剂
1.2.6 抑制血管平滑肌细胞增殖
1.2.7 对于败血病和多器官损伤的治疗作用
1.2.8 促进细胞分化
1.2.9 抑制IkappaB—A的降解、直接与Ikk结合
1.2.10 对细胞周期的影响
1.2.11 其他药理作用
1.2.12 展望
第二章 小白菊内酯抗肿瘤实验材料与方法
2.1 细胞系及培养
2.2 药品及主要试剂
2.3 主要仪器
2.4 实验方法
2.4.1 MTT比色法测定细胞增殖抑制率
2.4.2 倒置显微镜观察小白菊内酯对BEL-7402细胞形态的影响
2.4.3 Giemsa染色实验
2.4.4 DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡
2.4.5 免疫组织化学方法检测P53蛋白表达
2.4.6 增殖细胞核抗原(PCNA)检测
2.4.7 免疫细胞化学法检测NF-κB活性
2.4.8 免疫组化检测结果的观察方法
2.4.9 统计学处理
第三章 小白菊内酯抗肿瘤实验结果
3.1 小白菊内酯对细胞生长的影响
3.2 倒置显微镜观察
3.3 Giemsa染色结果
3.4 DNA琼脂糖凝胶电泳
3.5 免疫组织化学法检测结果
3.5.1 P53蛋白表达结果
3.5.2 增殖细胞核蛋白PCNA表达结果
3.5.3 核因子-κB表达结果
第四章 小白菊内酯抗肿瘤实验结果与讨论
4.1 小白菊内酯体外抑制细胞增殖实验
4.2 小白菊内酯诱导细胞凋亡实验
4.2.1 细胞凋亡的形态学观察
4.2.2 DNA琼脂糖凝胶电泳
4.3 免疫组织化学检测相关基因的表达
4.3.1 免疫组织化学技术
4.3.2 P53表达实验结果讨论
4.3.3 PCNA蛋白表达实验结果讨论
4.3.4 NF-κB表达实验结果讨论
第五章 结论
参考文献
致谢
附录
附录1.发表研究论文情况
附录2.统计学方法及检验结果
发布时间: 2007-08-01
参考文献
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