脂肪来源干细胞移植联合跑台运动对脑缺血大鼠脑内Nogo A及其受体表达的影响

论文摘要

目的：探讨脂肪来源干细胞（ADSCs）移植和跑台运动训练对脑缺血大鼠神经功能和脑内神经轴突再生抑制因子Nogo A及其受体NgR、PirB表达的影响，为脑损伤的治疗提供实验依据。方法：1、体外分离培养ADSCs。2、取108只成年SD大鼠随机分为五组：假手术组、模型组、移植组、运动组、联合组，后四组再根据造模后的时间点分为：7d，28d两个亚组，每组12只。所有大鼠在制备大脑中动脉栓塞（MCAO）模型前先进行适应性运动训练3天。3、采用改良Zea-Longa线栓法制备MCAO模型。4、移植组、联合组于造模成功后24h经侧脑室移植培养的第3-4代ADSCs（1×106）。5、运动组、联合组于造模成功后48h采用电动跑台训练仪进行康复运动训练，每天30min，直至预定时间点；其余组则置于跑台仪上相同的时间，但不进行跑台运动训练。6、采用修正的神经行为学评分方法（mNSS）评价各组大鼠MCAO模型后4d、7d、14d和28d的神经功能恢复情况。7、MCAO模型7d后通过大鼠脑组织HE染色观察各组大鼠脑组织的病理改变情况；MCAO模型28d后通过大鼠脑组织TTC染色观察各组大鼠脑梗死体积情况。8、MCAO模型7d、28d后，采用实时定量-多聚酶链式反应（realtime-PCR）法、westernblot法定量和免疫荧光组织化学染色法定位检测大鼠脑组织缺血周边区Nogo A及其受体NgR、PirB的表达情况。结果：1、各组大鼠造模后神经功能逐渐恢复，移植组、运动组大鼠造模后14d、28d神经功能评分优于模型组（P<0.05），联合组大鼠神经功能评分明显优于模型组（P<0.01或P<0.05）；造模后7d HE染色结果显示模型组大鼠脑组织缺血周边区神经细胞数量减少，细胞水肿明显，治疗后脑组织损伤明显减轻；造模后28d脑梗死体积移植组、运动组、联合组与模型组相比明显减小（P<0.01或P<0.05）。2、realtime-PCR法和Western blot法结果显示：与移植组、运动组相比，造模后28d联合组大鼠Nogo A、NgR和PirB的表达明显降低（P<0.01或P<0.05）。3、免疫荧光组织化学法结果显示：NogoA主要在缺血周边区的少突胶质细胞中表达，神经元也有少量表达；NgR主要在缺血周边区的神经元胞体中表达，少量在神经轴突中表达； PirB主要在缺血周边区的神经轴突中表达，少量在神经胞体中表达。结论：脂肪来源干细胞移植和跑台运动训练均可促进脑缺血大鼠神经功能恢复，且二者有协同作用，其作用机制可能与下调脑缺血周边区组织中NogoA、NgR和PirB的表达有关。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 脂肪来源干细胞的分离培养
• 引言
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法与步骤
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 第二部分 脂肪来源干细胞移植联合跑台运动对脑缺血大鼠的影响
• 引言
• 2.1 材料
• 2.2 实验方法与步骤
• 2.3 统计分析
• 2.4 结果
• 2.5 讨论
• 第三部分 脂肪来源干细胞移植联合跑台运动对脑缺血大鼠脑内 NogoA 及其受体 NgR、PirB 表达的影响
• 引言
• 3.1 材料
• 3.2 实验方法与步骤
• 3.3 统计分析
• 3.4 结果
• 3.5 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述
• 参考文献