论文摘要
大豆异黄酮是具有极高药用价值的植物雌激素,广泛产生于豆科植物中,具有有抗氧化,抗肿瘤,雌激素样等作用,在预防和治疗乳腺疾病,前列腺疾病,心血管疾病,妇女闭经后综合征,骨质疏松症等方面有着广泛而显著的效果。本文利用根瘤菌介导的大豆转基因方法,成功的将置于种子特异性表达的启动子下的异黄酮合成酶基因质粒pCAMBIA1301-CIP转入大豆基因组中,并获得转化度较高的大豆愈伤。研究愈伤诱导和生长条件,对比了不同亚培养方式的差异,比较6-BA在配合潮霉素筛选效果并维持愈伤生长,完成筛选过程中的重要作用。利用GUS染色法,PCR及RT-PCR确定外源基因片段的插入及IFS基因的表达情况。利用HPLC分析对比了未转化及转化成功的愈伤中异黄酮的含量。结果表明利用根瘤菌介导的大豆转基因体系,可以将外源异黄酮合成酶基因转入大豆子叶中并直接诱导转基因愈伤组织,借助生合成途径调控,不同程度的增加愈伤组织中异黄酮的含量（3～7倍）,可为大豆转基因细胞培养及利用转基因调控方法开发药用异黄酮提供前期参考。
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