首页> 正文

苍耳中抗病物质的作用测定及幼苗中蛋白质层析行为分析

2020-12-04阅读(688)

苍耳中抗病物质的作用测定及幼苗中蛋白质层析行为分析

论文摘要

苍耳（Xanthium spp.）是我国分布广泛的一种野生杂草,其中含有丰富的抗病活性物质,包括大量的小分子物质和蛋白质类物质。本文采用对峙培养法（生长速率法）,以合欢枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp.Perniciosum）、杨树腐烂病菌（Valsa sordida Nits. ）、杨树水泡溃疡病菌（Botryosphaeria dothidea （Moug. ex Fr.） Ces. et de Not.）、桑漆斑病菌（Myrothecium rorideum Tode ex Fr.）、大叶黄杨疮痂病菌（Sphaceloma euonymi-japonici Kurosawa）、草坪炭疽病菌（Colletortrichun graminicola （Ces.）Wilson）6种真菌为供试对象,研究了苍耳4种有机溶剂提取物和不同部位中蛋白质粗提液对真菌的抑制作用,并且采用枯斑半叶法测定了其对烟草花叶病毒TMV的抑制效果。结果发现,乙酸乙酯提取物对真菌的抑制效果相对较强,且随浓度的稀释抑制效果变化不明显,其1g/ml浓度的溶液对草坪炭疽病菌（C. graminicola）的生长抑制率达到81.25%;其次是丙酮提取物,其1g/ml溶液对合欢枯萎病菌（F. oxysporum）生长的抑制率达到72.73%。以心叶烟为枯斑寄主时,对烟草花叶病毒（TMV）的灭活作用,丙酮提取物最强达到78.20%,其次是乙酸乙酯提取物。乙醇、氯仿的提取物对真菌的作用效果不是很稳定,对TMV的作用效果也很不明显。苍耳不同部位蛋白质对真菌的抑制效果也不同,以苍耳种子以及幼苗中粗蛋白溶液的抑菌活性最为明显,对于生长速率较快的真菌抑制效果较明显,而对于生长速率较慢的真菌,抑制作用较弱。总结发现,幼苗中粗蛋白溶液的抗病活性相对其他部位来源蛋白质比较显著,所以采用幼苗为植物材料,研究如何更好的开展抗病活性蛋白的层析分离。在对幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白进行DEAE-Sepharose Fast Flow层析行为分析时,通过调整不同的上样量、洗脱流速、NaCl最终浓度以及洗脱总体积,发现在条件不同时,层析的分离效果不同。具体关系为:上样量越大,分离效果越差;洗脱流速越高,洗脱峰越尖锐,杂峰越多,层析效果越不稳定;NaCl最终浓度越大,峰结果越紧密,拖尾越严重;洗脱总体积越大,峰之间距离越大,分离效果越好。幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白质通过CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱得到一个洗脱峰,分析该组分含4种蛋白质;通过DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析得到6个相对独立的峰,活性检测有抗病毒活性的有2种组分。

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 1 引言
  • 1.1 苍耳中活性成分的分析
  • 1.1.1 倍半萜内酯
  • 1.1.2 水溶性苷类
  • 1.1.3 蛋白质类物质
  • 1.1.4 挥发油
  • 1.2 苍耳中活性物质的应用
  • 1.2.1 苍耳中活性物质在医药上抗菌、抗病毒活性
  • 1.2.2 苍耳中活性物质对植物害虫的作用
  • 1.2.3 苍耳中活性物质对植物病原物的作用
  • 1.2.4 苍耳在生态方面的作用
  • 1.3 展望
  • 2 材料与方法
  • 2.1 供试材料
  • 2.2 有机溶剂提取物的获得方法
  • 2.3 蛋白质粗提液的获得方法
  • 2.4 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白质的DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换柱层析行为
  • 2.4.1 柱子处理及洗脱方法
  • 2.4.2 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白质的DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换柱层析行为
  • 2.4.2.1 洗脱液不同流速时蛋白质的层析行为
  • 2.4.2.2 不同上样量时蛋白质的层析行为
  • 2.4.2.3 不同NaCl 梯度洗脱终浓度下蛋白质的层析行为
  • 2.4.2.4 不同洗脱总体积下蛋白质的层析行为
  • 2.5 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白柱层析分离和活性测定
  • 2.5.1 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白CM-Sepharose Fast Flow 阳离子交换柱层析
  • 2.5.2 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换柱层析
  • 2.6 SDS-PAGE 电泳
  • 2.7 对真菌生长的抑制作用测定
  • 2.8 抗烟草花叶病毒（TMV）的活性测定
  • 3 结果分析
  • 3.1 苍耳不同提取物对真菌生长的抑制作用测定
  • 3.2 苍耳不同提取物抗病毒活性测定
  • 3.3 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白层析行为研究
  • 3.3.1 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白质的DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析行为
  • 3.3.1.1 不同流速时蛋白质的DEAE-Sepharose Fast Flow 层析行为
  • 3.3.1.2 不同上样量时蛋白质的DEAE-Sepharose Fast Flow 层析行为
  • 3.3.1.3 不同NaCl 梯度洗脱终浓度洗脱下蛋白质的DEAE-Sepharose Fast Flow 层析行为
  • 3.3.1.4 不同洗脱总体积下蛋白质的DEAE-Sepharose Fast Flow 层析行为
  • 3.4 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析蛋白柱层析分离和活性测定
  • 3.4.1 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析总蛋白CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析效果
  • 3.4.2 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析总蛋白DEAE-Sepharose Fast Flow层析效果
  • 3.4.3 不同层析组分蛋白质对烟草花叶病毒（TMV）的活性测定
  • 4 结论与讨论
  • 4.1 结论
  • 4.1.1 苍耳种子有机溶剂提取物的抗病活性
  • 4.1.2 苍耳不同部位蛋白质的抗病活性测定
  • 4.1.3 苍耳幼苗0-60%硫酸铵盐析总蛋白的DEAE-Sepharose Fast Flow层析行为研究
  • 4.2 讨论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表的论文

    • 相关论文文献

    • [1].光学相干层析的三维血管成像方法及其算法[J]. 激光生物学报 2020(05)
    • [2].地震层析速度建模方法研究现状[J]. 石化技术 2020(08)
    • [3].海洋声学层析研究现状与展望[J]. 海洋技术学报 2015(03)
    • [4].海洋声层析观测技术和方法[J]. 海洋学报(中文版) 2010(03)
    • [5].连续流层析在单抗亲和层析中的应用[J]. 药物生物技术 2018(05)
    • [6].基于超限化的吸收层析反演算法研究[J]. 气体物理 2020(02)
    • [7].附加虚拟信号精化水汽层析模型的方法[J]. 武汉大学学报(信息科学版) 2017(11)
    • [8].河道流量的高频声层析监测研究[J]. 南京大学学报(自然科学) 2015(S1)
    • [9].层析介质使用寿命缩小模型的建立和确认[J]. 中国生物制品学杂志 2013(06)
    • [10].层析介质的寿命与层析介质的清洗验证[J]. 生物产业技术 2009(01)
    • [11].约束层析反演及其在地震速度计算中的应用[J]. 石油物探 2013(01)
    • [12].荧光免疫层析分析仪的设计分析[J]. 生命科学仪器 2015(03)
    • [13].层析教学实验的创新研究[J]. 中国科教创新导刊 2010(22)
    • [14].层析γ扫描技术研究[J]. 中国科学:物理学 力学 天文学 2010(08)
    • [15].海洋声层析应用与观测研究综述[J]. 地球物理学进展 2008(06)
    • [16].数据域初至波走时与成像域反射波走时联合层析速度建模方法[J]. 地球物理学报 2019(07)
    • [17].基于分布式压缩感知的量子过程层析[J]. 清华大学学报(自然科学版) 2017(10)
    • [18].侧向层析免疫诊断试剂信号放大的方法[J]. 生物技术世界 2016(01)
    • [19].层析建模技术在库车坳陷东秋山地区静校正应用探索[J]. 地球物理学进展 2015(02)
    • [20].台湾两种大戟科植物不同层析层抗氧化活性分析[J]. 化学与生物工程 2017(12)
    • [21].多基线层析SAR技术的研究现状分析[J]. 测绘通报 2018(01)
    • [22].高精度深度域层析速度反演方法[J]. 石油地球物理勘探 2018(04)
    • [23].沿海流场声层析研究进展[J]. 海洋技术学报 2015(06)
    • [24].一种快速建立层析反演初始模型的方法[J]. 煤田地质与勘探 2009(06)
    • [25].基于立体层析反演的低频模型构建在深水区储层反演中的应用:以南海深水W构造为例[J]. 吉林大学学报(地球科学版) 2018(04)
    • [26].非线性层析反演速度建模技术[J]. CT理论与应用研究 2017(05)
    • [27].关于氨基酸分离的创新层析实验的探究[J]. 教育教学论坛 2019(01)
    • [28].基于断层正则化的网格层析反演在深度域速度场建模中的应用[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版) 2019(06)
    • [29].层析聚酰胺树脂对茶叶中茶多酚的吸附分离[J]. 高分子材料科学与工程 2009(04)
    • [30].热中子层析照相的仿真技术探索研究[J]. 核电子学与探测技术 2009(01)

    标签：;  ;  ;  ;  

    苍耳中抗病物质的作用测定及幼苗中蛋白质层析行为分析
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5