甲氨蝶呤微乳的研究

论文摘要

目的：研制甲氨蝶呤（MTX）微乳,并评价其制剂质量；考察MTX微乳的体外透皮能力和对银屑病动物模型的影响。方法：（1）通过滴定法绘制伪三元相图和确定不同体系的最大载油量,筛选微乳处方；采用RP-HPLC法测定甲氨蝶呤的含量,以外观、粒径及其分布、Zeta电位、含量、pH值为指标考察微乳的稳定性。（2）采用TP-5型智能透皮扩散仪进行体外经皮渗透试验,采用高效液相色谱法测定皮肤接受液中的药物浓度,并把浓度为0.2%、0.1%的MTX微乳与0.2%MTX对照溶液比较,考察微乳的透皮促进作用。（3）①分别用含药0.1%、0.2%的MTX微乳和0.1%维A酸软膏涂抹处于雌激素期的小鼠阴道,每日一次,连续7d,考察阴道上皮基底细胞有丝分裂指数；②分别用含药0.1%、0.2%的MTX微乳和0.1%维A酸软膏涂抹于小鼠尾部,考察小鼠尾部皮肤颗粒层形成的情况。结果：筛选的处方含聚氧乙烯氢化蓖麻油RH-40、大豆磷脂、无水乙醇、油酸乙酯（3:1.5:1.5:3）,所制微乳外观均一透明,平均粒径为25.1 nm,多分散指数0.273,Zeta电位为-1.723 mV；三个批次下测得微乳中MTX含量分别为1.99±0.01、2.02±0.03、2.00±0.02mg-mL-1。体外透皮试验结果显示,0.2%MTX微乳9h单位面积累积渗透量分别是0.1%的MTX微乳与0.2%MTX对照溶液的2.04和2.34倍（P<0.05）。药效学实验显示,与空白对照组相比,MTX微乳低剂量组与维A酸软膏组分别对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂和小鼠尾部鳞片颗粒层形成有显著的抑制和促进作用（有丝分裂指数；颗粒层的鳞片数,P<0.05）,两组间差异显著性（P<0.05）；MTX微乳高剂量组对小鼠阴道上皮基底细胞有丝分裂和小鼠尾部鳞片颗粒层形成都具有非常显著的抑制作用,（有丝分裂指数；颗粒层的鳞片数,P<0.01）,与阳性对照组相比,MTX微乳高剂量组和低剂量组均有显著性差异（P<0.05）。结论：所制MTX微乳理化性质较稳定,工艺简单,质量易控；体外透皮实验中,与0.1%的MTX微乳和0.2%MTX对照溶液相比,0.2%微乳对MTX的透皮具有显著的促进作用；药效学评价过程中,与常规治疗银屑病外用制剂维A酸软膏比较,MTX微乳对促进银屑病样小鼠模型恢复作用更明显。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 前言
• 第一章 甲氨蝶呤微乳的制备与质量评价
• 1.1 仪器与试药
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 微乳处方筛选
• 1.2.2 空白微乳形成的考察
• 1.2.3 水相筛选
• 1.2.4 外观形状和有关性质考察
• 1.2.5 微乳中MTX含量测定方法的建立
• 1.3 实验结果
• 1.3.1 微乳处方筛选结果
• 1.3.2 空白微乳形成的考察实验结果
• 1.3.3 水相筛选结果
• 1.3.4 外观形状和有关性质考察结果
• 1.3.5 微乳中MTX含量测定
• 1.4 讨论与结论
• 第二章 甲氨蝶呤微乳体外经皮渗透实验研究
• 2.1 仪器与试药
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 MTX微乳的制备
• 2.2.2 MTX微乳体外透皮试验
• 2.2.3 皮肤接收液及皮肤滞留药量的测定
• 2.2.4 含量测定方法学考察
• 2.2.5 渗透液样品的检测
• 2.2.6 统计学分析
• 2.3 结果
• 2.3.1 专属性实验
• 2.3.2 线性关系考察
• 2.3.3 最低检测限
• 2.3.4 日内日间精密度和回收率考察
• 2.3.5 体外经皮渗透实验
• 2.3.6 皮肤靶向性试验
• 2.4 讨论与结论
• 第三章 甲氨蝶呤微乳对银屑病动物模型的影响
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 小鼠阴道上皮模型的建立
• 3.2.2 鼠尾鳞片表皮模型的建立
• 3.2.3 统计学分析
• 3.3 结果
• 3.3.1 MTX微乳对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响
• 3.3.2 MTX微乳对小鼠尾鳞片颗粒层形成的影响
• 3.4 讨论与总结
• 总结
• 参考文献
• 致谢
• 已发表文章
• 综述
• 参考文献