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油茶组织培养技术研究

2020-12-12阅读(608)

油茶组织培养技术研究

论文摘要

油茶（Camellia oleifera）是我国南方重要的木本食用油料树种。本研究以油茶优良品种为试材,以其幼胚和未成熟子叶、嫩稍带芽茎段、嫩叶为外植体,通过组织培养技术,采用正交实验、方差分析和多重比较等方法,筛选出了油茶幼胚无菌苗最适培养配方以及未成熟子叶、带芽茎段、叶片的诱导与增殖培养、生根培养与移栽等各个阶段最佳培养基配方,建立了油茶幼胚和子叶、带芽茎段以及叶片的再生体系；此外,探索了油茶花药离体培养影响因子。主要结果如下1.油茶幼胚和未成熟子叶组织培养技术研究。油茶幼胚无菌苗的最适培养配方为WPM+6-BA2.0mg/L+NAA 1.5mg/L,成苗率为90%；未成熟子叶胚性愈伤组织诱导配方为：WPM+6-BA1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,胚状体形成以及根芽分化的最适培养配方为：MS+6.BA3.0mg/L+NAA1.0mg.L-1。2.油茶带芽茎段组织培养技术研究。带芽茎段腋芽诱导的最适培养基配方为：1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L；增殖培养的最适培养基配方为：1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L,增殖倍数可达5倍以上；壮苗的最适培养基配方为：蔗糖2g/L+NAA0.1mg/L；采用1000ppm的IBA处理芽苗基部5S,转入1/2MS空白培养基培养,30d后芽苗的生根率为88.3%,平均生根条数为7.9%,整个再生体系的完成最短周期的一批苗仅需70d,经过炼苗后的油茶苗在泥炭：蛭石（1：1）的基质中生长,成活率最高,可达88.57%。3.油茶叶片组织培养技术研究。愈伤组织诱导的最适培养基配方为WPM+TDZ1.5mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L；愈伤组织分化丛生芽的最适培养基配方为：1/2MS+TDZ1.0mg/L+NAA0.1mg/L+ 6-BA2.0mg/L,可使诱导分化率达17.86%；分化芽增殖的最适培养基配方为：1/2MS+6-BA1.0 mg-L+IBA0.05mg/L,增殖系数达2.79；生根培养的配方为：1/2MS+TDZ0.05mg/L+IBA1.0mg/L。4.油茶花药离体培养影响因子研究。花药最适的低温保持方式为以带花蕾枝条的底部插入水中；花药的低温预处理时间应在10d以内；花药愈伤组织诱导的最适时期为花粉四分体时期；活性C、AgNO3以及Vc三种降低花药褐化的培养基添加物中,以AgNO3效果最优,其诱导率最高,为81%；最适增殖培养基配方为：MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 绪论
  • 1.1 植物组织培养概述
  • 1.1.1 植物组织培养基本原理
  • 1.1.2 植物组织培养的发展简史
  • 1.1.3 植物组织培养在林业生产中的应用
  • 1.2 油茶组织培养的研究概况
  • 1.2.1 油茶的分布及生态学特性简介
  • 1.2.2 油茶生物学特性
  • 1.2.3 油茶组织培养及植株再生研究进展
  • 1.2.4 影响山茶科植株再生的因素
  • 1.3 油茶组织培养的目的和意义
  • 1.4 本研究的技术路线
  • 2 油茶幼胚和未成熟子叶组织培养技术的研究
  • 2.1 材料和方法
  • 2.1.1 实验材料
  • 2.1.2 实验方法
  • 2.2 结果与分析
  • 2.2.1 子叶和幼胚组培苗的生长进程
  • 2.2.2 不同培养基和生长调节剂对幼胚再生体系的影响
  • 2.2.3 不同培养基和生长调节剂对子叶胚性愈伤组织诱导的影响
  • 2.2.4 不同生长调节剂对体细胞胚再生体系的影响
  • 2.3 结论与讨论
  • 图版
  • 3 油茶带芽茎段组织培养技术研究
  • 3.1 实验材料
  • 3.2 实验方法
  • 3.2.1 油茶茎段腋芽的诱导研究
  • 3.2.2 油茶芽的增殖研究
  • 3.2.3 油茶芽的伸长研究
  • 3.2.4 油茶试管苗的生根研究
  • 3.2.5 油茶苗的炼苗和移栽
  • 3.3 结果与分析
  • 3.3.1 芽诱导阶段各处理的结果分析
  • 3.3.2 不同浓度的6-BA与NAA组合对油茶芽增殖倍数的影响
  • 3.3.3 油茶芽的伸长研究
  • 3.3.4 油茶试管苗的生根研究
  • 3.3.5 油茶苗的炼苗和移栽
  • 3.4 结论与讨论
  • 3.4.1 基本培养基对芽快繁体系建立的影响
  • 3.4.2 蔗糖浓度对芽快繁体系建立的影响
  • 3.4.3 植物激素对芽快繁体系建立的影响
  • 图版
  • 4 油茶优良无性系叶片组织培养的研究
  • 4.1 实验材料
  • 4.2 实验方法
  • 4.2.1 材料预处理
  • 4.2.2 油茶叶片愈伤组织诱导和分化的研究
  • 4.2.3 分化芽的增殖研究
  • 4.2.4 分化芽生根的研究
  • 4.2.5 实验观察
  • 4.3 结果与分析
  • 4.3.1 油茶叶片愈伤组织诱导和分化的研究
  • 4.3.2 分化芽的增殖研究
  • 4.3.3 分化芽生根的研究
  • 4.4 结论与讨论
  • 4.4.1 基本培养基对叶片再生体系的影响
  • 4.4.2 愈伤组织诱导与分化
  • 4.4.3 PH值对叶片再生体系的影响
  • 图版
  • 5 油茶花药离体培养影响因子研究
  • 5.1 材料和方法
  • 5.1.1 材料
  • 5.1.2 愈伤组织的诱导、继代培养
  • 5.2 结果与分析
  • 5.2.1 外部形态特征与内部结构的对应关系
  • 5.2.2 油茶花药愈伤组织诱导培养的影响因素分析
  • 5.2.3 油茶花药愈伤组织继代增殖培养的影响因素分析
  • 5.3 结论和讨论
  • 5.3.1 不同花粉时期对油茶愈伤组织诱导的影响
  • 5.3.2 低温预处理对油茶愈伤组织诱导的影响
  • 5.3.3 不同添加物对油茶愈伤组织诱导的影响
  • 5.3.4 不同激素及配比对油茶愈伤组织继代增殖的影响
  • 图版
  • 6 主要结论与创新点及研究展望
  • 6.1 本研究的主要结论
  • 6.1.1 油茶不同外植体组织培养技术研究
  • 6.1.2 油茶不同外植体组织培养技术的对比研究
  • 6.2 本研究的主要创新点
  • 6.3 研究展望
  • 参考文献
  • 攻读学位期间的主要学术成果
  • 致谢

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