补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠的干预作用及其机理研究

论文摘要

目的本研究拟通过综述中医学对男性不育症的认识与治疗现状以及现代医学研究进展,并根据当前男性不育症治疗难点以及中医药治疗优势,结合导师临床经验,选用腺嘌呤所致肾阳虚型生精细胞损伤动物模型,同时以临床验证有效的补肾生精丸(Bushen Shengjing Pill,简称BS)为治疗药物,探讨BS对肾阳虚型生精细胞损伤模型大鼠的作用机理,为临床应用提供药理学实验依据。方法实验动物的分组及给药:选用3个月龄SD雄性大鼠96只,随机分为正常组、模型组、BS高剂量组和低剂量组,每组24只。空白组:喂饲0.5%羧甲基纤维素钠,10mL/kg;模型组:喂饲腺嘌呤溶液250mg/kg;BS高低剂量组:首先分别喂饲BS混悬液400mg/kg和100mg/kg,40分钟后喂饲腺嘌呤溶液250mg/kg,实验总持续时间均为40d。各组动物分别在开始给药的第20d、30d和40d各取8只,于末次给药1h后在安静状态下用10%水合氯醛麻醉,剖腹取腹主动脉血分离血清采用酶免法检测实验动物血清生殖内分泌激素变化;取出右侧睾丸用10%甲醛液固定,在光学显微镜下观察睾丸组织形态学改变;离断右侧附睾组织进行精子活动率、精子计数观察;取左侧睾丸采用黄嘌呤氧化酶法检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、采用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA)含量;采用硝酸还原酶法检测一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮(NO)含量;用TUNEL法检测生精细胞凋亡情况。结果实验第20d模型精子活动率、精子计数、FSH、LH、T值、SOD活性及MDA含量、NOS活性及NO含量与其它三组间存在着显著的统计学差异,可以判定实验第20d造模没有成功。实验第30d模型组各项指标与其它三组间存在着显著的统计学差异,BS高剂量组和低剂量组各项指标均与模型组和正常组具有显著的统计学差异,且BS高剂量组优于BS低剂量组。实验第40d模型组各项指标与其它三组间存在着显著的统计学差异,BS高剂量组和低剂量组各项指标与模型组比较具有显著的统计学差异,但疗效和作用机制指标没有比30d明显,表明实验第40d模型组大鼠生精细胞损伤严重。结论腺嘌呤能够使模型大鼠出现绻卧、反应迟钝等类似肾阳虚的症状;能够使模型大鼠精子活动率下降,生殖腺脏器系数改变;能够使模型大鼠睾丸曲细精管萎缩,管腔内上皮变薄等组织形态学改变。腺嘌呤能够使模型大鼠血清T、LH值降低;睾丸组织NOS活性及NO含量增高;SOD活性降低,MDA含量增高;生精细胞凋亡明显增强。BS可显著提高肾阳虚型生精细胞损伤模型大鼠的精子数量和质量,改善内分泌功能和抗氧

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 主要缩略语
• 第一部分 文献综述
• 一 男性不育症的中医学研究进展
• 1 病因病机认识
• 2 临床治疗进展
• 3 小结
• 参考文献
• 二 男性不育症的现代医学研究进展
• 1 流行病学特征
• 2 病因病理认识
• 3 发病机制研究
• 4 临床研究现状
• 5 小结
• 参考文献
• 三 男性不育症的实验研究进展
• 1 男性不育症动物模型的建立
• 2 腺嘌呤与肾阳虚
• 3 精液质量异常的实验研究近况
• 4 内分泌失调实验研究近况
• 5 精子的形态结构和功能的改变
• 6 小结
• 参考文献
• 第二部分 实验研究
• 实验一 对生精细胞损伤模型大鼠精子及脏器系数的影响
• 实验二 对生精细胞损伤模型大鼠睾丸组织形态学的影响
• 实验三 对生精细胞损伤模型大鼠生殖内分泌激素的影响
• 实验四 对生精细胞损伤模型大鼠睾丸组织抗氧化系统（SOD、MDA）的影响
• 实验五 对生精细胞损伤模型大鼠睾丸组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响
• 实验六 对生精细胞损伤模型大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响
• 结论
• 致谢
• 个人简历