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粉葛组织培养及其铜、铅、镉含量研究

2020-12-12阅读(660)

粉葛组织培养及其铜、铅、镉含量研究

论文摘要

粉葛为豆科植物甘葛藤（Pueraria thomsonii Benth.）的干燥根。性味甘、辛、凉,具有解肌退热,生津止渴,透疹,升阳止泻,通经活络,解酒毒等功效。粉葛是我国传统的一味中草药,可药食两用。近年来,粉葛的药用和食用价值越来越受到人们的关注,尤其是在保健品的开发上。所以,粉葛具有广阔的开发价值和市场前景。本课题利用采自大竹县的秦巴2号粉葛的腋芽及茎尖作为外植体,消毒后,接种于启动培养基上培养。实验结果表明：最佳启动培养基为：MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L;丛生芽增殖最佳培养基：MS+6-BA0.5mg/L+KT0.1mg/L+IAA0.05mg/L;采用先暗培养再光培养的方式有利于粉葛愈伤组织的诱导（每天光照12h,光强度12001x,培养温度维持在25±1℃）,茎段是愈伤组织诱导的最佳外植体,愈伤组织诱导最佳培养基MS+6-BA1.0mg/L+IAA0.2mg/L;生根培养的最佳培养基：1/2MS+IAA1.0mg/L;选取生长健壮的试管苗,炼苗2d后移栽到苗床（营养土：蛭石：珍珠盐=3：1：1）中,成活率大于95%。该方法可快速建立起粉葛的无菌快繁体系。本课题利用粉葛试管苗的嫩芽作为包埋材料对人工种子进行研究。研究结果发现：3%海藻酸钠在2%氯化钙中反应8-10min是粉葛人工种子的最佳制作条件；人工胚乳为MS1/2+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L的粉葛人工种子直接播种在MS1/2培养基上,人工种子的发芽率和生根率均为100%；采用培养皿培养的效果不如培养基。本课题利用火焰原子吸收光谱法测定粉葛中铜的含量,石墨炉原子吸收光谱法测定粉葛中铅、镉的含量。在实验条件优化情况下,测定方法铜、铅、镉的检出限分别为：0.03mg/L、0.243gg/L和0.012μg/L,加标回收率在97.26%—105.60%之间,相对标准偏差均小于5%。方法学考察符合分析要求,所测7种不同产地粉葛样品中铜、铅、镉三种重金属元素含量均在《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》的限量指标内。用0.2%硝酸镁和1%磷酸二氢铵作为Cd和Ph的基体改进剂可使灰化温度分别提高到500℃和850℃,并有效提高原子化温度,减小基体干扰。研究结果表明：该方法简便,快速,灵敏,可为粉葛的质量控制提供参考。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第1章 前言
  • 1.1 立题依据
  • 1.2 国内外研究概况
  • 1.3 本课题主要研究的内容及方法
  • 1.3.1 主要研究内容
  • 1.3.2 主要研究方法
  • 第2章 粉葛现代研究概况
  • 2.1 粉葛概况
  • 2.1.1 国内外葛根的历史
  • 2.1.2 粉葛名称的演变
  • 2.1.3 粉葛与野葛的区别
  • 2.1.4 粉葛化学成分研究进展
  • 2.1.5 药理作用
  • 2.1.6 粉葛繁育与种植
  • 2.2 粉葛资源的开发与应用
  • 2.2.1 临床应用
  • 2.2.2 食品、保健品开发与应用
  • 2.2.3 其它方面的应用
  • 2.3 粉葛组织培养研究概况
  • 2.3.1 粉葛快速繁殖技术研究进展
  • 2.3.2 人工种子研究进展
  • 2.4 粉葛重金属含量测定研究进展
  • 2.4.1 粉葛重金属含量研究
  • 2.4.2 重金属对人体的危害
  • 2.4.3 药用植物及制剂外经贸绿色行业标准
  • 第3章 粉葛组织培养研究
  • 3.1 仪器及试剂
  • 3.2 无菌体系建立
  • 3.2.1 实验材料
  • 3.2.2 外植体消毒及接种
  • 3.2.3 结果与分析
  • 3.3 丛生芽增殖培养
  • 3.3.1 丛生芽增殖培养基的筛选
  • 3.3.2 结果与分析
  • 3.4 愈伤组织培养
  • 3.4.1 愈伤组织培养基筛选
  • 3.4.2 结果与分析
  • 3.5 丛生芽生根培养
  • 3.5.1 生根培养基筛选
  • 3.5.2 结果与分析
  • 3.6 粉葛试管苗移栽
  • 3.6.1. 材料和方法
  • 3.6.2. 结果和讨论
  • 第4章 粉葛人工种子初步研究
  • 4.1 仪器及试剂
  • 4.2 海藻酸钠浓度对粉葛人工种子的影响
  • 4.2.1. 材料和方法
  • 4.2.2. 结果和讨论
  • 4.3 不同人工胚乳对粉葛人工种子生长的影响
  • 4.3.1 材料及方法
  • 4.3.2 结论与分析
  • 4.4 不同培养方式对粉葛人工种子生长的影响
  • 4.4.1. 材料和方法
  • 4.4.2. 结果与讨论
  • 第5章 粉葛中重金属铜、铅、镉含量研究
  • 5.1 样品、仪器及试剂
  • 5.2 供试液制备
  • 5.3 标准溶液的制备
  • 5.3.1 铜标准溶液的配制
  • 5.3.2 铅和镉标准溶液的配制
  • 5.4 仪器工作条件
  • 5.5 标准曲线绘制
  • 5.5.1 铜元素标准曲线绘制
  • 5.5.2 镉、铅元素标准曲线绘制
  • 5.6 方法学考察
  • 5.6.1 检出限
  • 5.6.2 精密度考察
  • 5.6.3 重复性考察
  • 5.6.4 供试液稳定性考察
  • 5.6.5 加标回收率
  • 5.7 样品含量测定
  • 5.8 结果与讨论
  • 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录
  • 攻读硕士学位期间发表的学术论文及科研成果

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