两株放线菌次生代谢产物及生物活性的研究

论文摘要

海南省地处热带、亚热带季风气候区,四面环海。五指山是海南省最大的国家自然保护区,也是世界上地势最高的原始热带雨林之一；霸王岭林区是海南热带雨林的典型代表,气候温和,雨量充沛,动植物种类繁多,生态系统完整,生态功能齐全,它们都蕴藏着极其丰富的放线菌资源。曾会才研究员课题组已从这两处地方采集的土壤中分离到多株具有抗菌活性的放线菌菌株,并对其做了初步鉴定。本试验旨在从其中两株活性菌株中分离出具有活性且结构新颖的化合物。本次研究通过多种柱色谱技术对两株活性菌株的次生代谢产物进行了分离纯化,并根据理化性质和波谱数据（UV, IR, MS, 1D NMR和2D NMR）对分离到的化合物进行了鉴定。从链霉菌15-4-2中共分离得到14个化合物,分别鉴定为：4α,10β-dimethyldecah--ydronaphthalene-1α,3β,5α,7α-tetraol （1）,5αH-eudesmane-1α,6α,11-triol（2）,2-methyl-2, 5,6-bornantriol （3）,7-（4-methoxybenzyl）-4,5,6,7-tetrahydro-1,3-oxazepine-5,6-diol （4）, 4,4’-（3-hydroxypropane-1,1-diyl）diphenol （5）,N-（2-羟基-1-（4-甲氧基）乙基）乙酰胺（6）,2-（4-甲氧基）-2-（丙胺基）乙醇（7）,cytoxazone （8）,对羟基苯甲酸（9）,（2S,3R）-3-羟基-2-甲基丁酸（10）,对甲基苯酚（11）,1,4-二甲氧基苯（12）。其中,化合物1-5为新化合物。化合物13和14结构待定。从哥斯达黎加链霉菌（Stretomyces costaricanus）的发酵液中分离得到1个化合物,鉴定为放线菌素D （actinomycin D） （15）。采用滤纸片法测定化合物的抗菌活性,结果显示化合物1,6,8,9和10对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）有抑制作用,化合物13和14对香蕉枯萎病菌,棉花枯萎病菌和西瓜枯萎病菌均有抑制作用。其中,化合物6,8,9和10对MRSA的抑制作用均为首次发现。化合物15对慢性髓原白血病细胞（K562）、人胃癌细胞（SGC-7901）和人肝癌细胞（SMMC-7721）的增殖显示有生长抑制活性,并首次发现对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus, SA）,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）,香蕉枯萎镰刀菌4号生理小种（Fusarium oxysporum f.sp. cubense race 4）,西瓜枯萎镰刀菌（Fusarium oxysporum f.sp niveum）和棉花枯萎镰刀菌（Fusarium oxysporum f.sp vasinfectum）有抑制作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 微生物资源研究概况
• 1.1.1 土壤微生物资源
• 1.1.2 海洋微生物资源
• 1.1.3 极端环境微生物资源
• 1.1.4 湿地微生物资源
• 1.1.5 植物内生菌资源
• 1.1.6 动物内生菌资源
• 1.1.7 其他微生物资源
• 1.2 土壤放线菌的应用
• 1.2.1 土壤放线菌在医药上的应用
• 1.2.2 土壤放线菌在农业上的应用
• 1.3 土壤放线菌次生代谢产物的研究概况
• 1.3.1 β-内酰胺类抗生素
• 1.3.2 氨基糖苷类抗生素
• 1.3.3 MLS类抗生素
• 1.3.4 糖肽类抗生素
• 1.3.5 安莎类抗生素
• 1.3.6 四环类抗生素
• 1.3.7 蒽环类抗生素
• 1.3.8 磷霉素
• 1.3.9 氯霉素
• 1.4 研究目的及意义
• 2 实验材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 放线菌放线菌菌株
• 2.1.2 植物病原菌
• 2.1.3 人体病原菌
• 2.1.4 肿瘤细胞株
• 2.1.5 培养基
• 2.1.6 试剂
• 2.1.7 常用耗材
• 2.2 仪器设备
• 2.3 实验分离及结构鉴定技术
• 2.3.1 天然产物分离纯化
• 2.3.2 化合物结构鉴定
• 2.4 菌株15-4-2化学成分的研究
• 2.4.1 菌株15-4-2的筛选
• 2.4.2 菌株15-4-2化学成分的分离提取
• 2.5 哥斯达黎加链霉菌（菌株162）活性成分的分离提取
• 2.5.1 菌株的来源
• 2.5.2 活性成分的分离
• 2.6 生物活性测定
• 2.6.1 抗人体病原菌活性测定
• 2.6.2 抗农业病原菌活性测定
• 2.6.3 抗肿瘤活性测定
• 3 结果与分析
• 3.1 链霉菌15-4-2化学成分研究
• 3.1.1 菌株15-4-2的筛选
• 3.1.2 化学成分结构鉴定
• 3.1.3 抗菌活性测定
• 3.2 哥斯达黎加链霉菌化学成分研究
• 3.2.1 抗菌活性追踪
• 3.2.2 化合物的鉴定
• 4 实验总结与讨论
• 项目资助
• 参考文献
• 缩略语表
• 部分化合物核磁共振谱图
• 个人简历
• 致谢