脂代谢紊乱对肾小管上皮细胞hUAT基因表达的影响

脂代谢紊乱对肾小管上皮细胞hUAT基因表达的影响

论文摘要

目的 观察不同浓度脂蛋白和游离脂肪酸对肾小管上皮细胞(HK-2细胞)人尿酸盐转运子(human urate transporter hUAT)mRNA表达的影响。方法所有实验均在体外培养的HK-2细胞上进行。根据培养液中所含脂蛋白和游离脂肪酸的不同,将HK-2细胞分为6大组。其中对照组根据添加乙醇与否分为C1、C2组,脂蛋白处理组根据脂蛋白浓度的不同再分为1、2、3、4组,游离脂肪酸处理组根据游离脂肪酸浓度的不同再分为1、2、3组。①对照组:C1组:DMEM/F-12 C2组:DMEM/F-12+1%(V/V)乙醇 ②低密度脂蛋白(LDL)组:L1组:DMEM/F-12+50ug/m1 LDL L2组:DMEM/F-12+100ug/ml LDL L3组:DMEM/F-12+200ug/ml LDL L4组:DMEM/F-12+400ug/ml LDL。③高密度脂蛋白(HDL)组:H1组:DMEM/F-12+50ug/ml HDL H2组:DMEM/F-12+100ug/ml HDL H3组:DMEM/F-12+200ug/ml HDL H4组:DMEM/F-12+400ug/ml HDL。④极低密度脂蛋白(VLDL)组:V1组:DMEM/F-12+50ug/ml VLDL V2组:DMEM/F-12+100ug/ml VLDL V3组:DMEM/F-12+200ug/ml VLDL V4组:DMEM/F-12+400ug/ml VLDL ⑤油酸(OA)组:A1组:DMEM/F-12+100 umol/l OA+1%(V/V)乙醇A2组:DMEM/F-12+200 umol/l OA+1%(V/V)乙醇 A3组:DMEM/F-12+400umol/l OA+1%(V/V)乙醇 ⑥软脂酸(PA)组:P1组:DMEM/F-12+100 umol/l PA+1%(V/V)乙醇P2组:DMEM/F-12+200 umol/l PA+1%(V/V)乙醇 P3组:DMEM/F-12+400umol/l PA+1%(V/V)乙醇。每种条件下,均培养6瓶细胞取均数,培养48小时,收集细胞,计数,抽提总RNA。取1ugRNh逆转录为cDNA,荧光定量PCR共扩增hUAT和内参照GAPDH目的片段,分析计算hUAT mRNA相对表达量。整个实验过程重复一次。统计学分析采用t检验和单因素方差分析,显著性标准为P<0.05。结果 ①所有标本均能检测到hUAT mRNA的表达。②干预48小时后,随LDL浓度的增加,hUATmRNA表达水平下降;对照组hUAT mRNA表达水平明显高于L1、L2、L3、L4组,差异有显著性(P=0.000),除L2组和L3组之间差异无显著性(P=0.440)及L3组和L4组间差异无显著性(P=0.158)外,余各组间差异均有显著性(P<0.05)。③随着VLDL浓度的增加,hUAT mRNA表达水平明显下降;对照组hUAT mRNA表达水平明显

论文目录

  • 1 前言
  • 2 材料与方法
  • 2.1 实验仪器
  • 2.2 实验试剂
  • 2.3 实验方法
  • 3 结果
  • 3.1 细胞总RNA的检测
  • 3.2 荧光定量PCR反应实验结果
  • 3.3 不同浓度LDL对hUAT表达的影响
  • 3.4 不同浓度VLDL对hUAT表达的影响
  • 3.5 不同浓度HDL对hUAT表达的影响
  • 3.6 不同浓度脂蛋白对hUAT表达的影响
  • 3.7 不同浓度PA对hUAT表达的影响
  • 3.8 不同浓度OA对hUAT表达的影响
  • 4 讨论
  • 5 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 攻读学位期间的科研工作
  • 致谢
  • 学位论文独创性声明
  • 学位论文知识产权权属声明
  • 相关论文文献

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