不同中医内治法对实验性家兔视网膜血管病变的干预研究

论文摘要

目的：通过观察不同中医内治法，即选用经方清热凉血之犀角地黄汤、活血化瘀之桃红四物汤、清热解毒之黄连解毒汤以及滋阴降火之知柏地黄汤对庆大霉素致家兔视网膜尤其是血管损伤的治疗作用，进一步探讨庆大霉素对视网膜毒性的作用机理；为中医药治疗视网膜血管性疾病尤其是视网膜血管炎提供新的研究思路和方法。方法：将500ug庆大霉素注入青紫蓝兔玻璃体腔，造模24小时后，用生理盐水、《千金要方》犀角地黄汤、《医宗金鉴》桃红四物汤、《外台秘要》黄连解毒汤及《医宗金鉴》知柏地黄汤对家兔进行灌胃，通过眼底彩照、眼底荧光血管造影、计算机图象分析处理系统、光镜及电镜标本制作、免疫组织化学检测细胞间黏附分子-1、von Willebrand因子含量以及视网膜血管消化铺片等方法来观察不同药物作用7天及14天各组兔的眼底表现、组织形态和超微结构等变化情况。结果：1庆大霉素对青紫蓝兔玻璃体腔注射后视网膜损伤的表现以视网膜血管栓塞和出血为主，眼底荧光血管造影显示视网膜血管无灌注和荧光素着染及渗漏，背景荧光增强。病理学改变首先从视网膜色素上皮细胞开始，其次是感光细胞层，透射电镜显示首先是视网膜色素上皮细胞线粒体的损伤，各层细胞的结构改变也以线粒体最为明显。视网膜血管的变化机制为白细胞栓塞，表现为节段状血管阻塞和出血、白细胞聚集和渗漏。2桃红四物汤中剂量能明显改善庆大霉素致家兔视网膜出血及炎症反应，明显降低视网膜ICAM-1的表达，其作用优于犀角地黄汤中剂量，它对视网膜von Willebrand因子表达的下调作用不明显，可能是通过降低视网膜ICAM-1的表达从而减少炎性细胞黏附而减轻炎症反应；黄连解毒汤中剂量早期能明显减少视网膜出血，可能与庆大霉素致家兔视网膜损伤为急性毒性反应，主要表现为血管栓塞出血，而其具有清热解毒之功效，其提取物能显著延长凝血酶时间，抑制纤维蛋白原向纤维蛋白转变，有明显的抗血栓作用有关；知柏地黄汤对庆大霉素致视网膜血管损伤的保护作用可能在14天之后，即病变的更晚期阶段，才能表现出来，因为视网膜血管炎症后期往往瘀热伤阴，此时治宜滋阴凉血，佐以散瘀之品。3视网膜血管消化铺片技术是一种研究视网膜血管炎的良好方法，不仅可以清楚地观察到毛细血管的结构、走行和分布，还可以直观地看到视网膜的出血程度、血管壁及其周围炎性细胞的浸润等形态学改变，这也恰是不能用光镜和电镜切片技术所替代的。结论：1庆大霉素对青紫蓝兔玻璃体腔注射模型的血管改变与很多眼底病变尤其是视网膜血管炎从临床表现到病理变化都有很多相似之处，不失为一种良好的造模方法，值得我们进一步研究探讨。2黄连解毒汤中剂量早期能明显减少庆大霉素致家兔视网膜出血；桃红四物汤作为活血化瘀、养血止血的经典方，其中剂量能有效控制庆大霉素致家兔视网膜出血及炎症反应，明显改善视网膜微循环功能，这为临床视网膜血管炎及其相关疾病的中医药治疗提供了新的思路，具有很大的指导作用。3视网膜血管消化铺片能更直接地观察视网膜血管管腔和细胞，很值得我们在今后视网膜血管病变的实验研究中不断进行尝试。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语
• 综述
• 前言
• 不同中医内治法对实验性家兔视网膜血管病变的干预研究
• 材料和方法
• 1 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 药物和试剂
• 1.3 主要仪器
• 2 方法
• 2.1 实验分组
• 2.2 造模方法
• 2.3 给药方法
• 2.4 实验观察
• 2.5 取材
• 2.6 石蜡切片及光镜标本制备
• 2.7 免疫组织化学标本制备
• 2.8 视网膜血管消化铺片制备
• 2.9 透射电镜标本制备
• 3 资料分析
• 3.1 眼部体征观察及统计
• 3.2 炎性细胞记数
• 3.3 免疫组织化学结果分析
• 4 统计学处理
• 结果
• 1 实验观察
• 2 光镜观察
• 3 视网膜出血面积和视盘面积比值
• 4 视网膜血管及周围炎性细胞记数及分类
• 5 免疫组织化学结果分析
• 5.1 视网膜ICAM-1表达结果
• 5.2 视网膜von Willebrand因子表达结果
• 6 视网膜血管消化铺片
• 7 电镜观察
• 小结
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 附图
• 附图1 各组兔眼底彩照和荧光血管造影
• 附图2 各组兔视网膜光学显微镜观察
• 附图3 各组兔视网膜ICAM-1的表达
• 附图4 各组兔视网膜von Willebrand因子的表达
• 附图5 各组兔视网膜血管消化铺片
• 附图6 各组兔视网膜电镜观察