嗜酸性粒细胞对淋巴细胞、肿瘤细胞活性影响的实验研究

论文摘要

目的:嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）是一类起源于骨髓干细胞,并且在骨髓内分化成熟,参与抗寄生虫感染和超敏反应的重要白细胞。本实验初步探讨EOS体外抗肿瘤及对淋巴细胞活性的影响,进而为揭示EOS在肿瘤免疫中的作用机制奠定基础。方法:（1）建立豚鼠I型超敏反应模型（第17天发敏处死）,采集血液和腹腔液,应用Percoll液不连续密度梯度法分离豚鼠血液和腹腔液中EOS,取出豚鼠的肺脏和脾脏,HE染色观察肺脏和脾脏组织结构。（2）放射免疫法检测豚鼠血清以及嗜酸性粒细胞和淋巴细胞共同培养的上清液（Supernatant of Eosinophiland Lymphocyte Cocultured,SELC）中TNF-α和IL-4的含量。（3）MTT法分别测定EOS、SELC、嗜酸性粒细胞裂解液（Lysis liquid of Eosinophil,LLE）对K562（白血病细胞）和MCF-7（乳腺癌细胞）增殖活性的影响。结果:1.豚鼠血液和腹腔液EOS（1×103个/ml、1×104个/ml、1×105个/ml）分别作用于脾淋巴细胞48h后,脾淋巴细胞增殖显著（P＜0.05）,PI最高分别达1.92,2.58。血清和SELC中IL-4和TNF-α含量明显增高（P＜0.05）。2.SELC12、SELC24、SELC48分别作用于K562和MCF-7,以1×105个/ml的SELC48分别与K562和MCF-7作用48h后,明显抑制K562和MCF-7细胞的增殖（P＜0.05）。3.豚鼠血液EOS（1×103个/ml、1×104个/ml、1×105个/ml）与K562细胞共培养48h后,对K562细胞增殖未表现出明显的抑制作用（P＞0.05）,而腹腔液EOS（1×103个/ml、1×104个/ml、1×105个/ml）与K562细胞共培养12～48h,对K562细胞增殖表现出明显抑制作用（P＜0.05）,以24h的抑制作用最明显,抑制率最高可53.33%,且随EOS细胞数的递增,其抑制作用逐渐增强。4.豚鼠血液EOS（1×103个/ml、1×104个/ml、1×105个/ml）与MCF-7细胞共培养,以1×105个/ml的血液EOS对MCF-7细胞增殖表现出明显的抑制作用（P＜0.01）,以12h抑制作用最为显著,抑制率可高达37.80%;豚鼠腹腔液EOS（1×103个/ml、1×104个/ml、1×105个/ml）与MCF-7细胞共培养,以48h抑制作用最明显（P＜0.01）,抑制率最高可达28.98%。5.LLE分别与K562和MCF-7细胞共培养,在显微镜下观察,48h后K562形态出现明显改变,细胞形态不规整、边缘粗糙、胞浆混浊;MCF-7细胞亦呈多种形态、粗糙、排列疏松、出现脱落。6.LLE分别作用于K562和MCF-7,以高浓度LLE（EOS裂解前的浓度为1×105个/ml）作用于K562 48h,显著抑制K562细胞增殖（P＜0.05）,抑制率可达26.13%。而MCF-7从12h开始,细胞增殖表现出不同程度的抑制,并且呈剂量时间依赖性（P＜0.05）。结论:1.EOS可以促进淋巴细胞的增殖活性,提高血清和SELC中IL-4和TNF-α的含量。2.SELC、腹腔液EOS、LLE可以抑制K562的增殖。3.SELC、血液EOS、腹腔液EOS、LLE可以抑制MCF-7的增殖。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 前言
• 第一部分 EOS对淋巴细胞活性影响的实验研究
• 材料与方法
• 结果
• 第二部分 SELC对肿瘤细胞活性影响的实验研究
• 材料和方法
• 结果
• 第三部分 EOS对肿瘤细胞活性影响的实验研究
• 材料与方法
• 结果
• 第四部分 LLE对肿瘤细胞活性影响的实验研究
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 综述
• 发表论文
• 致谢