卡特兰组培快繁技术的研究

论文摘要

被誉为“洋兰之王”的卡特兰,花朵雍容华贵,是目前世界上栽培最多,最受人们喜爱的洋兰之一。其花有特殊的芳香,是高档观赏花卉,也是切花的高级材料,常出现在喜庆、宴会上,不仅适用于点缀家庭窗台、阳台或室内环境,作公务活动摆花和插花欣赏,也是制作新娘捧花、装饰婚车的优质材料,成为节庆佳日,馈赠亲朋的重要花卉之一。在国际上,一枝卡特兰的切花,值数十美元。目前由于专业性生产卡特兰的水平不高,生产效率低,市场售价极高,因此,对于卡特兰组织培养的研究将是解决这一问题的关键环节。本试验以卡特兰根蔸为外植体诱导丛生芽,探索以丛生芽途径再生植株的方法进行快速繁殖。主要围绕外植体灭菌、丛生芽诱导、丛生芽增殖、徒长苗增殖、壮苗生根、炼苗移栽等几个方面进行研究。研究的主要问题集中在对不同外植体的选择、不同灭菌方法的选择、不同基本培养基类型及培养方式的选择、不同激素配比和用量的选择、不同添加物的选择、不同碳源以及不同活性炭用量的选择等多个方面。主要采用正交设计安排试验,数据采用SAS9.1软件分析处理。本文意图通过上述研究,筛选出最佳技术参数组合,建立卡特兰最优再生体系,进一步扩大卡特兰外植体选择范围,进而提高卡特兰商业化生产效率,为卡特兰育苗提供技术支持。结果表明:以卡特兰根蔸为外植体,最佳的灭菌方法流程是:保留根蔸→自来水冲洗→洗衣粉上清液浸泡10分钟并用软刷轻轻刷去表面污垢（不将包叶除去）→自来水冲洗1小时→置于超净工作台上→70%酒精浸泡30 s→无菌水冲洗3次→0.2%HgCl2浸泡10min→无菌水冲洗8次（每次5 min）→吸干水分并将包叶除去→立即接种。无菌率达到66.67%。影响卡特兰根蔸诱导丛生芽的主要因素为细胞分裂素BA和基本培养基,其中以BA 5.0 mg/L和KC为最优,次要的影响因素为天然添加物,以香蕉泥100 g/L最好。最适宜的配方为KC+BA 5.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+香蕉泥100 g/L+活性炭1.0g/L+食糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH值为5.5。诱导率平均达到83.33%。影响卡特兰丛生芽增殖的主要因素有基本培养基、BA、NAA、株高、琼脂用量、丛植密度、活性炭以及苗处理方式。其中,基本培养基选用KC,BA取0.5 mg/L,NAA取0.2mg/L可以明显促进丛生芽增殖。材料选用2 cm的左右高的试管苗,苗基部纵向切割处理,琼脂浓度调至4 g/L,添加1 g/L的活性炭,并且按照每瓶3株的密度培养,可以明显促进丛生芽增殖。而无论是食糖、蔗糖还是葡萄糖对丛生芽增殖影响差别都不大,都可以选择。丛生芽增殖最适宜的培养基配方是:KC+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+香蕉泥100 g/L+活性炭1.0 g/L+食糖30 g/L+琼脂4 g/L,pH值为5.5。适宜的卡特兰徒长苗增殖的培养基配方为:1/2 MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.1mg/L+香蕉泥100 g/L+活性炭1.0g/L+食糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH值为5.5。最适宜的卡特兰生根的培养基的配方为:KC+BA 0.1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA30.2 mg/L+活性炭1.0g/L+食糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH值为5.5。最适宜的卡特兰壮苗的培养基的配方为:KC+BA 0.1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA3 0.1 mg/L+活性炭1.0 g/L+食糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH值为5.5。卡特兰移栽时,先在室内炼苗6天,再进行移栽,试验发现水苔加陶粒和花生壳的混合物是较好移栽基质,成活率可达100%,且小苗生长健壮,叶片呈现深绿色且发亮,叶面积较大。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 文献综述
• 卡特兰的形态特征和习性
• 卡特兰组织培养研究进展
• 1、引言
• 2、材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 技术路线
• 2.3 初代培养设计方案
• 2.3.1 无菌材料的建立
• 2.3.2 筛选诱导丛生芽培养基
• 2.4 丛生芽继代增殖培养基设计方案
• 2.5 生根与壮苗培养
• 2.6 取生根试管苗各部分为外植体的试验
• 2.7 炼苗移栽
• 2.8 数据计算方法与分析工具
• 3、结果与分析
• 3.1 初代培养
• 3.1.1 无菌材料的建立
• 3.1.2 筛选根蔸诱导丛生芽培养基
• 3.2 丛生芽继代增殖培养
• 3对丛生芽增殖的影响'>3.2.1 基本培养基、BA、NAA、GA₃对丛生芽增殖的影响
• 3.2.2 碳源对丛生芽增殖的影响
• 3.2.3 株高对丛生芽增殖的影响
• 3.2.4 琼脂用量对丛生芽增殖的影响
• 3.2.5 幼苗处理方式对丛生芽增殖的影响
• 3.2.6 活性碳对丛生芽增殖的影响
• 3.2.7 丛植密度对丛生芽增殖的影响
• 3.2.8 徒长苗增殖试验
• 3.3 生根与壮苗培养
• 3.3.1 根培养
• 3.3.2 壮苗培养
• 3.4 取生根试管苗各部分为外植体的试验结果
• 3.5 移栽
• 4、结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.1.1 卡特兰组织培养条件
• 4.1.2 外植体的选取
• 4.1.3 外植体无菌体系的建立
• 4.1.4 丛生芽诱导
• 4.1.5 丛生芽增殖的最佳培养基配方
• 4.1.6 徒长苗增殖
• 4.1.7 壮苗与生根
• 4.1.8 移栽
• 4.2 讨论
• 4.2.1 卡特兰幼苗增殖的不同途径及优劣比较
• 4.2.2 卡特兰不同外植体的影响
• 4.2.3 徒长苗的增殖
• 4.2.4 后续的工作计划
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 个人简介